未成熟網織紅細胞分數對評估30例造血干細胞移植效果的分析

董 磊，吉品健，劉 娟，馬紅雨△，馮 戟，全首禎，朱美財

(1.中國人民解放軍空軍總醫院臨床檢驗中心,北京 100142；2.大連醫科大學檢驗醫學院，遼寧大連 116044；3.中國人民解放軍空軍總醫院輸血科,北京 100142)

造血干細胞移植(hematopoietic stem cell transplant,HSCT)可以治療多種血液病、實體腫瘤、免疫缺陷病和重度急性放射病，而在移植后對造血功能恢復的監測有利于病情的觀察及制訂治療方案，是判定移植成功與否的重要依據。

傳統監測造血功能恢復的方法主要是外周血細胞的計數，如中性粒細胞絕對計數(absolute neutrophil count,ANC)、PLT等，但受外界因素的影響較大。隨著流式細胞技術和熒光技術的發展，新型的血細胞分析儀可將網織紅細胞(reticulocyte,RET)分成低熒光強度 RET(LFR)、中熒光強度RET(MFR)和高熒光強度RET(HFR)，未成熟網織紅細胞分數(immature reticulocyte fraction，IRF)為MFR和HFR之和，表示幼稚細胞占總RET的百分比[1-2]。研究表明，重度骨髓抑制后造血功能恢復開始于紅細胞系統，紅細胞植入早于粒系系統的重建，IRF是造血系統抑制后造血系統恢復的較敏感指標[3-5]。為探討IRF在HSCT中造血功能恢復的臨床意義，本研究使用Sysmex XE-2100血細胞分析儀對空軍總醫院30例白血病患者HSCT后的IRF進行動態檢測，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 空軍總醫院30例白血病HSCT患者，男21例，女9例；年齡3～48歲，中位24.5歲。其中，急性淋巴細胞白血病(ALL)10例，急性髓細胞白血病(AML)中M1、M4a、M4b、M5各1例，慢性粒細胞白血病(CML)3例，再生障礙性貧血(AA)7例，紅白血病2例，急性粒單核細胞白血病(M4)1例，急性單核細胞白血病(M5)1例，骨髓增生異常綜合征(MDS)1例，繼發性骨髓纖維化(SMF)1例。

1.2方法

1.2.1檢測方法 采用希森美康Sysmex XE-2100全自動血細胞分析儀、配套試劑及全血質控物。患者從移植前1 d至監測結束每天抽取靜脈血2 mL注入真空抗凝管(EDTA-K2)混勻，嚴格按儀器操作規程對標本進行WBC、PLT、ANC、RET%及IRF等檢測，標本檢測在1 h內完成。

1.2.2造血功能恢復的指標[6-7]從患者接受移植術開始，依據WBC>3.0×109/L、PLT>50×1012/L、ANC>0.5×109/L、RET%>0.5%、IRF>0.2分別作為造血功能恢復的指標。

1.3統計學處理 采用SPSS17.0統計軟件對數據進行分析，WBC、ANC、PLT、RET%及IRF兩兩比較用兩組獨立樣本的t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

30例患者HSCT后WBC、PLT、ANC、RET%及IRF的恢復情況見表1。患者移植后WBC、PLT、ANC、RET%及IRF處于低值，其中ANC和IRF最低為0，隨著患者造血功能的逐步恢復，IRF在移植后16.5(7～24)d達到0.2，ANC于18.5(10～27)d達到0.5×109/L，RET%在19.0(11～30)d達到0.5%，WBC在21.0(12～30)d達到3.0×109/L，PLT在26.0(13～37)d達到50×1012/L。IRF達到恢復指標天數短于WBC、PLT、ANC及RET%(P<0.05)，ANC及RET%達到造血功能恢復指標的天數要低于WBC及PLT(P<0.05)，而ANC與RET%恢復時間比較，差異無統計學意義。6.7%(2/30)的患者PLT首先升至恢復指標，而有93.3%(28/30)的患者IRF最先升至恢復指標。

表1 HSCT后WBC、PLT、ANC、RET%及IRF達到恢復指標時間(d)

3 討 論

HSCT泛指將各種來源的正常造血干細胞在患者接受超劑量放、化療后，通過靜脈輸注移植入受體內，以替代原有的病理性造血干細胞，最終實現造血重建和免疫重建。傳統的HSCT后造血系統的重建觀察指標如ANC、PLT等受影響較大，作為移植后造血功能恢復的評價指標有其局限性[8]。RET是晚幼紅細胞脫核后到成熟紅細胞之間的過渡細胞，因幼稚RET有大量RNA顯示較強的嗜色性和光散射性，顯示高熒光度值。當移植患者造血受到刺激時，大量幼稚RET從骨髓釋放入外周血，IRF值相應增高，因此IRF能夠反映骨髓紅系造血功能，是判斷貧血和相關疾病療效的重要指標[9-11]。郭振濤等[12]研究表明，IRF能準確、敏感地反映患者應用重組人促紅細胞生成素(recombinant human erythropoietin,rHuEPO)以后骨髓的造血狀況，能夠成為腎性貧血患者應用rHuEPO后早期療效監測的有效指標。

本研究結果表明30例患者HSCT后最先升高并達到恢復指標的為IRF，時間要早于WBC、PLT、ANC及RET%，且有93.3%的患者IRF最早達到造血功能恢復的指標；ANC及RET%達到造血功能恢復指標的時間要低于WBC及PLT，而ANC與RET%達到恢復指標的時間比較，差異無統計學意義(P>0.05)。研究結果說明，患者移植后造血功能得到增強，骨髓生成RET的能力顯著提高，較為幼稚的RET顯著增多，而幼稚RET水平的改變一般比移植患者的WBC、PLT、ANC、RET%及臨床癥狀的改變要提早出現。本研究結果可以看出，WBC及PLT作為造血功能恢復的監測指標并不適宜，而IRF是較為敏感的能夠反映患者機體造血功能恢復情況的指標。Testa等[13]觀察骨髓移植和外周血HSCT患者的HRF變化，發現在ANC上升前2～7 d，HRF就已增加，與本研究結果相一致。Molina等[14]認為IRF可作為可靠的異體HSCT后造血功能的預測因子。雖然ANC及RET%在反映機體造血功能恢復的時間上較IRF略有滯后，但作為目前常用的監測移植患者造血功能恢復的指標，它們仍具有重要的參考價值。有研究表明把IRF和ANC聯合起來作為觀察HSCT后造血功能恢復的指標將更有效，其符合率也將提高至90%以上[15]。

綜上所述，在HSCT后， IRF的變化均明顯早于WBC、PLT、ANC及RET%，是觀察HSCT后造血功能恢復的敏感指標，對于HSCT后造血功能恢復的監測、病情觀察及指導臨床治療有重要的應用價值。

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