P-gp和LRP在非小細胞肺癌組織中的表達及其臨床意義

史 鵬 安東善 (吉林省人民醫院，吉林 長春 130021)

許多非小細胞肺癌(NSCLC)患者在術后積極進行了化療，但仍很快出現腫瘤的復發和轉移。造成這種現象的主要原因是多藥耐藥(MDR)的產生，其形成是多因素的〔1〕，不同類型肺癌的耐藥表型亦不同。本實驗探討MDR因子的相關性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集我院病理科2010年10月至2011年10月肺癌組織石蠟包埋標本 (均為未接受過抗腫瘤治療的NSCLC患者)，通過纖維支氣管鏡活檢獲取，均經病理診斷為肺癌，共56例，其中男36例，女20例，中位年齡56歲。病例選擇標準：分型按WHO(1981年)標準，分期按照國際肺癌研討會第7版肺癌TNM分期標準，其中鱗癌31例、腺癌25例;Ⅰ期10例，Ⅱ期16例，Ⅲ期24例，Ⅳ期6例;低分化26例，中高分化30例。

1.2 方法 即用型鼠抗人 P-糖蛋白(P-gp)、肺耐藥蛋白(LRP)單克隆抗體及即用型第二代免疫組化Elivision TM plus廣譜試劑盒均購自福州邁新生物技術開發有限公司。操作嚴格按照試劑盒說明進行。以既往陽性片作為陽性對照。以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作陰性對照。二氨基聯苯胺(DAB)顯色。

1.3 結果判定 P-gp細胞質和(或)細胞膜呈棕黃色著色顆粒為陽性細胞，LRP細胞質和(或)細胞核呈棕黃色著色顆粒為陽性細胞。每張切片隨機取5個視野，每個視野計數100個細胞，陽性細胞數≤10%為陰性，＞10%為陽性。

1.4 統計學方法 應用SPLM中文統計軟件進行分析，計數資料進行χ2檢驗。

2 結果

2.1 NSCLC耐藥因子表達與肺癌病理類型的關系 耐藥因子LRP陽性表達在腺癌〔22例(88.0%)〕中明顯高于鱗癌〔16例(51.6%)〕(P＜0.05);P-gp陽性表達在腺癌〔18例(72.0%)〕中也明顯高于鱗癌〔15例(48.4%)〕。

2.2 耐藥因子表達與TNM分期的關系 各耐藥因子P-gp、LRP陽性表達與TNM分期無明顯相關(P＞0.05)。見表1。

表1 耐藥因子表達與NSCLC的TNM分期的關系〔n(%)〕

2.3 耐藥因子表達與分化程度的關系 P-gp在低分化中的表達〔14例(53.8%)〕低于高分化〔23例(76.7%)〕;LRP在低分化中的表達〔18例(69.2%)〕也低于高分化〔26例(86.7%)〕。可見各耐藥因子表達與分化程度有明顯相關性(P＜0.05)。

2.4 MDR因子共表達情況 P-gp與LRP共陽性表達〔23例(41.1%)〕僅 P-gp陽性〔29例(51.7%)〕，僅 LFP陽性〔34例(60.7%)〕，P-gp與 LRP具有相關性(P＜0.01)。

3 討論

目前研究發現，藥物轉運的改變(外排增加)導致的腫瘤細胞內藥物濃度下降是MDR發生的關鍵因素之一。已發現與藥物轉運有關的膜糖蛋白主要有MDR相關蛋白1(MRPl)、LRP和P-gP等多種膜轉運蛋白。

P-gp是mdr1基因的蛋白產物，屬于ABC(ATP-binding cassette)超家族成員，能通過ATP水解釋放能量將藥物運至細胞外，使細胞內藥物濃度降低，從而產生耐藥〔2〕。本實驗提示MRP1/P-gp介導的耐藥在肺癌的MDR中起一定的作用。而近來還有實驗證明MRP1/P-gp的陽性高表達率與藥敏檢測化療藥物抑癌率結果無明顯相關性，提示MRP1/P-gp的表達可能與肺癌的其他機制有關〔3〕。

LRP廣泛分布在人體體腔上皮、分泌器官等正常組織中〔4〕，其作用機制是阻止以細胞核為靶點的藥物通過核孔進入細胞核，并將藥物轉運到細胞質的囊泡中，以胞吐的方式排到細胞外;其過表達明顯影響藥物的胞內轉運和分布，致靶點藥物有效濃度下降而耐藥〔5〕。Rubarova等〔6〕發現肺癌組織中廣泛表達LRP基因及其蛋白，而且LRP蛋白表達陽性的肺癌細胞耐藥譜廣，LRP能介導與MDR相關的藥物耐藥。本研究提示LRP在NSCLC的固有化療耐藥機制中起著一定的作用。因此，化療前對NSCLC患者檢測LRP表達，對于預測NSCLC對上述藥物的耐藥有著積極的指導意義。

肺癌耐藥為一多途徑多基因參與的過程，聯合檢測肺癌組織中耐藥相關基因的表達有助于判斷化療療效。P-gp，LRP的表達與NSCLC的耐藥性呈明顯的相關性，并與表達程度正相關，P-gp、LRP表達及其共表達可作為檢測肺癌細胞原發性耐藥的指標。

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