哮喘患兒血清IL-10和ET-1的檢測及

【摘要】 目的 探討支氣管哮喘患兒不同時期血清白細胞介素（IL）-10、內皮素（ET）-1與IgE水平的變化及臨床意義。方法 采用酶聯免疫（ELISA）法測定不同時期支氣管哮喘患兒血清IL-10、ET-1和IgE水平，并與正常對照組進行統計分析。結果 哮喘急性發作組血清IL-10水平顯著低于緩解組和對照組（P<0.05），而ET-1和IgE水平卻顯著高于緩解期和對照組（P<0.05）。IL-10與IgE呈負相關（r-0.574，P<0.05），而ET-1與IgE呈正相關（r0.587，P<0.05）。結論 IL-10和ET-1參與支氣管哮喘發病的整個過程，IL-10降低和ET-1升高是哮喘發病的重要因素；在支氣管哮喘患兒不同時期檢測血清IL-10和ET-1水平具有重要的臨床意義。

【關鍵詞】 支氣管哮喘 IL-10 ET-1 IgE

Clinical significance of serum levels of IL-10 and ET-1 LI Guo-fen.Nanyang Cetral Hospital in Henan Province，Nanyang 473000，China

【Abstract】 Objective To investigate the different periods of bronchial asthma in children with serum levels of interleukin （IL）-10， endothelin （ET）-1 and the changes in IgE levels and clinical significance.Methods Using enzyme-linked immunosorbent （ELISA） was used to determine the serum of asthmatic children during IL-10， ET-1 and IgE levels， and with the control group for statistical analysis.Results Of acute asthma levels of serum IL-10 significantly lower than the remission group and control group （P <0.05）， while ET-1 and IgE levels are significantly higher than those in remission and the control group （P<0.05）.IL-10 and IgE was negatively correlated （r - 0.574， P<0.05）， while ET-1 and IgE were positively correlated （r0.587， P<0.05）.Conclusion IL-10 and ET-1 in the whole process of bronchial asthma， IL-10 reduction and increased ET-1 is an important factor in the pathogenesis of asthma in different periods of bronchial asthma IL-10， and serum ET-1 levelshave important clinical significance.

【Key words】 Bronchial asthma IL-10 ET-1 IgE

支氣管哮喘是一種常見的、多發的呼吸系統疾病，是以嗜酸性粒細胞、肥大細胞、T淋巴細胞浸潤為特征，有多種細胞因子及炎性介質參與的氣道變態反應性炎癥^［1］。隨著分子生物學的不斷發展，許多與氣道炎癥有關的細胞因子受到越來越多的重視，白細胞介素（IL）-10和內皮素（ET）-1均參與了調節氣道的炎癥反應。筆者檢測了支氣管哮喘患兒不同時期血清IL-10、ET-1及IgE水平，探討它們之間的關系及臨床意義。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 患兒系筆者所在醫院門診及住院患者，診斷標準均符合中華醫學會呼吸學會制定的“支氣管哮喘防治指南”標準^［2］，排除心、肝、腎等疾病。哮喘急性發作組26例，其中男16例，女10例，年齡5個月～13歲，平均（6.7±3.2）歲。哮喘緩解組24例，其中男15例，女9例，年齡6個月～13歲，平均（6.3±2.7）歲。兩組患者抽血前一個半月內無腎上腺皮質激素治療史，急性發作組無發熱。正常對照組20例，為同期健康體檢兒童，男11例，女9例；年齡6個月～13歲，平均（6.0±2.9）歲，均無心肺疾病及過敏性疾病史。

1.2 方法 各組均于早晨抽取空腹血樣（4 ml/人），離心取血清于-20 ℃冰箱凍存待檢。IL-10及ET-1試劑盒為法國Coulter公司產品，IgE試劑盒為中國醫學科學基礎所提供，均采用酶聯免疫法（ELISA）測定，操作步驟：（1）預實驗確定標本稀釋倍數，系列稀釋ET-1標準品及IL-10標準品。（2）將待測血清或不同濃度ET-1或IL-10標準品溶液中至反應孔中，孵育、洗滌。（2）每孔加生物素化ET-1或IL-10檢測抗體、室溫孵育、洗板；（4）每孔加HRP標記的鏈霉親和素結合液避光孵育；（5）加底物液避光孵育；（6）加終止液混勻后置ELX800全自動酶標分析儀上測各孔450nmOD值。根據不同濃度標準品OD值作標準曲線，最后分別求出待測血清ET-1和IL-10濃度。

1.3 統計學處理 采用SPSS 10.0統計軟件包進行統計分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用方差分析和q檢驗，采用Spearman相關性分析。

2 結果

2.1 IL-10、ET-1、IgE檢測結果 支氣管哮喘患者急性發作組血清IL-10水平顯著低于緩解組和對照組，差異具有統計學意義（P<0.05），ET-1和IgE水平顯著高于緩解組和對照組，差異有統計學意義（P<0.05），緩解組IgE水平顯著高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 IL-10、ET-1與IgE之間的關系 哮喘發作期IL-10、ET-1與IgE含量之間進行Spearman相關性分析，結果顯示IL-10與IgE之間呈負相關（r-0.574，P<0.05），而ET-1與IgE之間呈正相關（r0.587，P<0.05）。

3 討論

研究表明，炎性細胞釋放眾多細胞因子相互聯系，相互制約，構成了復雜的細胞因子網絡，參與了支氣管哮喘的發病，它們相互影響、相互誘導、相互制約或協同，并和炎性細胞相互作用，調節氣道炎癥的發生、發展^［3］。內皮素（ET）是哮喘發病過程中的重要因子。

IL-10對細胞因子具有調節作用，IL-10主要通過抑制抗原遞呈細胞（APC），誘導T細胞不應答和對呼吸道內炎性細胞直接抑制而在支氣管哮喘呼吸道炎癥發展中起著負調節作用。研究發現IL-10可以抑制IgE的產生，促進IgG₄的合成，從而說明IL-10在過敏性哮喘的病理生理過程中發揮著重要作用。用抗原激發哮喘患者呼吸道炎癥，結果也發現哮喘患者IL-10表達顯著減少且表達量與痰中嗜酸性粒細胞計數呈負相關。這可能是哮喘患者存在IL-10在轉錄水平的合成障礙，從而導致哮喘患者血液和BALF中IL-10的水平降低。通過檢測BALF或血液中的IL-10水平，能夠有利于估計哮喘患者的病情及預后。本研究發現哮喘急性發作期血清IL-10水平明顯低于健康對照組，而哮喘緩解期與對照組比較雖無統計學差異，但其數值仍偏低，進一步證實支氣管哮喘的發病與血清IL-10密切相關。血清IgE水平在哮喘急性發作期和緩解期均明顯高于對照組。哮喘患兒血清IL-10與IgE呈負相關，也進一步證實IL-10對IgE的抑制作用，可以推斷IL-10的缺乏可能是導致哮喘發作的重要因素之一。

ET是是迄今為止發現最強的支氣管平滑肌收縮劑，ET與效應細胞上的ET受體結合，激活磷脂酶A₂產生花生四烯酸，繼而產生前列腺素發揮平滑肌收縮作用^［4］。另一途徑與受體結合后激活磷脂酶C產生三磷酸肌醇酯，使胞內鈣離子增加，影響蛋白激酶，Na⁺-K⁺-ATP酶促進離子交換，激活離子通道而起作用^［5］。應用離體培養的氣道上皮細胞及支氣管成纖維細胞和轉基因等技術進行的研究結果顯示，氣道上皮細胞損傷后內ET-1的過表達，可能在哮喘氣道EOS的聚集，活化及炎癥過程中發揮重要作用，損傷的上皮細胞與上皮下成纖維細胞新的信號交流，可以誘導成纖維細胞釋放ET-1增多，從而誘導和促進氣道結構細胞和氣道壁的重塑。本研究顯示哮喘急性發作期血清ET-1水平明顯高于對照組，與IgE水平呈正相關。血清ET-1的水平是反應支氣管哮喘發病狀態的重要指標，急性發作期血清ET-1水平明顯升高，說明其與支氣管哮喘急性發病密切相關。

參 考 文 獻

［1］ Kankaanranta H，Lindsay MA，Giernbycz MA，et al.Delayed eosinophil apoptosis in asthma.J Allergy CIin lmmunol，2000，106（1 Pt 1）:77-83.

［2］ 中華醫學會呼吸病學會哮喘學組.支氣管哮喘防治指南（支氣管哮喘的定義、診斷、治療及教育和管理方案）.中華結核和呼吸雜志，2003，26（3）:132.

［3］ Spiropoulos K， Frakada G， Nikolaou E， et al. Endothelin-l levelsin the pathophysiology of chronic obstructive pulmonary disease and bronchial asthma. Respir Med，2003，97（8）:983-989.

［4］ Nikolaou E， Frakada G，Prodronmkis E.et al.Evaluation of artc-rial endothelin-1 levels，before and during a sleep study in patients with bronchial asthma and chronic obstructive pulmonary disease. Respiration，2003，70（6）:606-610.

［5］ Dsoanjla A.Zuraw B.Endothelin-l（ET-1）decreases human bronchial epithelial cell migration and proliferalion:inaplications for airway remodeling in asthma.Asthma， 2003，40（8）:883-886.

（收稿日期：2011-04-08）

（本文編輯：梅宏偉）