富硒黑木耳中無機元素及硒含量測定

張冬冬

硒是人和動物生命中必需的微量元素，缺硒或過量均會導致人畜得病。菌多糖在國際上被稱為“生物反應調節劑”，目前已成為醫藥、保健品開發的“熱點”。黑木耳多糖由于其優良的人體保健功能，在醫學界、營養學界等都進行了比較多的研究，并證明了多種臨床保健功能。黑木耳多糖的提取九十年代已引起人們的關注，但黑木耳硒多糖的提取工藝未見報導。

1 材料與方法

1.1 材料 伊春市鐵力林業局2009年栽培富硒黑木耳和黑木耳實體。

1.2 儀器與試劑 熒光分光光度計，Hitachi650-105型日本東京日光股份有限公司:電子自動分析天平、恒溫電熱板，恒溫干燥箱。試劑:DAN、高氯酸、濃鹽酸、濃硝酸、環已烷、鹽酸羥胺、甲酚紅、氨水，EDTA-鈉鹽、亞硒酸鈉。

1.3 試驗方法

1.3.1 標準硒溶液的配制 準確稱取亞硒酸鈉0.2190 g經處理后0.1 mol/L鹽酸稀釋至濃度為0.1 mol/L。

1.3.2 0.1%DAN試劑的配制 此試劑在暗室內配制。置冰箱內保存，使用前再用環已烷純化一次。

1.3.3 EDTA混合液的配制 將100 ml 0.2 ml/L EDTA二鈉鹽溶液，10 ml 10%鹽酸羥胺溶液，5 ml 0.02%甲酚紅指示劑混合，加水稀釋至1000 ml。

1.3.4 樣品處理 將自然風干的樣品先用自來水洗凈，再用蒸餾水漂洗，自然風干，再放60℃真空干燥箱烘干，粉碎過40目篩，裝瓶放入干燥器內儲存待用。

1.3.5 樣品消化 準確稱取樣品0.1000 g，加混合酸液5 ml，加熱，將消化液轉移到50 ml容量瓶中，準確稀釋至50.00 ml。取稀釋液0.5 ml，加10%鹽酸1.0 ml水浴100℃煮沸10 min，使六價硒完全還原為四價硒，冷卻，加入5 ml EDTA混合液，混勻后溶液呈淺粉色。用1:1氨水(V/V)及1∶1鹽水(V/V)調至溶液呈淺黃色，于暗室內加3 ml 0.1%DAN溶液混勻，沸水浴中加熱5 min，冷卻后加入5 ml環已烷振蕩5 min，將溶液移入分液漏斗中，分層后放掉水層，將環已烷傾入帶蓋付管中。

2 測定

將上述帶蓋付管中分離出的環已烷層傾入比色杯中，于熒光分光光度計上用激發波長376 nm，發射波長520 nm，測定苯并苤硒腦的熒光強度。

2.1 富硒黑木耳和普通黑木耳中無機元素及營養成份含量測定 以伊春市鐵力食用菌生產基地提供的黑木耳及富硒黑木耳為分析對象，采用熒光分光光度計測定了九種無機元素。結果表明富硒黑木耳中對人體有害的重金屬鉛和汞的含量明顯低于普通黑木耳，其他元素含量降低幅度較小，硒對鉛、汞有拮抗作用。目前由于工業生產中鉛和汞的大量使用，使環境中鉛、汞含量較高。鉛、汞隨食物鏈進入人體后，可在人體蓄積，造成慢性鉛、汞中毒。富硒黑木耳的出現為人們提供了一種簡便易行的抗鉛、汞的心途徑。對富硒黑木耳中硒元素采用2、3-二氨基萘熒光光度分析法進行測定，結果表明富硒黑木耳中硒含量為6.52 mg/kg，普通黑木耳中含量為0.45 mg/kg，說明黑木耳具有很強的耐硒和富硒能力，比目前國際上報導的食用菌中硒含量最高的美味牛肝菌(芬蘭)的硒含量1.9 mg/kg高6.5倍。同時對普通黑木耳和富硒黑木耳中所含的蛋白質，氨基酸、脂肪、多糖粗纖維等營養成份進行了全面測定，結果表明富硒黑木耳粗蛋白、碳水化合物含量明顯提高。脂肪含量變化不明顯，富硒黑木耳中氨基酸的總量高達90.03 mg/g，其中人體必需的氨基酸達44.62 mg/g，對兒童智力有益的賴氨酸達8.31 mg/g。由此可見，富硒栽培改善了香菇子實體的品質。

通過對富硒黑木耳中硒含量的測定，表明在培養基中加入一定濃度的硒，可被菌絲體吸收利用并富集，提高子實體中的硒含量，使原來乏硒的黑木耳成為富硒的，這項研究對富硒保健食品的開發具有重要意義。

2.2 硒含量 黑木耳中硒含量為0.45 μg/g，富硒黑木耳中硒含量為 6.52 μg/g。

3 討論

眾所周知，硒是人和動物必需的微量元素，具有增加免疫力和防癌抑癌的作用，而黑木耳多糖亦具有增加免疫力，提高機體抗腫瘤的作用。據中科院地理研究所的調查報告，我國存在一條從東北至山東、青藏、云貴、新疆等22個省的低硒帶，占國土總面積的70%，幾億人生活在缺硒和低硒地域，硒分無機硒和有機硒，無機硒如亞硒酸鈉，毒性大，不易吸收，生物利用率低，有機硒毒性極小，易吸收，生物利用率高，為了將無機硒轉化為有機硒，我們將含硒化合物按設計比例重量加入黑木耳固體培養基中培育出富硒黑木耳，提取分離得硒多糖，同時我們從普通黑木耳中提取黑木耳多糖，將硒多糖，多糖分別分為高、低劑量組，結果表明硒多糖及多糖均具有抑制腫瘤生長的作用，且硒多糖組效果優于多糖組，硒多糖高劑量組效果優于環磷酰胺組，低劑量組較環磷酰胺組為弱，同時硒多糖，多糖可延長小鼠生存期，硒多糖組效果優于多糖組及環磷酰胺組［1］。

目前臨床上常用的化療藥如環磷酰胺對腫瘤的生長雖有較好的抑制作用，但毒性作用亦較大，可使患者機體免疫功臺魯下降，影響治療，硒多糖及多糖均可抑制腫瘤生長且可提高杌體免疫力，無明顯不良反應，而以硒多糖效果更佳，值得進一步研究和開發。

［1］姚占芳，等.香菇多糖提取工藝條件和測定方法的研究，河南農業大學學報，1995，29(2):180-183.