青海省民和縣牛支原體肺炎血清學調查研究

摘要：采用ＥＬＩＳＡ方法對從民和縣范圍內收集的４９５份肉牛血清進行了肺炎支原體抗體監測。結果從采集的４９５份牛血清中檢出牛肺炎支原體陽性血清１０７份，陽性率為２１．６２％。該結果表明，民和縣范圍內肉牛中存在支原體的感染和流行。

關鍵詞：牛肺炎支原體；ＥＬＩＳＡ；血清學調查

中圖分類號：Ｓ８５８．２３文獻標識碼：B文章編號：１００７－２７３Ｘ（２０11）09-0026-02

青海省是傳統的畜牧大省，由于其獨特的自然地理情況和草地資源，也是我國肉牛養殖的主要區域。自２０世紀９０年代初國家強調發展以節糧型草食牲畜為主的畜牧業以來，全省肉牛產業得到快速發展。與此同時，各種疫病對肉牛養殖業的制約作用也日益凸顯。在這些動物疫病中，牛呼吸道疾病綜合征（Ｂｏｖｉｓ rｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ dｉｓｅａｓｅ cｏｍｐｌｅｘ，ＢＲＤＣ）是危害養牛業最為嚴重的一大類疾病。而引起ＢＲＤＣ的病原中，支原體感染是其中重要的一類。支原體亦稱霉形體，最早由Ｎｏｃａｒｄ和Ｒｏｕｘ由牛傳染性胸膜肺炎病例中分離得到［１］。支原體家族中成員非常多，引起牛肺疫的絲狀支原體亞種曾經在我國大面積流行，并導致嚴重的經濟損失。哈爾濱獸醫研究所研制成功的牛傳染性胸膜肺炎弱毒疫苗經廣泛使用，結合封鎖、消毒等措施徹底控制了該病，我國也于１９９６年對外宣布消滅牛傳染性胸膜肺炎。養牛業支原體疫病也一度銷聲匿跡。然而，自辛九慶等［２］報道國內首次從患肺炎的犢牛肺臟中分離到了牛支原體（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ Ｂｏｖｉｓ）以來，該病已在十多個省市流行，奶牛、肉牛中均有報道。因此，本次從全縣范圍內廣泛采集肉牛血清樣本，對牛支原體進行抗體監測，目的在于搞清楚牛支原體在我縣肉牛中的發生流行情況，為制定該病綜合防范措施，確保肉牛產業安全健康生產提供基礎資料。

１材料和方法

１．１材料

牛支原體ＥＬＩＳＡ檢測試劑盒（ＢＩＯ－Ｘ ＭＹＣＯＰＬＡＳＭＡ ＢＯＶＩＳ ＥＬＩＳＡ ＫＩＴ Ｋ２６０）。被檢血清共４９５份，采自青海省民和縣各肉牛養殖企業和散養戶，采樣地點覆蓋全縣各主要牛場。

１．２方法

常規抗體ＥＬＩＳＡ檢測方法，具體操作參照試劑盒說明。

２結果

本次試驗中采用ＥＬＩＳＡ方法共檢測了４９５份牦牛血清樣品，其中檢出陽性１０７份，陽性率為２１．６２％。

３討論和分析

牛支原體是一種容易被忽視的病原，目前國內尚無有效的血清學鑒別診斷方法，對牛支原體的毒力因子及免疫機理研究也相對滯后，缺乏其相應的疫苗和快速診斷檢測方法，加之牛支原體對大部分抗生素不敏感，這給臨床防治帶來很大的困難。該病在我國的諸多流行病學資料也不明晰，缺乏系統的流行病學資料，目前尚無商品化的疫苗用于該病防治，使綜合防制面臨非常大的困難。此次對民和縣境內的大樣本量的牛支原體抗體監測，結果顯示牛支原體在民和縣境內已經有較高的陽性率，雖尚未見大面積支原體性肺炎發病的報道，但是高陽性的感染率也是疫病暴發的高風險因素。

牛支原體主要引起牛的肺炎、關節炎、乳房炎、角膜結膜炎等。該病原于１９６１年首次在美國患有乳房炎的病牛中分離得到［３］。在呼吸道感染的病牛中，至少有１／４～１／３是由牛支原體引起的［４］。牛支原體已經在歐美的很多國家流行，引起牛呼吸道疾病并造成嚴重經濟損失。近些年我國部分地區肉牛調運過程中導致一些牛群出現嚴重的肺炎癥狀，臨床癥狀和病理解剖結果與牛肺疫非常相似，經哈爾濱獸醫研究所診斷為牛支原體病原后，支原體引起的牛病再次引起國內獸醫工作者的高度重視。此次對全縣境內肉牛進行牛支原體血清學摸底調查，全縣內共采集４９５份牛血清，采樣地點覆蓋全縣各主要牛場和散養戶，結果共檢出１０７份牛支原體陽性血清，陽性率高達２１．６２％。此次結果表明全縣范圍內肉牛中存在牛支原體的感染和流行。

３．１病原及發病原因分析

牛支原體肺炎是一種條件性致病病原，常在牛呼吸道中存在，在牛群健康及飼養管理良好的情況下不產生臨床癥狀。目前的研究表明牛支原體在牛群中分布廣泛，可引起地方流行性疫病，肉牛和奶牛均高度敏感，極少感染水牛和小型反芻動物。牛群一旦感染發病或青年牛潛伏感染后很難被清除［５］。在引種、補欄、貿易販運活動頻繁，動物長途運輸后免疫力低下、應激反應以及氣溫劇烈變化時常造成該病的發生。養殖環境衛生狀況欠佳，糞便及殘留飼草墊料發酵產生的有毒有害氣體也是誘發該病的主要原因。

３．２臨床癥狀分析

近一段時間以來在某些鄉鎮養牛合作社和個別養殖大戶從外引進和區內調運肉牛進行飼養過程中，在隔離暫養還未混群時就發現個別牛精神沉郁，食欲不振，咳嗽頻繁，體溫升高（４０～４１℃）。后迅速蔓延至全群牛，發病率可達５０％，死亡率也高達２０％左右，小牛犢發病率和死亡率甚至更高（分別達８０％和５０％以上）。牛群臨床表現以劇烈咳嗽為主，尤其是在清晨和采食后咳嗽表現更為突出，干咳和濕咳均有；個別牛呼吸急迫，甚至有胸、腹式呼吸交替的表現；病程初期眼角分泌物非常多，以黃白色膿性分泌物為主，小部分病牛流清亮漿液性分泌物導致眼角持續長時間濕潤；鼻腔分泌物表現各異，有的為凝乳塊膿性分泌物、有的為豆腐渣樣分泌物，也有漿液性鼻液和鼻漏表現的病牛；絕大部分牛胸部叩診無疼痛避讓表現，但聽診幾乎都表現為濕啰音或摩擦音。剖檢部分死亡病例發現病理變化主要集中在胸腔和肺部，肺臟廣泛性出血性壞死，偶爾可見肺臟與胸膜粘連，剪開氣管可見大量分泌物附著，心包積液嚴重、呈淡黃色，少部分病牛可見腸道少量出血病變。發病病例采用抗生素治療效果不明顯。

３．３及早診斷

可根據臨床經驗結合肉牛發病的臨床表現和病理解剖結果以及施治情況進行綜合判斷［２，６］，經采集部分病牛的肺臟組織送交哈爾濱獸醫研究所支原體國家參考實驗室進行病原分離及支原體種間ＰＣＲ鑒別診斷，最后確診引起本次牛群發病的病原為牛支原體。血清學診斷結果也印證了病原分離鑒定的檢測結果。支原體分離培養比較困難，營養要求和培養條件比較苛刻，并且需注意與無乳支原體的鑒別診斷。

３．４搞好綜合防控措施

“早確診、早治療”是有效控制該病的基本原則，選用支原體敏感的抗生素如四環素，環丙沙星等有一定的治療效果，另據報道早期使用泰樂菌素類（泰樂菌素、替米考星、瑞可新）和泰妙菌素類抗菌藥物（支原凈、沃尼妙林）也有一定效果。采用抗生素治療的同時一定要注意不同流行區域內菌株藥敏差異性和支原體耐藥性因素，并且保證劑量和療程要足夠。筆者在臨床施治過程中，采用環丙沙星和四環素兩種抗生素交替使用，足量靜注，同時注意搞好其他繼發疾病的對癥治療和部分重癥病例的支持治療，７ｄ為一個療程，３個療程為一個階段，通常３個療程后病牛普遍好轉，長勢良好，再未見新發病例。

縱觀牛支原體在我國的發病情況報道，長途調運、輸入性的引種和販買活動是該病發生的外部因素，做好動物及其產品的流通監管，嚴格防疫檢疫是有效防控該病的強有力手段。加強飼養管理，減少應激因素，加強牛群引進管理，不從疫區或發病區引進牛只，分群隔離飼養，保證日糧的全價營養，適當補充精料與維生素及礦物質，嚴格環境消毒處理，嚴密監控牛群健康是防制該病的主要方法。

參考文獻：

［１］李媛，辛九慶，高玉龍，等．動物支原體［Ｊ］．畜牧獸醫科技信息，２００４（9）：１６－１７．

［２］辛九慶，李媛，郭丹，等． 國內首次從患病的犢牛肺臟中分離到牛支原體［Ｊ］．中國預防獸醫學報，２００８，３０（９）：６６１－６６５．

［３］HALE Ｈ Ｈ，ＨELMBOLDT Ｃ Ｆ，ＰLASTRIDGE Ｗ Ｎ，ｅｔ ａｌ． Ｂｏｖｉｎｅ ｍａｓｔｉｔｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ａ Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｃｏｒｎｅｌｌ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｉａｎ，１９６２，５２：５８２－５９１．

［４］ＮICHOLAS Ｒ，ＢAKER Ｓ，ＡYLING Ｒ，ｅｔ ａｌ． Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｇｒｏｗｉｎｇ ｃａｔｔｌｅ［Ｊ］．Ｃａｔｔｌｅ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，２０００，８：１１５－１１８．

［５］胡長敏，石磊，龔瑞，等．牛支原體病研究進展［Ｊ］．動物醫學進展，２００９，３０（８）：７３－７７．

［６］石磊，龔瑞，尹爭艷，等．肉牛傳染性牛支原體肺炎流行的診斷［Ｊ］．華中農業大學學報，２００８，２７（５）：６２９－６３３．