P-糖蛋白在非霍奇金淋巴瘤組織中的表達及意義

王雅琦 王美鑒 邱志敏 涂建仁 蘇永峰 董涵之

非霍奇金惡性淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)是少數幾種可以完全治愈的腫瘤之一。對于初治患者,常規全身化療僅有50%～70%的患者可獲得完全緩解[1],約60%的NHL患者治療后不能緩解或緩解后復發。有研究表明[2],多藥耐藥(multidrug resistance,MDR)基因表達對惡性血液病的耐藥及化療效果有重要意義。本文主要闡述MDR基因編碼的P-糖蛋(P-glucoprotein,P-gp)在NHL患者中的表達情況及其相關的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集我院2002～2007年經病理確診的NHL病例共117份，其中初治76例,化療后復發/難治41例；男性68例,女性49例，年齡24～76歲，中位年齡47歲；隨訪至2010年12月；臨床分期(Ann Arbor分期)Ⅰ期8例，Ⅱ期33例，Ⅲ期47例， Ⅳ期29例；惡性程度(1985年成都分類方案分類)：低度惡性25例，中度惡性54例，高度惡性38例。

1.2 實驗方法

采用免疫組化染色。參照試劑盒說明書操作，用已知陽性切片作陽性對照，PBS代替一抗作陰性對照。所用試劑盒均購自福建邁新公司。胞質和(或)胞膜呈黃色或棕黃色為P-gp 陽性細胞。結果判定:根據陽性細胞占腫瘤細胞的比例來判斷結果：>10%為陽性。

1.3 統計學方法

所用數據資料用SPSS13.0統計軟件處理，行χ2檢驗，檢驗水準α= 0.05 。采用Kaplan-Meier法做生存分析，Cox回歸進行相關分析。生存時間是從手術日期(病理確診之日)起到隨訪日期或由于復發、轉移而死亡的日期為止。生存期從治療日起到死亡或末次隨訪日(2010年12月) 。

2 結果

2.1 NHL患者中P-gp表達情況

初治患者中P-gp陽性表達23例(30.26%)，復發/難治的患者中陽性表達28例(68.29%)，2組比較，P<0.05，有統計學差異。

2.2 P-gp的表達對生存時間的影響

應用Kaplan-Meier法計算初治組與復發/難治組患者的生存時間與不同P-gp表達之間的關系。結果顯示，P-gp陰性表達者生存時間明顯長于陽性表達者(P<0.05),初治P-gp陰性表達患者生存時間最長,見圖1。

圖1 生存曲線圖

2.3 NHL患者生存時間的多因素分析

Cox回歸分析結果顯示，患者性別、年齡、有無B癥狀與預后無關(P>0.05)，而P-gp表達、臨床分期、惡性程度、血清LDH水平與患者死亡風險顯著相關(P<0.05)，見表1。

表1 回歸分析結果

3 討論

MDR 是指腫瘤細胞接觸1種抗腫瘤藥物并產生耐藥后，同時對結構和作用機理不同的多種天然來源的抗腫瘤藥物具有交叉耐藥性，包括天然性耐藥和獲得性耐藥2種表型[3]。人類基因組中存在2個MDR基因，即MDR1、MDR2基因。現已表明，只有MDR1基因與人體腫瘤細胞耐藥有關。P-gp為MDR1 基因的蛋白表達產物，相對分子質量為170 kD的跨膜糖蛋白，是1種ATP依賴性外排泵，能將藥物泵出細胞外，使細胞內藥物濃度下降及藥物再分布，減少靶點部位的藥物濃度，使藥物對細胞的毒性作用減弱或喪失而導致耐藥[4]。此外，P-gp還具有凋亡抑制作用，保護耐藥細胞免于細胞毒性藥物誘導的多種形式的半胱氨酸蛋白酶依賴性凋亡，而使細胞獲得耐藥性[5]。

本研究結果顯示，無論是初治的非霍奇金淋巴瘤患者還是復發/難治者，其組織中均存在P-gp表達(陽性率分別為30.26%、68.29%)，且陽性表達者平均生存期明顯小于陰性表達者(初治組20.5個月:49.1個月，復發/難治組16.7個月:30.3個月)，表明惡性淋巴瘤細胞有不同程度的MDR /P-gp的表達，對抗腫瘤治療藥物具有天然的或者獲得性耐藥；且復發者P-gp 表達水平明顯高于初治者，與國內外報道相一致[6,7]。

P-gp的表達與腫瘤的耐藥及預后密切相關， MDR1表達增加的腫瘤對生物堿類高度耐藥，對蒽環類中度耐藥，對VP-16低度耐藥，對烷化劑或抗代謝類藥物及順鉑等不耐藥[8,9]。Tada等認為[10]，膀胱癌患者MDR表達與阿霉素耐藥明顯相關，且化療后殘留腫瘤的MDR表達比未經治療的腫瘤高5.7倍。而晚期鼻咽癌患者MDR1陽性，則預示全身化療后總生存率較低[11]。由此可見，P-gp表達不僅可預測患者對化療藥物的敏感性，指導臨床有針對性地選擇最有效的化療藥物；其次P-gp高表達預示患者預后不良。本研究表明，P-gp水平的高表達是NHL患者死亡的危險因素之一。

近年來，隨著研究的不斷深入，人們迫切需要尋找某種逆轉劑來逆轉腫瘤的多藥耐藥,目前被證實具有逆轉P-gp介導的MDR作用的藥物和制劑很多，包括鈣離子阻滯劑如維拉帕米、尼卡地平等；免疫調節劑如環胞菌素A及其類似物(奎寧類)、利血平等[12]。但由于其不良反應大、臨床療效評估難，或是影響藥物或肝代謝等，臨床上難以推廣。目前， MDR1基因治療是研究的熱點[13,14]，尤其是基因技術逆轉腫瘤多藥耐藥因其特異性和無毒性，將具有廣闊的前景。

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