3種梅毒血清學檢測方法在臨床中的應用價值

摘 要 目的：比較3種梅毒血清學檢測方法在臨床中的應用價值。方法：梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）、梅毒酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測血清標本中的梅毒螺旋體特異性抗體，應用甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）檢測血清標本中的非特異性抗體。結果：TPPA、ELISA、TRUST敏感性分別為97.96%、98.98%、81.63%；特異性分別為96.67%、91.11%、80%。結論：TPPA適合做確證試驗，ELISA可作為輸血和手術前檢測的一種理想篩查方法，TRUST適合用于判定病情及療效觀察。

關鍵詞 梅毒螺旋體 TPPA ELISA TRUST

梅毒（TP）是由蒼白螺旋體引起的性傳播疾病，其傳染性強，危害性大，感染后可引起全身各組織器官的損害。梅毒主要是通過性接觸傳播，也可經輸血感染或胎兒垂直傳播，近年來我國梅毒感染率呈大幅上升趨勢【sup】［1］【/sup】，嚴重危害患者的健康和生命安全。2008年衛生部公布27種法定報告的甲、乙類傳染病中，梅毒發病由原來的第7位上升至第5位。目前，血清學檢測是實驗室診斷梅毒的重要依據之一，所以選擇好的檢測方法有利于梅毒早期的診斷和及時治療。我科將TPPA、ELISA、TRUST 3種檢測方法結果進行了比較，現報告如下。

資料與方法

一般資料：本組資料選擇2009年5月～2011年3月我院門診及住院確診的梅毒患者98例，男46例，女52例；梅毒潛伏期或既往感染者36例，現癥者62例。另選擇90例非梅毒患者，均為我院住院病人，其中自身免疫性疾病患者40例，妊娠孕婦25例，健康對照25例。

試劑與主要儀器：TRUST試劑由上海榮盛生物技術公司提供，TPPA試劑由日本富士株式會社提供，ELISA試劑由廈門新創科技公司提供，上述試劑均在有效期內使用。主要儀器為酶標儀、洗板機、離心機、微量振蕩器、加樣器和恒溫水浴箱等。

方法：3種試驗嚴格按試劑盒說明書操作步驟進行檢測，并在試劑盒有效期內使用。

統計學方法：數據采用SPSS13.0軟件包進行統計分析，計數資料采用X【sup】2【/sup】檢驗，3種試驗多因素檢測比較采用t檢驗。

結 果

3種方法檢測98例梅毒患者血清抗體結果：TPPA有96例陽性，敏感性為97.96%；ELISA有97例陽性，敏感性為98.98%；TRUST有80例陽性，敏感性為81.63%。而TPPA的假陰性為2.04%，ELISA假陰性為1.02%，TRUST假陰性為18.37%。

3種方法檢測90例非梅毒患者血清結果：在90例非梅毒患者中，TPPA陽性有3例，陰性有87例，其特異性為96.67%；ELISA陽性有8例，陰性有82例，特異性為91.11%；TRUST陽性有18例，陰性有72例，特異性為80%。見表1。

討 論

感染梅毒螺旋后機體產生的抗體：人體感染梅毒螺旋后機體產生兩類抗體，一類為抗密螺旋體的特異性抗體，感染2～4周后即可檢出；另一類為非特異性類脂質反應素抗體，即抗心磷脂抗體，又稱反應素多為IgA和IgM混合型抗體。檢出的時間要比特異性抗體的時間約遲2周（感染后約6周）【sup】［2］【/sup】。梅毒特異性抗體出現早、消失遲，即便經過治療，仍可檢出其特異性抗體，甚至可終身檢出，這是診斷梅毒螺旋體感染的依據。非特異性抗類脂質抗體出現較晚，經過治療可逐漸減少至轉為陰性，可用于療效觀察。

TPPA檢測：TPPA是將純化的致病性梅毒的精致菌株成分包被在人工載體明膠粒子上，檢測血清中相應的抗體，其特異性好、靈敏度高、抗干擾性強。本結果顯示，TPPA敏感性為97.96%，特異性96.67%，與文獻報道一致【sup】［3］【/sup】。TPPA法已是目前公認的梅毒血清確證試驗，但試劑較貴，試劑溶解后需在幾天內用完，否則造成浪費。TPPA測定需多步稀釋，操作較繁瑣、檢測時間較長，且以肉眼判斷結果，常有主觀色彩，原始數據無法保存，不適于大批量的篩選試驗，因此TPPA適用于對ELISA或TRUST檢測后的陽性標本進行確證試驗。

ELISA檢測：ELISA法采用雙抗原夾心法檢測TP特異性抗體，利用酶放大效應，提高檢測的靈敏度，對梅毒各期的檢出率都較高，而且ELISA試劑成本較低，操作方便，可使用全自動酶標儀，原始數據易于保存。本組實驗表明，ELISA有很高的敏感性和特異性，分別為98.98%和91.11%，與TPPA相接近。ELISA的假陰性率很低，本組假陰性率僅為1.02%，與文獻報道基本一致【sup】［4］【/sup】。但抗干擾性仍不如TPPA，結果會出現一定假陽性，由于其檢測是梅毒的IgM和IgG混合抗體，梅毒IgG抗體在治愈后相當長的時間內仍存在較高的陽性率，甚至終身攜帶，因此ELISA陽性者只能說明正在感染或曾經感染過，不能判定梅毒活動與否及作為療效觀察，故ELISA適合于手術前檢查和輸血等大批量樣本的篩查試驗。

TRUST檢測：TRUST是以類脂質為抗原，檢測血清中的抗類脂質抗體，為梅毒非特異性抗體。TRUST在一期梅毒早期和晚期梅毒、晚期潛伏梅毒及治療后梅毒可呈陰性。本組結果顯示，TRUST敏感性為81.63%，特異性為80%，遠低于ELISA和TPPA。而且該法易受其他因素干擾，在自身免疫性疾病、妊娠及健康人群中均有假陽性，其本組發生就有18例。因此可認為TRUST不適合梅毒的診斷，但該方法操作簡便、試劑價格便宜、反應快，不需要特殊儀器設備，方便測定梅毒抗體滴度，其滴度變化與梅毒治療情況呈正相關。隨著梅毒治愈、非特異性抗體消失，該TRUST法轉陰，適用于療效觀察隨訪和復發的輔助診斷。

綜上所述，TRUST與ELISA、TPPA是不同的3種檢測方法，其TRUST特異性和敏感性與ELISA和TPPA無可比性，但TRUST可判斷梅毒患者的治療情況。而ELISA和TPPA不適合對梅毒治療情況的判斷，因此，3種梅毒檢測方法較合理的檢測順序：先用ELISA法篩查，如果出現陽性，則做TPPA確證，如為陽性結果，則再做TRUST試驗，若結果為陽性則稀釋做定量試驗，用以判斷病情及觀察療效。

參考文獻

1 張卓然.臨床微生物學和微生物檢驗［M］.第3版.北京:人民衛生出版社，2003，287.

2 戴玉琳，馮星.對梅毒血清學研究的建議［J］.中國皮膚性病學雜志，2004，18（8）:505.

3 程艷杰，王廣杰，王旭，等.梅毒螺旋體血清學檢測方法的實驗室評價［J］.中華檢驗醫學雜志，2006，29（3）:272.

4 劉保林.ELISA與RPR法檢測梅毒抗體結果分析［J］.中國誤診學雜志，2005，5（13）:2493.

表1 3種梅毒血清學試驗的檢測結果（例）