調合消毒法對石膏模型消毒效果的實驗研究

劉 嘉,鄭軼文,李 巖,張曉紅,姜 龍,左恩俊

(1.大連醫科大學 中山學院 2008級口腔醫學專業，遼寧 大連 116085； 2.大連醫科大學 中山學院，遼寧 大連 116085； 3.大連醫科大學 口腔醫學院，遼寧 大連 116044)

口腔印模由于直接接觸患者的唾液甚至血液, 表面常攜帶有大量細菌、病毒及真菌等病原微生物, 這些微生物不消除就會造成石膏模型的污染，最終會導致醫務人員、患者和技工之間的交叉感染。而常規消毒方法，如浸泡、噴涂等，會對印模及模型的精度和物理性能帶來影響[1-2]。使用消毒液調拌印模材，又會給患者口腔黏膜帶來不同程度刺激。然而應用消毒液調拌超硬石膏，可有效解決上述問題。本研究使用3種消毒液調拌超硬石膏，探討其對口腔常見細菌的殺菌效果。

1 材料和方法

1.1 實驗材料

超硬石膏(上海賀利氏古莎齒科有限公司)，2% 戊二醛、0.5%84消毒液、0.5%碘伏(山東利爾康消毒科技有限公司)，蒸餾水，營養瓊脂培養基、沙保培養基(青島海博生物技術有限公司),表皮葡萄球菌ATCC 12228、白色念珠菌ATCC 10231、綠膿桿菌ATCC 9027(上海鑫閔生命科學有限公司)。

1.2 實驗設備

DRP-9002型電熱恒溫培養箱(上海森信實驗儀器有限公司)，EX-200A型電子天平(沈陽精密天平儀器有限公司)，Z型立式壓力蒸汽滅菌器(常州銳品精密儀器有限公司)， PSE型潔凈工作臺(蘇州真田潔凈設備有限公司), SK-1快速混勻器(江蘇省金壇市友聯儀器研究所),AX-2000齒科真空調拌機(天津愛鑫醫療設備有限公司)。

1.3 實驗方法

1.3.1 材料和器械消毒：實驗所需調碗、調刀、燒杯、燒瓶、量筒等均經121 ℃壓力蒸氣滅菌處理20 min。超硬石膏粉用電子天平稱取單份后，鋪成薄層于超凈操作臺中紫外線臭氧消毒2 h。蒸餾水和各消毒液均經無菌處理。

1.3.2 制備細菌懸液：取4～14代表皮葡萄球菌培養平板,挑取菌苔,以無菌生理鹽水稀釋至濃度106個/mL。用同樣方法分別制備白色念珠菌菌懸液和綠膿桿菌菌懸液。

1.3.3 實驗分組：制備126個直徑10 mm，厚5 mm的圓柱體硅橡膠印模，經高溫高壓消毒后，按所染菌種分為表皮葡萄球菌組,白色念珠菌菌組和綠膿桿菌組。每組42個印模，其中2個印模不染菌灌注石膏模型后為陰性對照組。

1.3.4 染菌：用微量加樣器取10 μL菌懸液均勻涂于各組印模表面。分別用2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏和無菌蒸餾水與超硬石膏粉按照22 mL∶100 g的水粉比于真空攪拌機中調拌超硬石膏30 s，然后灌注石膏模型。每組各調拌液均灌注10個石膏模型試件，無菌蒸餾水調拌組為陽性對照組。1 h后脫模。

1.3.5 洗菌：將各試件分別投入含5.0 mL無菌生理鹽水的試管中。用電動混勻器混合20 s，將菌洗下形成菌懸液。

1.3.6 細菌接種和培養：取菌懸液1 mL按一定倍數稀釋后, 取10 μL接種于滅菌培養基,37°恒溫培養箱培養24 h后觀察計數菌落數,計算殺菌率。殺菌率=(陽性對照組菌落數-消毒組菌落數)/陽性對照組菌落數×100%。由于每個石膏模型表面細菌接種量及采樣量相同,故以集落形成單位(colony-forming units,CFU)計數表示回收菌數，算得各組平均殺菌率。參照歐洲消毒實驗標準，殺菌率達到99.99%視為消毒合格。

2 結 果

不同種類消毒液調拌超硬石膏對3種細菌的消毒效果見表1。2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏調拌超硬石膏對3種細菌的殺菌率為100%，消毒合格。

表1 不同種類的消毒液調拌超硬石膏的消毒效果Tab 1 Disinfection effects of gypsum mixed with different kinds of disinfectant

3 討 論

眾所周知，口腔印模在制取過程中會直接接觸到患者的唾液甚至血液，表面可能攜帶大量致病菌。Gerhardt等[3]研究表明傳統的流水沖洗最多只能去除40%～90%的細菌，如不經過特殊消毒處理即灌注石膏模型，就會造成石膏模型的污染，成為多種傳染性疾病的感染源。

本實驗選用的3種菌較有代表性。口腔中檢出的葡萄球菌多屬表皮葡萄球菌，可導致泌尿系統感染、細菌性心內膜炎等，亦可參與牙周病、口角炎等混合細菌感染[4]。白色念珠菌是歐洲殺真菌實驗標準(EN1257:1995)規定菌種，是口腔最常見真菌，特別是長期使用義齒的患者，口腔中常寄生大量白色念珠菌[5]。白色念珠菌主要引起鵝口瘡、口角糜爛等黏膜皮膚感染；支氣管炎、肺炎等內臟感染以及腦膜炎等中樞神經系統感染。綠膿桿菌為條件致病菌，當機體抵抗力降低時，易引起多種感染。綠膿桿菌抵抗力較強，對干燥、紫外線及某些化學消毒劑有一定抵抗力[6]。

不同細菌對消毒方式有不同的耐受力，故消毒學實驗選用的菌種應為有代表性的標準菌株，或者是有實際意義和對消毒方法有較高耐受性的菌株[7]。目前有些對印模、模型消毒效果的評價研究，采用的細菌標本多為混合菌液或為一些抵抗力不強的細菌，這些細菌既不是口腔常見菌，抵抗力又差。研究結果實際意義不大。本實驗模擬病理狀態下致病菌濃度相對較高的情況，對石膏模型進行單獨沾染和培養，既能較好地反映消毒劑的消毒效果，又具有較高的臨床意義。

2%戊二醛、0.5%84消毒液、0.5%碘伏是醫院中最常用的3種消毒劑，取材方便，且均具有廣譜殺菌作用，消毒效果可靠。李磊等[5]研究結果顯示使用2%戊二醛、0.1%碘伏、0.5%次氯酸浸對沾染白色念珠菌,金黃色葡萄球菌,血鏈球菌的印模浸泡消毒5～10 min可達到消毒效果。郭華等[8]認為利用0.5% 84消毒液調拌藻酸鹽印模材，可完全殺滅大腸桿菌和金葡菌并有效殺滅枯草芽胞桿菌和綠膿桿菌。Rentzia等[9]認為將不可逆水膠體印模材加入到0.5% NaOCl消毒液120 s即可殺滅全部綠膿桿菌。

目前對石膏模型的常見消毒方法有浸泡/噴霧法、熏蒸法、微波法、紫外線照射等多種方法。但卻存在影響模型的精度、強度和消毒不充分等問題，多數方法均需要特殊的設備才能完成石膏模型的消毒。周利根等[10]用2%中性強化戊二醛消毒液浸泡消毒模型后，浸泡消毒的模型精度和硬度與標準模型比較有明顯差異。Abdullah等[2]反復用水和0.525%次氯酸鈉浸泡Ⅲ型和Ⅳ型石膏模型，出現有統計學意義的線性尺寸膨脹和壓縮強度下降。消毒液直接調拌超硬石膏進行自身消毒，簡化了消毒程序，增加了消毒液與微生物接觸時間，在石膏凝固的過程中即完成了消毒過程，降低了繁瑣的消毒過程給終模型帶來的誤差，既能對模型表面又能徹底的滲入模型內部從而保證了消毒效果。實驗結果表明用2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏調拌超硬石膏,1h后脫模,對3種細菌的殺菌率為100%。且有研究表明由消毒液調拌超硬石膏粉對超硬石膏的抗壓強度,抗彎強度及精度無明顯影響[11]。因此，使用2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏調拌超硬石膏消毒法是一種簡便、省時、可靠的消毒方法。

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