感染白斑綜合征病毒的斑節(jié)對(duì)蝦免疫酶變化特征

摘要：研究了斑節(jié)對(duì)蝦（Ｐｅｎａｅｕｓ ｍｏｎｏｄｏｎ）感染白斑綜合征病毒（Ｗｈｉｔｅ sｐｏｔ sｙｎｄｒｏｍｅ vｉｒｕｓ，ＷＳＳＶ）后的發(fā)病情況和４種免疫酶活性的變化特征。通過對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦進(jìn)行ＷＳＳＶ急性攻毒試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在感染５０ ｈ左右出現(xiàn)死亡高峰，感染６０ ｈ后大部分死亡蝦出現(xiàn)明顯的白斑。血液酚氧化物酶（ＰＯ）、過氧化物酶（ＰＯＤ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性在感染ＷＳＳＶ后都呈現(xiàn)先降低再升高再降低的趨勢(shì)，并在感染后６０ ｈ左右，活性達(dá)到最大值。肝臟、肌肉組織中的ＡＣＰ、ＳＯＤ活性變化規(guī)律與其在血液中的變化類似，肝臟中的ＡＣＰ、ＳＯＤ活性明顯高于肌肉組織中的活性。

關(guān)鍵詞：斑節(jié)對(duì)蝦；白斑綜合征病毒（ＷＳＳＶ）；免疫酶

中圖分類號(hào)：Ｓ９４５．４＋７ 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ 文章編號(hào)：0439－８114（２０11）09－1851-04

Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏ－ｅｎｚｙｍｅｓ ｏｆ Ｐｅｎａｅｕｓ ｍｏｎｏｄｏｎ Ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｗｈｉｔｅ Ｓｐｏｔ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ Ｖｉｒｕｓ

ＷANG Ｚｈｕａｎ－ｗｅｉ１，２，ＨUANG Ｊｉａｎ－ｈｕａ１，ＹANG Ｑｉ－ｂｉｎ１，ＺHOU Ｆａ－ｌｉｎ１，ＺHU Ｃａｉ－ｙａｎ１，ＹANG Ｌｉ－ｓｈｉ１，ＪIANG Ｓｈｉ－ｇｕｉ１

（１． Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ Ｓｅａ Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｆｉｓｈｅｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０３００， Ｃｈｉｎａ；

２． Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｏｃｅａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１３０６， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｏｆ ＷＳＳＶ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ Ｐｅｎａｅｕｓ ｍｏｎｏｄｏｎ， ａｎｄ ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ ａｖｔｉｖｉｔｙ ｆｏｒ ｆｏｕｒ ｉｍｍｕｎo-enzymes were investigated． Ｉｔ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｓｈｒｉｍｐ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ａｐｐｅａｒｅｄ ａｒｏｕｎｄ ５０ ｈｏｕｒｓ， ａｎｄ ｔｈｅ ｗｈｉｔｅ ｓｐｏｔｓ ｏｃｃｕｒｒｅｄ ｏｎ ｍｏｓｔ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｅｄ ｓｈｒｉｍｐｓ around 60 hours after WSSV infected． Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅ（ＰＯ），ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＰＯＤ）， ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ （ＳＯＤ） ａｎｄ ａｃｉｄ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ（ＡＣＰ） ｉｎ ｂｌｏｏｄ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ａｔ ｆｉｒｓｔ ａｆｔｅｒ ＷＳＳＶ ｉｎｆｅｃｔｅｄ， ｔｈｅｎ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｅｎｚｙｍｅ ａｖｔｉｖｉｔｙ ａｒｏｕｎｄ ６０ ｈｏｕｒｓ ａｎｄ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ａｔ ｌａｓｔ． Ｔｈｅ ｔｒｅｎｄｓ ｏｆ ＳＯＤ ａｎｄ ＡＣＰ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｍｕｓｃｌｅ ｗｅｒｅ ｓｉｍｉｌａｒ ｔｏ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｂｌｏｏｄ， ｈｏｗｅｖｅｒ， ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＳＯＤ ａｎｄ ＡＣＰ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｍｕｓｃｌｅ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｐｅｎａｅｕｓ ｍｏｎｏｄｏｎ； ＷＳＳＶ； ｉｍｍｕｎｏ－ｅｎｚｙｍｅｓ

甲殼類動(dòng)物缺乏由抗體介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，不能通過抗原抗體反應(yīng)來達(dá)到自我保護(hù)的目的。其免疫機(jī)制為非特異性免疫，通過血細(xì)胞及體液因子的活性來抵抗病原微生物的入侵。血液酚氧化物酶（ＰＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、過氧化物酶（ＰＯＤ）以及酸性磷酸酶（ＡＣＰ）等免疫酶的活性高低經(jīng)常被用作評(píng)價(jià)免疫強(qiáng)弱的指標(biāo)。對(duì)蝦的非特異性免疫系統(tǒng)也受很多因素的影響，比如蛻殼、水溫突變、溶氧高低、外界刺激和病毒入侵等。關(guān)于蝦類的免疫應(yīng)答機(jī)制，已經(jīng)有很多研究報(bào)道，劉慶慧等［１］對(duì)中國對(duì)蝦感染白斑綜合征病毒（Ｗｈｉｔｅ sｐｏｔ sｙｎｄｒｏｍｅ vｉｒｕｓ，ＷＳＳＶ）后血細(xì)胞數(shù)量變化做了研究報(bào)道；Ｓｏｎｇａ等［２］分析了感染桃拉病毒后凡納斌對(duì)蝦血淋巴和肌肉組成的生化變化；Ｙｏｇａnandhan等［３］報(bào)道印度明對(duì)蝦在感染ＷＳＳＶ后，血淋巴細(xì)胞密度和血清蛋白濃度等免疫參數(shù)與正常蝦有很大差異；宋林生等［４］報(bào)道過南美白對(duì)蝦感染ＷＳＳＶ后ＳＯＤ活性和過氧化氫酶（ＣＡＴ）活性的變化。還有很多其他學(xué)者關(guān)于對(duì)蝦免疫反應(yīng)機(jī)理的報(bào)道，但這些文獻(xiàn)資料所闡述的反應(yīng)規(guī)律不盡相同，有不同的試驗(yàn)結(jié)果和理論解釋。由于ＷＳＳＶ病毒病已經(jīng)成為制約對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要因素，而對(duì)蝦的抗病能力主要通過非特異性免疫系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)，因此對(duì)參與非特異性免疫的各種免疫酶活性的研究是對(duì)蝦抗病研究的熱點(diǎn)之一。本研究通過斑節(jié)對(duì)蝦（Penaeus monodon）ＷＳＳＶ急性感染試驗(yàn)，探討了斑節(jié)對(duì)蝦在感染ＷＳＳＶ后的發(fā)病情況和４種免疫酶在體內(nèi)不同組織的活性變化。

１材料和方法

１．１試驗(yàn)材料

１．１．１試驗(yàn)用蝦 試驗(yàn)用斑節(jié)對(duì)蝦由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所三亞熱帶水產(chǎn)研究中心提供。挑選大小均勻（７．０±０．２）ｃｍ、活力旺盛的個(gè)體進(jìn)行ＷＳＳＶ急性攻毒試驗(yàn)。

１．１．２ＷＳＳＶ病原用白斑癥狀明顯的斑節(jié)對(duì)蝦作為感染材料（ＰＣＲ檢測ＷＳＳＶ陽性，超低溫保存）。取其肌肉組織０．１ ｇ，加入１ ｍＬ磷酸鹽緩沖液（ＮａＣｌ ８ ｇ，ＫＣｌ ０．２ ｇ，KＨＰＯ４ １．４４ ｇ，ＫＨ２ＰＯ４ ０．２４ ｇ，用ＨＣｌ調(diào)節(jié)ｐＨ值至７．４，定容至１ 000 mＬ，滅菌常溫保存）冰浴勻漿，１０ ０００ ｒ／ｍｉｎ離心２０ ｍｉｎ后取上清液，上清液經(jīng)０．４５ μｍ濾膜過濾后稀釋１ ０００倍作為試驗(yàn)用病毒液。

１．１．３試劑左旋多巴（Ｌ－ｄｏｐａ）（Sｉｇｍａ公司生產(chǎn)）；ＰＣＲ ｂｕｆｆｅｒ、ｄＮＴＰ、Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶等購自大連寶生物工程公司；ＡＣＰ檢測試劑盒、ＳＯＤ檢測試劑盒、考馬斯亮藍(lán)蛋白測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所；鄰苯二胺等試劑均為國產(chǎn)分析純。

１．２試驗(yàn)方法

１．２．１ＷＳＳＶ急性攻毒試驗(yàn)試驗(yàn)前隨機(jī)取蝦１０尾，進(jìn)行ＷＳＳＶ病原抽樣檢測，檢測方法采用巢式ＰＣＲ法［５］。攻毒試驗(yàn)設(shè)感染組和對(duì)照組，感染組４個(gè)平行，對(duì)照組４個(gè)平行，每個(gè)平行３０尾，用于統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)蝦的死亡時(shí)間。另設(shè)與前述相同的兩個(gè)試驗(yàn)組，用于采集血液、肝組織和肌肉組織； 感染組每尾蝦用１ ｍＬ一次性注射器注射病毒液０．０５ ｍＬ；對(duì)照組每尾蝦注射ＰＢＳ ０．０５ ｍＬ。試驗(yàn)在１６個(gè)５００ Ｌ的玻璃鋼桶中進(jìn)行。記錄每尾蝦的死亡時(shí)間，并在試驗(yàn)開始后０、１２、２４、３６、４８、６０、７２ ｈ采集發(fā)病對(duì)蝦的血液、肝組織和肌肉組織。肝組織和肌肉組織采集后及時(shí)冷凍保存；血液采集后４℃保存過夜，第二天離心取血清。試驗(yàn)期間，水溫２９～３１℃，鹽度３.０%～３.２%，ｐＨ值７．８～８．２，溶氧６．６～７．０ ｍｇ／Ｌ。

１．２．２免疫酶活性檢測肝組織和肌肉組織加０．９％的生理鹽水研磨成１０％的組織勻漿，離心后取上清液。血清和上清液用于免疫酶活性的檢測。

１）ＰＯ活性的檢測。以Ｌ－ｄｏｐａ為底物，采用改進(jìn)的Ａｓｈｉｄａ［６］的方法按以下步驟進(jìn)行測定：①配制５０ ｍＬ ０．0１ ｍｏｌ／Ｌ的Ｌ－ｄｏｐａ（Ｌ－ｄｏｐａ ０．０９８６ ｇ，去離子水５０ ｍＬ）和０．１ ｍｏｌ／Ｌ ｐＨ值為６．０的磷酸鹽緩沖液（Ｋ２ＨＰＯ４ １ ｍｏｌ／Ｌ １３．２ ｍＬ，ＫＨ２ＰＯ４ １ ｍｏｌ／Ｌ ８６．８ ｍＬ，稀釋至１ 000 mＬ）；②在９６孔酶標(biāo)板中，每孔加２００ μＬ的０．１ ｍｏｌ／Ｌ pＨ 值為６．０的磷酸鹽緩沖液；③每孔再加入１０ μＬ血清和１０ μＬ ０．０１ ｍｏｌ／Ｌ的Ｌ－ｄｏｐａ，室溫下混勻；④置于酶標(biāo)儀中，室溫２８℃左右，固定吸收波長４９０ ｎｍ，每隔２ ｍｉｎ測量１次，連續(xù)測量１０次，測其血清酶動(dòng)力學(xué)ＯＤ490值；⑤以ＯＤ４９０對(duì)反應(yīng)時(shí)間作圖，以試驗(yàn)條件下每分鐘ＯＤ490值增加０．００１定義為一個(gè)酶活力單位。

２）ＰＯＤ相對(duì)活性的檢測，采用改進(jìn)的雷質(zhì)文等［７］的方法：①在９６孔酶標(biāo)板中加入血淋巴上清液，２０ μＬ／孔；②加入１８０ μＬ顯色緩沖液（一水檸檬酸７．３ ｇ，Ｎａ２ＨＰＯ４·２Ｈ２Ｏ １１．８６ ｇ，去離子水定容至

１ ０００ ｍＬ）；③置于酶標(biāo)儀中，讀取４９０ ｎｍ處的ＯＤ值（Ａ１）；④向所有樣品孔中加入２０ μＬ顯色液（鄰苯二胺４ ｍｇ，３０％ Ｈ２Ｏ２ ４ μＬ；顯色緩沖液１０ ｍＬ）；⑤置酶標(biāo)儀中搖勻后，避光顯色１５ ｍｉｎ，讀取４９０ ｎｍ處的ＯＤ值（Ａ２）；⑥血淋巴上清液中ＰＯＤ相對(duì)活性以ＡＰＯＤ＝（Ａ２－Ａ１）×稀釋倍數(shù)表示。

ＳＯＤ、ＡＣＰ活性及蛋白質(zhì)濃度的檢測，按南京建成試劑盒內(nèi)說明進(jìn)行。

１．３數(shù)據(jù)處理

統(tǒng)計(jì)不同時(shí)間段蝦的死亡個(gè)數(shù)，計(jì)算免疫酶活性高低，用ＳＰＳＳ １６．０對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)４種免疫酶的活性高低進(jìn)行單因素方差分析，并做Ｄｕｎｃａｎ’ｓ多重比較，結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來表示。

２結(jié)果

２．１斑節(jié)對(duì)蝦ＷＳＳＶ急性感染后的發(fā)病情況

斑節(jié)對(duì)蝦在抽樣檢測中均為ＷＳＳＶ陰性。如圖1所示，綜合感染組４個(gè)平行斑節(jié)對(duì)蝦的發(fā)病情況發(fā)現(xiàn)，注射感染２４ ｈ前后，部分蝦活力減弱，彈跳無力，對(duì)外界刺激反應(yīng)遲鈍；感染３２ ｈ左右開始有蝦死亡；感染５０ ｈ后，部分蝦的蝦殼輕度紅色，頭胸甲膨大易剝落，肝肥大，血液變稀，凝血力下降，出現(xiàn)死亡高峰；感染５４ ｈ左右，出現(xiàn)第一尾帶有明顯白斑的死蝦。在感染６０ ｈ左右，大部分死亡對(duì)蝦出現(xiàn)明顯白斑。對(duì)照組試驗(yàn)期間沒有死亡對(duì)蝦。

２．２免疫酶活性分析

２．２．１血液ＰＯ活性的變化特征斑節(jié)對(duì)蝦感染ＷＳＳＶ后，０～２４ ｈ血液ＰＯ活性下降；２４ ｈ后，活性開始恢復(fù)，到感染６０ ｈ活性達(dá)到峰值，并且略高于初始活性；６０～７２ ｈ，血液ＰＯ活性又開始下降；感染０、６０ ｈ血液ＰＯ活性與感染２４、３６、４８、７２ ｈ血液ＰＯ活性存在顯著差異（Ｐ＜０．０５）（圖２）。對(duì)照組７個(gè)時(shí)間點(diǎn)血液ＰＯ活性大小范圍（６．０８±０．１８）U，不同時(shí)間點(diǎn)活性基本相同，沒有顯著差異。

２．２．２血液ＰＯＤ相對(duì)活性的變化特征感染ＷＳＳＶ后，０～３６ ｈ血液ＰＯＤ相對(duì)活性下降；３６ ｈ后，相對(duì)活性開始恢復(fù)，到６０ ｈ相對(duì)活性達(dá)到峰值（圖３）。各時(shí)間點(diǎn)血液ＰＯＤ相對(duì)活性沒有顯著差異。對(duì)照組７個(gè)時(shí)間點(diǎn)血液ＰＯＤ相對(duì)活性大小范圍（２．２２±０．１８），比較穩(wěn)定，活性基本相同。

２．２．３不同組織ＡＣＰ活性的變化特征由表１可知，血液、肌肉組織、肝臟組織ＡＣＰ活性隨感染時(shí)間的延長均有先降低再升高再降低這樣一個(gè)過程，與血液ＰＯ和ＰＯＤ活性隨感染時(shí)間的變化（圖２和圖３）類似。血液ＡＣＰ活性在感染６０ ｈ達(dá)到峰值，與其他時(shí)間點(diǎn)ＡＣＰ活性存在顯著（Ｐ＜０．０５）或極顯著差異（Ｐ＜０．０１）；肝臟與肌肉ＡＣＰ活性在感染３６ ｈ達(dá)到峰值，肌肉組織ＡＣＰ活性隨感染時(shí)間延長沒有顯著差異；肝臟組織３６ ｈ ＡＣＰ活性與１２、２４ ｈ存在出現(xiàn)極顯著差異（Ｐ＜０．０１）；另外肝組織ＡＣＰ活性明顯高于肌肉組織。對(duì)照組血液、肌肉及肝臟７個(gè)時(shí)間點(diǎn)ＡＣＰ活性沒有顯著差異，分別與其０ ｈ活性值相近。

２．２．４不同組織ＳＯＤ活性的變化特征由表2可知，三種組織ＳＯＤ活性隨感染時(shí)間的變化與血液ＰＯ和ＰＯＤ的變化（圖２和圖３）類似。血液與肝臟ＳＯＤ活性在感染６０ ｈ達(dá)到峰值；肌肉ＳＯＤ活性在感染３６～４８ ｈ達(dá)到最大值；６０ ｈ血液ＳＯＤ活性與２４ ｈ存在顯著差異（Ｐ＜０．０５）；３６ ｈ和４８ ｈ肌肉ＳＯＤ活性與１２、６０、７２ ｈ存在顯著（Ｐ＜０．０５）或極顯著差異（Ｐ＜０．０１）；肝臟組織ＳＯＤ活性明顯高于肌肉組織；對(duì)照組血液、肌肉及肝臟７個(gè)時(shí)間點(diǎn)ＳＯＤ活性沒有顯著差異，分別與其０ ｈ的活性值相近。

３討論

Ｔａｎｇ等［８］用病毒定量檢測的方式研究了病毒在斑節(jié)對(duì)蝦體內(nèi)的擴(kuò)增過程，結(jié)果顯示０～２４ ｈ為緩慢擴(kuò)增期，２４～４８ ｈ為指數(shù)增長期，４８ ｈ后為平臺(tái)期。本試驗(yàn)所得死亡曲線（圖１）與病毒擴(kuò)增過程吻合，３２ ｈ左右斑節(jié)對(duì)蝦出現(xiàn)死亡，說明已經(jīng)到了病毒大量擴(kuò)增的階段，體質(zhì)較弱的開始死亡；４８ ｈ后病毒擴(kuò)增到了平臺(tái)期，病毒粒子大量存在，此時(shí)為本試驗(yàn)感染５０ ｈ左右斑節(jié)對(duì)蝦的死亡高峰。感染５０ ｈ內(nèi)死亡的對(duì)蝦，在甲殼上沒有明顯的白斑；而感染６０ ｈ后死亡對(duì)蝦，甲殼上大部分有明顯白斑，這一結(jié)果與謝數(shù)濤等［９］的研究結(jié)果基本吻合。通過與已報(bào)道的研究結(jié)果進(jìn)行比較，本試驗(yàn)所使用的病毒材料在感染斑節(jié)對(duì)蝦時(shí)的毒力與１０年前沒有明顯變化，具有廣譜性特征，因此用這些病毒感染斑節(jié)對(duì)蝦后所測定的免疫酶活性的結(jié)果，具有一定的代表性。

ＰＯ是一種氧化還原酶，酚氧化物酶原激活系統(tǒng)是一個(gè)復(fù)雜的酶級(jí)聯(lián)系統(tǒng)，該系統(tǒng)中的因子以非活化狀態(tài)酚氧化酶原的形態(tài)存在于血細(xì)胞顆粒中，類似于高等動(dòng)物的補(bǔ)體激活系統(tǒng)。王雷等［１０］、江曉路等［１１］報(bào)道了中國對(duì)蝦ＰＯ活性的存在和激活機(jī)制，認(rèn)為ＰＯ在甲殼動(dòng)物中起識(shí)別和防御作用。ＰＯＤ的功能是通過過氧化氫酶的作用，將有害的細(xì)胞代謝產(chǎn)物過氧化氫分解成水和氧氣，起到細(xì)胞保護(hù)作用，但ＰＯＤ在免疫反應(yīng)中的地位仍不十分清楚。ＡＣＰ是一種磷酸單酯酶，在對(duì)蝦體內(nèi)具有清除、消化、水解異物的作用。劉樹青等［１２］認(rèn)為ＡＣＰ是巨噬細(xì)胞溶酶體酶的標(biāo)志酶，在甲殼類血液和血細(xì)胞中有重要的防御功能。ＳＯＤ是生物體內(nèi)非常重要的一種抗氧化酶，能保護(hù)功能大分子不被破壞、減緩機(jī)體衰老。近年來的研究表明，ＳＯＤ活性與生物的免疫水平密切相關(guān)，可以用它的活性變化作為衡量對(duì)蝦免疫狀態(tài)的指標(biāo)，甚至是定量指標(biāo)。本試驗(yàn)通過對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦進(jìn)行ＷＳＳＶ急性攻毒試驗(yàn)，動(dòng)態(tài)檢測了這幾個(gè)指標(biāo)在不同感染時(shí)間的活性，除血液ＰＯＤ、肝臟ＳＯＤ和肌肉ＡＣＰ活性在不同的感染時(shí)間變化不顯著以外，其他的都存在顯著（Ｐ＜０．０５）或極顯著性差異（Ｐ＜０．０１），加之在對(duì)照組中４種免疫酶的活性很穩(wěn)定，可以推測ＰＯ、ＳＯＤ、ＡＣＰ的活性變化與ＷＳＳＶ感染復(fù)制有關(guān)，是斑節(jié)對(duì)蝦機(jī)體應(yīng)激后所作出的防御反應(yīng)。

綜合本試驗(yàn)中ＰＯ、ＰＯＤ、ＳＯＤ和ＡＣＰ活性在血淋巴、肌肉和肝臟中的變化，可以發(fā)現(xiàn)它們都有在感染初期活性降低，感染中期活性升高，感染后期活性再次降低的規(guī)律。這一結(jié)論與邱德全等［１３］研究在不同氨氮濃度下攜帶ＷＳＳＶ的凡納濱對(duì)蝦發(fā)病后酚氧化物酶酶活性變化規(guī)律具有一致性；與黃旭雄等［１４］試驗(yàn)中明對(duì)蝦急性感染哈維弧菌和ＷＳＳＶ后，血液ＳＯＤ、ＰＯ變化規(guī)律相類似。但是關(guān)于感染病菌后血液免疫酶的活性變化，不同學(xué)者有不同的結(jié)論，有報(bào)道顯示中國對(duì)蝦在注射一定量弧菌和大腸桿菌后，其血淋巴ＰＯ活性降低［１０］，嚴(yán)重感染ＷＳＳＶ的中國對(duì)蝦ＰＯ活性也顯著下降［７］。同時(shí)也有報(bào)道稱給斑節(jié)對(duì)蝦投喂芽孢桿菌后，ＰＯ活性比對(duì)照組顯著增高［１５］；用活的嗜水氣單胞菌注射羅氏沼蝦，血液ＰＯ活性２４ ｈ內(nèi)升高４倍后又恢復(fù)到原來水平［１６］。本試驗(yàn)中4種免疫酶活性變化與上述報(bào)道也有類似之處，ＰＯ、ＳＯＤ等感染７２ ｈ后最終酶活性也都顯著下降，符合酶活性在感染后下降的觀點(diǎn)，而且在最終活性降低之前有一個(gè)活性恢復(fù)的過程，這也與酶活性升高觀點(diǎn)相吻合。另外肝臟組織中的ＡＣＰ、ＳＯＤ活性均高于肌肉組織可能是由于肝臟為免疫器官的原因。

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