地錦草化學成分及其抗真菌作用的研究進展*

謝奇，李治建，斯拉甫·艾白，，古力娜·達吾提，周露

(1.石河子大學藥學院，新疆石河子 832000;2.新疆維吾爾自治區維吾爾醫藥研究所，烏魯木齊 830049;3.新疆維吾爾自治區維吾爾醫醫院，烏魯木齊 830049)

地錦草為大戟科植物地錦(Euphorbia humifusa Willd.)或斑地錦(Euphorbia maculata L.)的干燥全草［1］。又名血見愁、血筋草、紅莖草、鋪地錦、奶汁草等，是中醫、維醫常用藥材。其化學成分主要有黃酮類、三萜類、香豆素類、甾醇類、鞣質及酚酸類等化合物［2］，具有多種藥理作用，是一種藥用價值很高的植物。為了進一步研究地錦草的抗真菌作用及其物質基礎，筆者就地錦草在化學成分、抗真菌作用等方面的研究作一綜述。

1 化學成分

現代化學研究表明，地錦草的主要化學成分有黃酮、三萜、甾醇、香豆素、鞣質及酚酸類等化合物。

1.1 黃酮類 地錦草含有的黃酮類化合物主要為槲皮素苷類、山奈素苷類，苷元為槲皮素(quercetin)、山奈素(kaempferide);地錦草中還含槲皮素-3-O-(2-沒食子酸)-葡萄糖苷和異槲皮苷(isoquercitrin)。ISAO等［3］從斑葉地錦草(E.maculata和 E.supina)的地上部分分離得到紫云英苷(astragalin)、異槲皮苷(isoquercitrin)、山柰酚-3-O-(2”-O-沒食子酰)-β-D-葡萄 糖 苷 ［kaempferol-3-O-(2 ”-O-galloyl)-β-D-glucoside］、槲皮素-3-O-(2”-O-沒食子酰)-β-D-葡萄糖苷［quercetin-3-O-(2”-O-galloyl)-β-D-glucoside］、槲皮素-3-O-α-L-阿 拉 伯 呋 喃 糖 苷 (quercetin-3-O-α-L-arabinofuranoside)。柳潤輝等［2，4-5］從地錦草中分離得到5種黃酮類化合物:芹菜素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷、槲皮素、山奈酚，其中前3種化合物是首次從該植物中分離得到;另外還對斑地錦(Euphorbia maculata L.)的化學成分進行研究，從中分離得到5種黃酮類化合物，經鑒定為:芹菜素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷、槲皮素、山柰酚。其中前兩個化合物首次從該植物中分得。YOSHIAKI等［6］從斑地錦中分離得到槲皮素-3-O-(2”，3”-二-O-沒食子酰)-β-D-吡喃葡萄糖苷［quereetin-3-O-(2”，3”-di-O-galloyl)-β-D-glucopyranoside］。此外，地錦草中還含有洋芹素-7-O-β-D-葡萄糖苷［7］。

1.2 甾醇及三萜類化合物 柳潤輝等［2，4］從地錦草中分離得到β-谷甾醇，又從地錦草乙醇提取物的石油醚萃取部分中分離得到4個甾醇和三萜類化合物，經鑒定為羽扇豆醇(lupeol)、cycloart-23E-en-3β，25-diol、cycloart-23E-en-3β，25-diol、cycloart-25-ene-3β，24-diol，4種化合物均為首次從該植物中分離得到。裴英鴿對地錦草的化學成分進行系統研究，共分離得到了12種三萜類化合物:①羽扇豆-20(29)-烯-3β，30-二醇;②3，4-開環-羽扇豆-4(23)，20(29)-二烯-24-羥基-3-羧酸;③24-亞甲基環阿爾廷醇;④環阿爾廷-25-烯-3β，24(S)二醇;⑤3，4-開環-環阿爾廷-4(29)，25-二烯-24(S)-羥基-3-羧酸;⑥3，4-開環-環阿爾廷-4(29)，25-二烯-24(R)-羥基-3-羧酸;⑦環阿爾廷-23(Z)-烯-3β，25-二醇;⑧23(E)-烯-25-乙氧基-3β-環阿爾廷醇;⑨4α，14α-二甲基-8，24(28)-二烯-3β-羥基-5α-麥角甾-7-酮;⑩4α，14α-二甲基-8，24(28)-二烯-3β-羥基-5α-麥角甾-7，11-二酮;○11 4α，14α-二甲基-7，9(11)，24(28)-三烯-5α-麥角甾-3β-酮;○12 7，23(Z)-二烯-3β-甘遂烷醇;還有4個甾醇類化合物:β-谷甾醇、β-胡蘿卜苷、豆甾-5烯-3-O-(6-亞麻酰基)-β-D-吡喃葡萄糖、7β-羥基谷甾醇。

1.3 鞣質及酚酸類化合物 地錦草的根、莖、葉、花、果實種子均含有鞣質及酚酸類化合物。方乍浦等從斑地錦中分離出含沒食子酸的衍生物短葉蘇木酚(brevifolin)。藤井勝也等報道地錦草中含有沒食子酸、沒食子酸甲酯。柳潤輝等［4-5］從地錦草中分離出鞣花酸、短葉蘇木酚、沒食子酸，前兩個化合物為首次從該植物中得到;另外還從斑地錦(Euphorbia maculata L.)中分離得到沒食子酸乙酯、鞣花酸，這兩種化合物均為首次從該植物中得到。

TAKASHI等［7］從地錦草地上部分分離得到3種新的可水解的鞣質和及1種新的鞣花酸苷:鞣花酸-4-O-β-D-吡 喃 葡 萄 糖 苷 (ellagicacid-4-O-β-D-glucopyranoside)、Euphormisin M3(1，4，6-tri-O-galloylα-D-glucose)、Euphormisin M1(1，3，6-trio-galloyl-4-O-brevifolincarbosyl-β-D-glucose);Euphormisin M2。ISAO等［3］從斑葉地錦草(E.maculata和 E.supina)的地上部分分離得斑葉地錦素 A，1，2，3-三-O-沒食子酰-β-D-葡萄糖(1，2，3-tri-O-galloyl-β-D-glucose)和 Corilagin。YOSHIAKI等［6］從斑地錦中分離得到斑葉地錦草素E(eumaculin E)和eumaculin B、eumaculin D。此外地錦草還含有莽草酸、1-環己烯-5-羥基-3，4-氧-異丙亞甲基-1-羧酸、亞麻酸和棕櫚酸(palmitic acid)。

1.4 內酯及香豆素類 地錦草的乙酸乙酯提取物中可分離出內酯及香豆素類成分:莨菪亭(scopoletin)、散形酮(umbelliferone)、三脈澤蘭素(ayapin)。柳潤輝等［5］從斑地錦中分離得到傘形花內酯。裴英鴿從地錦草中分離出2個香豆素類化合物:7-甲氧基-6-羥基香豆素、短葉蘇木酚酸乙酯。

1.5 其他成分 地錦草還含有正十六碳酸α-甘油酯(1-glycerin hexadecylate)［2］、(3R，6R，7E)-4，7-二烯-3-羥基-9-紫羅蘭酮、1-棕櫚酸甘油酯、棕櫚酸-α，α＇-雙甘油酯、1-棕櫚酸-3-亞麻酸甘油脂和正二十二烷醇。

2 抗真菌作用

2.1 地錦草及其復方的體外抗真菌作用 現代藥理研究證明，地錦草及其復方具有顯著的抗真菌作用。維吾爾醫則主要采用其復方制劑治療皮膚疾病。以地錦草為君藥的夏塔熱片(由地錦草、訶子肉、毛訶子肉等藥材組成)及夏塔熱軟膏(由地錦草、天仙藤、苦楝皮等藥材組成)具有清除異常黏液質、膽液質及敗血，消腫止癢的功能，用于治療銀屑病、過敏性皮炎、手足癬及體癬等皮膚疾病［9］。

2.1.1 地錦草復方的體外抗真菌作用 斯拉甫·艾白等［8-9］對地錦草復方夏塔熱片合用其軟膏進行抗真菌等方面的研究，體內藥敏試驗表明，該藥對紅色毛癬菌、粉小孢子菌及石膏小孢子菌等常見皮膚真菌有抑制作用。鄧淑文等［10］研究了體外抗真菌的作用。采用美國臨床實驗室標準化委員會(national committee for clinical laboratory standards，NCCLS)推薦的 M-38P方案和M-27P方案分別測定171株臨床常見皮膚癬菌和69株臨床常見念珠菌的最低抑制濃度(minimal inhibitory concentration，MIC)。結果百癬夏塔熱對171株皮膚癬菌的MIC90范圍為1.024～2.048 mg·mL-1，且毛癬菌屬的敏感性比小孢子菌屬高，抗菌譜由強至弱依次為紅色毛癬菌(T.rubrum)，石膏樣毛癬菌(T.mentagro)，斷發毛癬菌(T.tonsurance)，絮狀表皮癬菌(E.floccosum)，T.violaceum，石膏樣小孢子菌(M.gypseum)，犬 小 孢 子 菌 (M.canis)，1.024～2.048 mg·mL-1是百癬夏塔熱對皮膚癬菌的藥敏分界點標準。上述研究結果提示，地錦草及其復方制劑對臨床常見皮膚癬菌具有顯著的抑制作用。

2.1.2 地錦草提取物及有效部位的體外抗真菌作用李治建等［11］測定了地錦草提取物對60株臨床常見皮膚癬菌的MIC80值，結果表明，地錦草提取物對紅色毛癬菌的平均MIC80為446μg·mL-1，對石膏樣毛癬菌的平均MIC80為539μg·mL-1。文獻報道，采用大孔吸附樹脂梯度洗脫分離法、溶劑萃取法分離得到地錦草9個分離部位，根據NCCLS推薦的M38-A方案，測定地錦草不同分離部位對臨床常見皮膚癬菌的MIC值。結果提示，地錦草20%及40%乙醇洗脫部位及正丁醇部位抗真菌作用較強［12-13］。上述研究結果提示，地錦草提取物及其有效部位具有顯著的抗真菌活性，且對紅色毛癬菌和石膏樣毛癬菌最敏感。

2.2 地錦草及其復方對真菌超微結構的影響

2.2.1 地錦草復方對真菌超微結構的影響 鄧淑文等［14-15］利用掃描電鏡(scanning electron micrograph，SEM)和透射電鏡(transmission electron micrograph，TEM)研究百癬夏塔熱對紅色毛癬菌和石膏樣毛癬菌超微結構的影響。結果表明百癬夏塔熱(256μg·mL-1)作用真菌后可破壞真菌細胞膜和細胞壁的結構。

2.2.2 地錦草提取物及有效部位對真菌超微結構的影響 文獻報道在SEM和TEM下觀察地錦草提取物及其有效部位作用后對真菌細胞表面形態結構與細胞內超微結構的影響。結果表明地錦草提取物(256μg·mL-1)、地錦草有效部位(149 μg·mL-1)可使真菌細胞壁、細胞膜出現多處破裂，胞內細胞器損傷嚴重。提示地錦草可使其皮膚癬菌形態和超微結構發生明顯的改變［16-17］。

2.3 地錦草及其復方對真菌細胞膜麥角甾醇生物合成的影響

2.3.1 地錦草復方對真菌細胞膜麥角甾醇生物合成的影響 鄧淑文等［18］采用氣相色譜-質譜 (gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS)法研究了百癬夏塔熱對皮膚癬菌細胞膜中麥角甾醇含量的影響。結果表明，百癬夏塔熱(256μg·mL-1)處理后紅色毛癬菌中麥角甾醇含量比空白減少35.11%。

2.3.2 地錦草提取物及有效部位對真菌細胞膜麥角甾醇生物合成的影響 角鯊烯環氧化酶是真菌細胞膜麥角甾醇合成通路上一個重要的酶，古力娜·達吾提等［19］采用酶聯免疫吸附試驗(enzyme-linked Immunosorbent assay，ELISA)探討了地錦草提取物對紅色毛癬菌角鯊烯環氧化酶的影響。結果地錦草提取物(256μg·mL-1)可顯著降低紅色毛癬菌中角鯊烯環氧化酶的活性(P＜0.01)。提示地錦草提取物抗真菌機制可能與抑制角鯊烯環氧化酶的活性有關。李治建等［20］采用高效液相色譜法和GC-MS技術研究地錦草提取物對真菌細胞膜麥角甾醇生物合成的影響。結果表明地錦草提取物(64μg·mL-1)可使紅色毛癬菌細胞膜中麥角甾醇的含量顯著降低(P＜0.01)，并且有明顯的劑量依賴性。安惠霞等［17］采用高效液相色譜法研究地錦草有效部位對真菌細胞膜麥角甾醇生物合成的影響。結果紅色毛癬菌中細胞膜中麥角甾醇含量與其生長對照菌相比，含量降低，差異有統計學意義，并且有明顯的劑量依賴性。上述研究表明，地錦草抗真菌作用機制與影響真菌細胞膜麥角甾醇的生物合成通路有關。

2.4 地錦草及其復方對真菌細胞壁酶活性的影響安惠霞等［21］采用熒光分光光度法，研究地錦草乙醇提取物(256 μg·mL-1)對紅色毛癬菌 β-(1，3)-D-葡聚糖合成酶活性的作用。地錦草提取物可降低紅色毛癬菌β-(1，3)-D-葡聚糖合成酶的活性(P＜0.01)。提示地錦草提取物抗真菌機制可能與抑制β-(1，3)-D-葡聚糖合成酶的活性有關。古力娜·達吾提等［22］采用吩嗪硫酸甲酯 (phenazine methosulfate，PMS)反應法，測定地錦草有效部位對紅色毛癬菌琥珀酸脫氫酶活性的影響。結果地錦草有效部位(32μg·mL-1)可降低毛癬菌琥珀酸脫氫酶活性(P＜0.01)。

3 討論

地錦草含有黃酮類、三萜類、香豆素類、甾醇類、鞣質及酚酸類等化合物，其中黃酮類化合物具有顯著的抗真菌作用，而其他類化合物是否具有抗真菌作用筆者未見報道。自然界中其他植物的黃酮類、甾體類、三萜類、鞣質類及酚酸類化合物的抗真菌作用均有報道［23-25］。因此，地錦草中三萜類、甾體類、鞣質類及酚酸類化合物是否具有抗真菌活性值得深入探討。

地錦草提取物及地錦草有效部位均有顯著的抗真菌作用，其抗真菌作用機制與影響真菌細胞膜麥角甾醇生物合成通路有關。然而，地錦草有效部位中抗真菌作用的物質基礎還不清楚，因此，對地錦草有效部位進行系統的化學成分研究十分必要，而且地錦草藥用價值較高，具有廣闊的應用前景。目前國際上在藥物開發方面以研究單體成分為主流，因此，對地錦草中化學成分的分離以及各成分的抗真菌作用值得人們進一步深入研究，為從中尋找新型抗真菌先導化合物提供線索，為開發全新的抗真菌藥物打下堅實的物質基礎。

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