3 135例泌尿生殖道感染支原體的體外培養及藥敏試驗結果分析

劉偉民（福建省廈門市中醫院檢驗科 361009）

支原體作為泌尿生殖道常見寄生微生物，其發病率在逐年的升高，其致病性與血清型和（或）生物群有關［1］。其中解脲脲原體（Uu）和人型支原體（Mh）除易導致非淋菌性尿道炎（NGU）外，還可引起附睪炎、前列腺炎、輸卵管炎、盆腔炎、男女不育等諸多并發癥。近些年來由于抗菌藥物的普遍應用及不規則用藥，支原體耐藥和交叉耐藥現象不僅增加了臨床治療的難度，還是病原菌擴散及流行期延長的重要因素［2］。為了解本地區支原體感染及藥敏情況及為臨床用藥提供可靠的方案，現將本院有關泌尿生殖道支原體感染現狀和藥敏分析報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 3 135例疑似支原體感染者全部來自2011年1月至2012年1月廈門中醫院婦科門診及男性科門診。其中男1 530例（48.80%），女1 605例（51.20%），年齡17～60歲，平均27歲。

1.2 標本采集 被檢測者取標本前至少1周內無用抗菌藥物史。女性：用無菌棉拭子插入宮頸口內1～2 cm處停留15～30 s，輕輕轉動后取出；男性：用無菌棉拭子插入尿道口內2～3 cm處停留15～30 s后取出，或由臨床醫生按摩前列腺取前列腺液或患者自取精液置無菌管中。

1.3 檢測方法 全部標本采用珠海麗珠試劑有限公司的Uu和Mh分離鑒定、計數、藥敏試劑盒。試劑包括支原體液體選擇培養基、微量藥敏測試板，其中液體培養基中含蛋白胨、酵母提取物、馬血清、生長因子等營養物質并加有尿素、精氨酸底物及酚紅指示劑，此外還加有抑菌劑和殺菌劑；測試板為24孔板條，第1、2孔分別為陰性和陽性培養對照孔，3、4孔分別為Uu和Mh低濃度水平鑒定孔，5、6孔分別為Uu和Mh高濃度水平鑒定孔，剩余的為9種抗菌藥物的高低兩個水平濃度的藥敏試驗孔。實驗所用試劑均在有效期內使用，并嚴格按照試劑盒說明書操作。藥敏試驗包括強力霉素、交沙霉素、美滿霉素、克拉霉素、羅紅霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星。標本充分混勻接種后置于37℃恒溫箱進行培養及藥物敏感試驗，于48 h時觀察結果。

1.4 結果分析 測試微孔以發生顏色由黃色變成紫紅色為反應陽性。其中若陰性對照孔出現陽性反應的顏色變化此標本認定為不合格，不列入統計范圍。此外對標本試驗出現不合乎規律的其他反應現象也同樣被認定為不合格的試驗結果，不列入統計分析范圍。例如，同種藥物出現低濃度敏感，而高濃度卻耐藥的結果，均認定為不合乎規律的反應結果，這與該方法的敏感性試驗并沒有考慮標本中支原體滴度有關，需重新進行試驗。在判斷反應陽性時，嚴格參照陽性對照孔的陽性顏色變化為參考標準，支原體生長應保持培養基透明清涼，遇培養基變紅且混濁，應在排除標本本身濁度影響后，判定為污染。對泌尿生殖道支原體感染情況以及對9種抗菌藥物的敏感性比較結果進行分析。

2 結 果

2.1 支原體培養結果 見表1。

表1 3 135例疑似泌尿生殖支原體感染者培養結果［n（%）］

2.2 725例支原體藥敏實驗結果 見表2。

表2 725例支原體藥敏實驗結果［n（%）］

3 討 論

支原體在自然界分布廣泛，人和動物體內均可分離出，是一類缺乏細胞壁，代之以3層結構的單位膜，使其呈高度多形性、可塑性、易溶解性，介于細菌和病毒之間并能通過濾菌器等的原核微生物，能在無生命培養基中生長、繁殖的最小原核細胞型微生物，內含一個環形雙股DNA。支原體主要存在于泌尿生殖道黏膜上皮表面，借助其特殊的頂端結構吸附在宿主細胞表面吸收宿主細胞養料，從細胞膜獲得脂質和膽固醇，造成細胞損傷，釋放出有毒代謝產物引起炎癥并且能夠進入宿主細胞內。Uu有尿素酶可水解尿素產生大量氨，對細胞有毒害作用。Uu和Mh通過性交傳播均可導致陰道炎、子宮內膜炎、輸卵管炎等盆腔炎癥，部分可引起習慣性流產等。感染Uu和（或）Mh早期癥狀較輕，容易被忽視，只有部分患者出現輕微不適，從而臨床上導致病程延長，反復感染，引起嚴重的生殖道損傷。在實際臨床中有相當比例感染者并發其他較易診斷的疾病，如淋病，使得更加容易造成支原體感染的漏診。部分文獻報道，淋病患者的支原體檢出率高出非淋菌性尿道炎支原體檢出率高兩倍以上。由此看來，對泌尿生殖道進行支原體體外培養和藥敏是非常有意義的［3-5］。

本研究結果顯示，2011年1月至2012年1月本院泌尿生殖道支原體感染率為23.13%，其中以Uu為主（13.78%），其次為Mh陽性率（5.17%），Uu和 Mh混合感染陽性率較低（4.18%），這與國內其他地區報道的檢測結果有一定差異。但并不能說明感染支原體的患者少了；相反，近年來感染支原體的患者癥狀輕微不典型或無癥狀而常被忽視，從而加大了臨床診斷的難度。對Mh感染率明顯高于以往的文獻數據，必須引起高度的重視。女性感染率明顯高于男性，提示支原體感染存在性別差異，其中男性268例（17.52%），而女性有457例（28.47%）。可能的原因為：（1）男女泌尿生殖器官的生理結構存在差異，因女性泌尿生殖道的內環境和酸堿度（p H）更適合支原體的生長；（2）男女之間的生理差異和泌尿生殖道血液循環的不同，相同劑量的抗菌藥物到達局部的血藥濃度不同而造成治療上的差異［6］。

從725例支原體陽性患者的藥敏結果看，耐藥率高的3種抗菌藥物分別是氧氟沙星（38.48%）、克拉霉素（40.83%）、羅紅霉素（40.41%）。而敏感率高的前3種抗菌藥物為交沙霉素（98.90%）、美滿霉素（96.83%）、強力霉素（98.21%）。Uu、Mh感染屬于性傳播疾病，女性生殖道感染存在一定的隱私，患者往往自行用藥，劑量不足、療程不夠，及盲目首選昂貴的和新的廣譜抗菌藥物以及非專業診治濫用抗菌藥物，造成耐藥株不斷增多，慢性遷延等因素造成患者反復感染，呈現多重耐藥現象，呈逐年上升的趨勢，成為臨床治療的棘手問題。

432例Uu感染者藥敏實驗結果顯示對Uu耐藥率最高的抗菌藥物為氧氟沙星（26.62%）。這可能與近年來普遍使用喹諾酮類藥物，使位于支原體染色體上旋轉酶基因發生突變，改變了支原體DNA旋轉酶靶位，從而降低了喹諾酮類藥物阻斷支原體DNA的復制能力［7］。支原體的DNA旋轉酶由A亞基和B亞基組成，A亞基結構是喹諾酮化合物和復合體結合的決定因素，其63～106位氨基酸對喹諾酮類化合物結合至關重要。Uu無細胞壁結構，故干擾細胞壁合成的抗菌藥物如青霉素類、頭孢菌素類等對其無作用，因此臨床多用干擾蛋白合成或抑制核酸形成的抗菌藥物。如交沙霉素、強力霉素等進行治療Uu，敏感率最高的是交沙霉素（99.31%），可作為Uu感染治療的首選藥物。其次為強力霉素（99.07%），美滿霉素（96.53%），克拉霉素（96.53%），羅紅霉素（92.59%），阿奇霉素（94.21%）。交沙霉素是一種16環耐性非誘導型大環內酯類抗菌藥物，其與支原體核蛋白50S亞基結合，抑制氨基酸2tRNA與肽鍵2tR2NA之間的肽鍵形成，導致蛋白質合成障礙，菌體死亡，此藥抗菌譜廣，效果顯著。

162例Mh感染者藥敏實驗結果顯示，對Mh敏感率最高的抗菌藥物為強力霉素（98.77%）、美滿霉素（98.77%）、交沙霉素（98.15%）。耐藥率居前位的3種抗菌藥物分別為克拉霉素（97.53%）、羅紅霉素（95.68%）、阿奇霉素（95.68%）；氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星的耐藥率也均在30%以上，可能是臨床十幾年的廣泛應用，使其敏感性下降，這也提示此類藥物在該地區不適用。Uu＋Mh合并感染131例標本的藥物試驗的耐藥性較高的為克拉霉素（98.47%）和羅紅霉素（99.24%）。阿奇霉素131例（100.00%）屬中介。此外氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星的耐藥率高達49%以上。因此混合感染的應首選的藥物為強力霉素、美滿霉素、交沙霉素［8］。

綜上所述，支原體感染現狀不容樂觀，應更加重視多重耐藥。同時建議在實際工作中不能單純依靠體外藥物敏感結果，應結合臨床綜合考慮，對癥下藥，有利于疾病的治療和控制耐藥株的產生。

［1］楊劍虹，曹季軍.827例泌尿生殖道支原體檢測及耐藥性分析［J］.醫學檢驗與臨床，2008，19（5）：83.

［2］顏丹，顏海嬰，鐘桂書，等.男性不育患者精液中衣原體、支原體感染的現狀研究［J］.現代預防醫學，2007，34（9）：1766－1767.

［3］張靈芝，姜玉霞.1 233例疑似泌尿生殖道支原體感染者體外檢測及藥敏分析［J］.現代醫藥衛生，2008，24（24）：3688－3690.

［4］謝小毛，黃開淑，李文華，等.繼發不育男性泌尿生殖道支原體感染狀況與耐藥性分析及其臨床應用研究［J］.中國優生與遺傳雜志，2008，16（12）：105－106.

［5］李巧燕.2 886例支原體培養與藥敏分析［J］.中華醫院感染學雜志，2008，18（11）：1553－1553.

［6］張有江，張軍民，羅燕萍，等.400例泌尿生殖道支原體、衣原體檢測及藥敏結果分析［J］.中華醫院感染學雜志，2003，13（7）：689－690.

［7］曾令曉，梁美娟，蘭美群.622例泌尿生殖道感染支原體的藥敏試驗結果分析［J］.應用預防醫學，2008，14（1）：3－5.

［8］張德立.泌尿生殖道解脲脲原體感染檢測及體外藥敏試驗分析［J］.中國醫療前沿，2008，3（22）：95.