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桃小食心蟲產(chǎn)卵的寄主選擇特性

2011-12-31 00:00:00王曉明,王洪平,呂淑霞,楊奉儀,張喆
湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2011年11期

摘要:為了解桃小食心蟲產(chǎn)卵對(duì)果實(shí)的選擇特性,采用固相微萃?。ǎ樱校停牛┡c氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)測(cè)定不同蘋果揮發(fā)性成分。選取易受桃小食心蟲危害的金冠蘋果具有代表性的揮發(fā)物質(zhì)(乙醛、丁醛、丁醇、己醇、糠醛、庚酸、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、乙酸己酯、丙酸丙酯)的不同濃度進(jìn)行桃小食心蟲引誘試驗(yàn)。結(jié)果表明,0.1和1.0 mg/mL的乙酸乙酯、0.1 mg/mL的乙酸丁酯、1.0 mg/mL的乙酸戊酯、6.0和60.0 mg/mL的乙酸己酯、0.1 mg/mL的丙酸丙酯具有顯著的效果;并利用正交試驗(yàn)方法得出幾種效果較好的混合配比。再利用人工氣候箱進(jìn)行產(chǎn)卵引誘試驗(yàn),得出0.1 mg/mL乙酸乙酯、1.0 mg/mL乙酸丁酯、10.0 mg/mL乙酸戊酯、5.0 mg/mL乙酸己酯、0.1 mg/mL丙酸丙酯的混合配比為試驗(yàn)的最佳引誘物質(zhì)。

關(guān)鍵詞:桃小食心蟲;寄主選擇性;引誘;產(chǎn)卵

中圖分類號(hào):S436.621.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0439-8114(2011)11-2236-04

Study on the Host Selection Process of Carposina niponensis Oviposition

WANG Xiao-minga,WANG Hong-pingb,L?譈 Shu-xiaa,YANG Feng-yia,ZHANG Zhea

(a.College of Biological Science and Technology; b.College of Plant Protection,Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866,China)

Abstract: To study the selective characteristics of oviposition of Carposina niponensis Walsingham on fruit, solid phase micro extraction(SPME) and gas chromatography mass spectrum(GC-MS) were applied to analysis the volatiles in apples. The representative volatiles of apples (acetaldehyde, butanal, butylalcohol, hexanol, furfural, heptanoic acid, ethyl acetate, acetic acid-butyl ester, acetic acid-pentyl ester, acetic acid-hexyl ester, propanoic acid-propyl ester) which could be easily damaged by C. niponensis were selected as the attractant to the bugs. And orthogonal experiment was taken to obtain a better mixed ratio to attract the bugs. The results showed that 0.1 mg/mL and 1.0 mg/mL of ethyl acetate, 0.1 mg/mL of acetic acid-butyl ester, 1.0 mg/mL of acetic acid-pentyl ester, 6.0 mg/mL and 60.0 mg/mL of acetic acid-hexyl ester, 0.1 mg/mL of propanoic acid-propyl ester had remarkable effects. An oviposition experiment was taken in the artificial climate box; and that mixed ratio of 0.1 mg/mL ethyl acetate, 1.0 mg/mL acetic acid-butyl ester, 10mg/mL acetic acid-pentyl ester, 5.0 mg/mL acetic acid-hexyl ester, 0.1mg/mL propanoic acid-propyl ester was most attractive.

Key words: Carposina niponensis Walsingham;host selectivity; attractant; oviposition

桃小食心蟲又叫桃蛀果蛾,屬鱗翅目,蛀果蛾科,簡稱“桃小”,拉丁學(xué)名為Carposina niponensis Walsingham,主要發(fā)生在我國偏北方和偏東部地區(qū)[1],對(duì)蘋果的危害最嚴(yán)重,是北方果樹生產(chǎn)中影響產(chǎn)量的重要因素之一。雌蟲在蘋果表面產(chǎn)卵,幼蟲孵化后蛀果[2],從而造成蘋果減產(chǎn)、品質(zhì)和商品性下降。前人對(duì)蘋果揮發(fā)性成分研究較多,但蘋果揮發(fā)性成分與桃小食心蟲的產(chǎn)卵選擇效應(yīng)之間的關(guān)系還未見詳細(xì)報(bào)道。蘋果不同品種受害程度不同,可能因?yàn)椴煌麑?shí)散發(fā)不同強(qiáng)度的香味物質(zhì)。為進(jìn)一步探明桃小產(chǎn)卵與揮發(fā)性物質(zhì)的相關(guān)性,本文根據(jù)其特有的生活習(xí)性[3,4]和前人所做的一些嘗試,進(jìn)行了系列試驗(yàn)研究,以期得出一組效果較佳的引誘產(chǎn)卵物質(zhì),闡明蘋果揮發(fā)性物質(zhì)與桃小產(chǎn)卵選擇性之間的關(guān)系。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1)蘋果品種:紅富士、黃元帥、國光、津輕、喬納金均為8月初采自大連市普蘭店區(qū)蘋果園。

2)養(yǎng)蟲籠:養(yǎng)蟲籠規(guī)格為長38 cm、寬18 cm、高20 cm。

3)供試化合物:乙醛、丁醛、丁醇、己醇、糠醛、庚酸、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、乙酸己酯、丙酸丙酯。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1蘋果揮發(fā)性物質(zhì)成分的測(cè)定選?。秱€(gè)大小、重量、顏色基本一致的完好果實(shí),放置于帶有聚四氟乙烯進(jìn)樣墊的密閉玻璃瓶內(nèi)(體積為3 L),平放24 h 后將固相微萃取纖維頭(聚二甲基硅氧烷涂層厚度為100 μm)通過進(jìn)樣墊插入瓶內(nèi)頂空吸附30 min,吸附完成后,縮回纖維頭,待分析。

利用Thermo Trace GC Ultra-ITQ 900氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行分析。色譜條件:色譜柱為DB-5(60 m×0.32 mm×0.5 μm);進(jìn)樣口溫度250 ℃,不分流進(jìn)樣,程序升溫,36 ℃保持5 min,2 ℃/min升到50 ℃,然后以5 ℃/min升到100 ℃,再以8 ℃/min升到180 ℃,15 ℃/min升到250 ℃,保持3 min,載氣為He氣,柱流速50 mL/min。質(zhì)譜條件:電離方式EI,電子能量70 eV,全掃描方式,掃描范圍:35~500 amu,離子源溫度250 ℃。

1.2.2桃小對(duì)植物揮發(fā)性物質(zhì)的行為反應(yīng)

1)桃小對(duì)單體揮發(fā)性物質(zhì)溶液的行為反應(yīng)。將每種揮發(fā)性物質(zhì)分別溶于液體石蠟中,在旋渦混合器上充分混合,配成濃度為0.1、1.0、10.0 mg/mL的溶液。

“Y”型嗅覺測(cè)定儀由以空氣壓縮機(jī)、空氣過濾器(內(nèi)裝活性炭)、空氣加濕器(125 mL廣口瓶內(nèi)裝有蒸餾水)、味源瓶和對(duì)照瓶、空氣流量計(jì)、“Y”型玻璃管組成。

在測(cè)試時(shí),將生理指標(biāo)一致的待測(cè)試蟲由出氣口送入“Y”型管內(nèi),試蟲在“Y”型管基部與帶有信息物質(zhì)的氣味湍流接觸后逆風(fēng)飛行(爬行),沿著氣味的濃度梯度進(jìn)入特定的支管內(nèi)。當(dāng)桃小越過某臂

1/2處,則記為桃小對(duì)氣味做出選擇;當(dāng)桃小放入后2 min內(nèi)不做選擇,則記錄無反應(yīng),結(jié)束對(duì)該蟲的行為觀察。每頭雌蟲只測(cè)試1次,每個(gè)處理測(cè)30次。每次處理后用洗滌劑徹底清洗測(cè)定裝置,100 ℃烘干, 以消除不同處理間殘留氣味的影響。每測(cè)定5頭時(shí)調(diào)換一下“Y”型管兩臂的方向,用以消除幾何位置對(duì)桃小行為可能產(chǎn)生的影響。測(cè)定時(shí)間安排在9∶00~15∶00進(jìn)行[5]。

2)桃小對(duì)揮發(fā)性物質(zhì)混配溶液的行為反應(yīng)。按設(shè)計(jì)方案將揮發(fā)性物質(zhì)溶于液體石蠟中,在旋渦混合器上充分混合,配成混合溶液。對(duì)桃小行為反應(yīng)的測(cè)定方法同上。

1.2.3揮發(fā)性物質(zhì)混配溶液對(duì)桃小產(chǎn)卵影響試驗(yàn)稱?。保胺荩埃?g脫脂棉花分別放入培養(yǎng)皿中(直徑9 cm),在9份棉花上滴加利用嗅覺儀測(cè)出的混配溶液0.75 mL,剩1份加0.75 mL液體石蠟作為對(duì)照。用果蔬保鮮薄膜四面密封培養(yǎng)皿后在薄膜上層均勻扎上5個(gè)小針眼將培養(yǎng)皿包好,上覆潔凈的定性濾紙,將濾紙與培養(yǎng)皿固定好。將培養(yǎng)皿隨機(jī)放入養(yǎng)蟲籠中。籠中放入20頭成蟲(10雌10雄)?;\頂蓋濕紗布,然后將養(yǎng)蟲籠置于人工氣候箱內(nèi),保持溫度25 ℃,相對(duì)濕度為65%~75%,光照利用32 W的日光燈每天照明14 h。試驗(yàn)過程中不時(shí)觀察成蟲的產(chǎn)卵行為,最后記錄各濾紙上的著卵量。每個(gè)處理設(shè)5個(gè)重復(fù)。

2結(jié)果與分析

2.1蘋果揮發(fā)性成分測(cè)定結(jié)果

測(cè)得5種蘋果香氣成分見表1。8月份為桃小二代產(chǎn)卵高峰期,故在此時(shí)進(jìn)行蘋果的揮發(fā)性成分測(cè)定。通過對(duì)5種蘋果揮發(fā)性成分的種類及含量進(jìn)行比較,初步確定乙醛、丁醛、丁醇、己醇、糠醛、庚酸、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、乙酸己酯、丙酸丙酯為金冠蘋果的特異性揮發(fā)成分。

2.2桃小對(duì)蘋果揮發(fā)性物質(zhì)的行為反應(yīng)

2.2.1桃小對(duì)單體揮發(fā)性物質(zhì)溶液的行為反應(yīng)桃小在“Y”型嗅覺儀中對(duì)蘋果揮發(fā)性物質(zhì)的行為反應(yīng)如表2所示,各揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)桃小的行為反應(yīng)不一,即使是同一種揮發(fā)性物質(zhì),當(dāng)配制成不同濃度時(shí),對(duì)桃小的行為反應(yīng)也不一樣。從表2可知,當(dāng)用乙酸乙酯(0.1、1.0 mg/mL)、乙酸丁酯(0.1 mg/mL)、乙酸戊酯(1.0 mg/mL)、乙酸己酯(6.0、60.0 mg/mL)、丙酸丙酯(0.1 mg/mL)作為誘源時(shí),桃小食心蟲均表現(xiàn)為比較積極的反應(yīng),桃小對(duì)這些揮發(fā)物的趨性顯著(P<0.05)。

2.2.2桃小對(duì)蘋果揮發(fā)性物質(zhì)混配溶液的行為反應(yīng)對(duì)于蘋果揮發(fā)性物質(zhì)混配的方案參考了單體物質(zhì)的引誘結(jié)果,為優(yōu)化出最佳引誘物質(zhì),本試驗(yàn)采用液體石蠟為溶劑,附加4種不同濃度的乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、乙酸己酯、丙酸丙酯,按正交表L16(45)的正交設(shè)計(jì)方法進(jìn)行試驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)果見表3。

由表3可知,RA>RC>RD>RE>RB,即乙酸乙酯對(duì)桃小產(chǎn)卵引誘的影響最為顯著,然后依次為乙酸己酯、乙酸戊酯、丙酸丙酯,最不顯著的因子為乙酸丁酯。其中最佳條件組合為A1B2C3D4E1,即乙酸乙酯0.1 mg/mL,乙酸丁酯1.0 mg/mL,乙酸己酯5.0 mg/mL,乙酸戊酯10.0 mg/mL,丙酸丙酯0.1 mg/mL,由于在試驗(yàn)設(shè)計(jì)表中沒有符合此條件的方案,所以按照上述得出的最佳引誘條件做追加試驗(yàn),得出結(jié)果為引誘臂28次,效果最為明顯,暫時(shí)將此組方定為組方A。本研究采用的正交表沒有對(duì)各因素的交互作用進(jìn)行研究,因此得出的結(jié)果具有一定的局限性。

2.3蘋果揮發(fā)性物質(zhì)混配溶液對(duì)桃小產(chǎn)卵的影響

根據(jù)桃小對(duì)混配蘋果揮發(fā)性物質(zhì)的行為反應(yīng)結(jié)果,將正交試驗(yàn)中效果較好的配比方案即正交試驗(yàn)中的組方2、組方3、組方6、組方8、組方9、組方A和一種效果不好的組方13外加對(duì)照共計(jì)8種物質(zhì)進(jìn)行產(chǎn)卵測(cè)定。在供試的7種混合物中,桃小食心蟲在組方13中所產(chǎn)的卵量顯著少于對(duì)照(P<0.05);在組方2、組方6、組方8、組方9、組方A中的產(chǎn)卵量均顯著多于對(duì)照(P<0.05),而其中組方A的誘卵量又顯著高于其他物質(zhì)(表4)。因此,確定組方A(乙酸乙酯0.1 mg/mL,乙酸丁酯1.0 mg/mL,乙酸己酯5.0 mg/mL,乙酸戊酯10.0 mg/mL,丙酸丙酯0.1 mg/mL)為本次試驗(yàn)最佳產(chǎn)卵引誘物質(zhì)。

3討論

在自然界,植食性的昆蟲對(duì)寄主的產(chǎn)卵選擇性一般依據(jù)視覺和嗅覺識(shí)別植物,并發(fā)生定向趨性,同時(shí)植物揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)昆蟲的定向定位、取食、產(chǎn)卵等行為反應(yīng)均起重要作用[6]。國外許多學(xué)者關(guān)于植食性昆蟲對(duì)不同顏色、氣味、果型的寄主植物產(chǎn)卵選擇性研究甚多[7,8],主要依據(jù)不同植物揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)植食性昆蟲產(chǎn)卵趨性的影響,來判定最適產(chǎn)卵的寄主植物,進(jìn)而分析鑒定出具有引誘作用的信息化合物。

本研究通過對(duì)蘋果揮發(fā)性成分的測(cè)定分析并利用“Y”型嗅覺測(cè)定儀進(jìn)行生物測(cè)定,結(jié)果表明,桃小食心蟲對(duì)植物揮發(fā)性物質(zhì)的行為反應(yīng)可分為正趨性和負(fù)趨性。負(fù)趨性表現(xiàn)為爬向誘蟲臂的桃小食心蟲數(shù)目顯著少于爬向?qū)φ毡鄣奶倚∈承南x,而正趨性則正好相反。不同的植物揮發(fā)物,或同一揮發(fā)物的不同濃度對(duì)桃小食心蟲引起的行為反應(yīng)存在較大的差異。并且?guī)追N正趨向的揮發(fā)性物質(zhì)組合效果明顯好于單體物質(zhì)。在室內(nèi)條件下根據(jù)桃小食心蟲產(chǎn)卵情況得出0.1 mg/mL乙酸乙酯、1.0 mg/mL乙酸丁酯、10.0 mg/mL乙酸戊酯、5.0 mg/mL乙酸己酯、0.1 mg/mL丙酸丙酯的配比組合具有較好的引誘效果。本研究結(jié)果表明,桃小食心蟲選擇寄主產(chǎn)卵與寄主植物的揮發(fā)性物質(zhì)具有一定的聯(lián)系,可為日后深入研究桃小食心蟲產(chǎn)卵情況提供參考。研究揮發(fā)性化合物對(duì)桃小食心蟲的行為機(jī)理,對(duì)于豐富生態(tài)學(xué)理論,發(fā)揮其在生物防治中的作用,探索減少化學(xué)農(nóng)藥的使用次數(shù)和用量,從而對(duì)開發(fā)桃小食心蟲防治新技術(shù)具有重要意義。

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