GC 法測定香茅中香葉醇的含量

陳妙芬，馮靜儀，劉秋瓊，林秋曉，肖志杏（.廣東省人民醫院藥學部/廣東省醫學科學院，廣州市50080；.南方醫科大學，廣州市 5005）

香茅Cymbopogon citratus（DC.）Strapf為多年生禾本科植物，別名大風茅、檸檬茅、檸檬草、茅草茶、姜巴茅、姜草、香巴茅、香茅草、風茅草、姜巴草。它廣泛種植于全世界的熱帶地區，在我國南方地區作為經濟作物栽培。從其葉中提取的香茅油是重要的香料原料，也可作藥用，具有抗菌[1]、抗炎、降壓[2]、免疫調節和腫瘤抑制作用[3]。

香茅揮發油的成分隨香茅具體品種不同而不同。程必強等[4]對西雙版納熱帶植物園中種植的6種香茅屬植物精油成分進行了分析，從亞香茅中分到38種化合物，主含香茅醛（36.055%）、香葉醇（21.33%）；從爪哇香茅中分到30種化合物，主含香茅醛（25.75%）、香葉醇（19.01%）、欖香樹脂（10.64%）。陳集雙等[5]對香茅葉揮發油成分進行分析，其主要成分是香葉醛和橙花醛，其次是β-香葉烯、香葉醇、乙酸香葉酯、香葉酸等。可見，香葉醇是香茅油的主要成分，可作為其質量控制的重要指標，故本試驗通過氣相色譜（GC）法測定香茅中香葉醇的含量。

1 儀器與試藥

SHIMADZU-2010型GC儀、氫火焰離子化檢測器（FID）、色譜工作站（日本島津公司）；gh-300c氫氣發生器（北京中興匯利科技發展有限公司）；QL型純凈空氣泵（濟南應用化工科技開發有限公司）；KH-500型超聲波清洗器（昆山市禾創超聲儀器有限公司）；CP2245電子天平（德國Sartorius公司）。

高純度氮氣（廣州氣體廠，含量≥99.999%，壓力（20℃）≥13.6 MPa）；乙醇（分析純，廣州化學試劑廠）；香茅藥材采自廣州從化，由廣東省藥品檢驗所林惠容主任中藥師鑒定為香茅C.citratus（DC.）Strapf，存放于廣東省藥品檢驗所，編號為01、02、03、04、05、06）；香葉醇對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：111643-200301）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent Technologies DB-WAX（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；固定相：聚乙二醇（PEG-20M），涂布質量濃度：20%；柱溫：130℃；檢測器：FID；進樣口溫度：230℃；檢測器溫度：250℃；分流進樣，分流比：20∶1；程序升溫：初始80℃，保持2 min，以7℃·min-1升至200℃，保持5 min；載氣：氮氣，流量為1.0 mL·min-1；燃氣：氫氣，流量為40 mL·min-1；助燃氣：空氣，流量為400 mL·min-1。色譜見圖1。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取香葉醇對照品適量，加乙醇制成每1 mL含0.015 3 mg的對照品溶液，搖勻，即得。

圖1 氣相色譜圖Fig 1 GC chromatograms

2.3 供試品溶液的制備

精密稱取香茅樣品粗粉5 g，置具塞三角燒瓶中，精密加入25 mL乙醇，稱重，超聲振蕩（頻率：40 kHz，功率：500 W）20 min后再稱重，用乙醇補足失重，過濾，取續濾液作為供試品溶液。

2.4 線性關系考察

精密吸取對照品溶液1、2、3、4、5、6、7 μL，按上述色譜條件分別進樣，測定峰面積。以濃度（X）為橫坐標，峰面積積分值（Y）為縱坐標，進行線性回歸，得回歸方程為Y＝2 129.2X+1 091（r＝0.997 3，n＝7）。結果表明，香葉醇進樣量在0.015 3～0.107 1μg范圍內與峰面積積分值呈良好的線性關系。

2.5 精密度試驗

精密吸取對照品溶液5μL，重復進樣6次，測定峰面積。結果，RSD＝0.83%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.6 穩定性試驗

取同一批供試品溶液適量，連續在0、1、2、4、8、12、24 h分別進樣，考察其穩定性。結果，香葉醇峰面積的RSD＝1.4%（n＝7），表明供試品溶液在24 h內穩定。

2.7 重復性試驗

精密稱取香茅樣品粗粉適量，共6份，分別按“2.3”項下方法制成供試品溶液，按上述色譜條件測定峰面積。結果，RSD＝1.55%（n＝6），表明方法重復性良好。

2.8 加樣回收率試驗

取已知香葉醇含量（0.037 6%）的樣品6份，每份約2.5 g，精密稱定，分別添加已知濃度的香葉醇對照品溶液（0.945 mg·mL-1）1 mL，按“2.3”項下方法制成供試品溶液，按上述色譜條件測定，計算加樣回收率，結果見表1。

2.9 樣品含量測定

取6批香茅樣品各適量，分別按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按上述色譜條件測定樣品中香草醇的含量，結果見表2。

表1 加樣回收率試驗結果（n＝6）Tab 1Results of recovery test（n＝6）

表2 樣品含量測定結果（n＝3）Tab 2Results of content determination of samples（n＝3）

3 討論

筆者曾考察超聲時間對提取效果的影響。精密稱取香茅樣品3份，每份5 g，置具塞三角燒瓶中，精密加入25 mL乙醇，稱重，分別超聲10、20、30 min進行提取后再稱重，補充溶媒至原重量，搖勻，過濾，取續濾液，按上述色譜條件進行測定，結果見表3。

表3 超聲時間對提取結果的影響Tab 3 Effect of ultrasonic time on the results of extraction

由表3可知，超聲提取20、30 min的提取效果較超聲10 min的效果更好，而超聲20 min與30 min的提取效果無顯著性差異，故選擇超聲提取20 min為較佳方案。

綜上，本方法簡便、快速、準確、重復性好，可用于香茅的質量控制。

[1] 楊森艷，姚 雷.檸檬草精油抗菌性研究[J].上海交通大學學報（農業科學版），2005，23（4）：374.

[2] 廉曉紅，李德山，竇玉琴，等.香茅草提取物的免疫調節作用與腫瘤抑制作用[J].沈陽藥科大學學報，2005，22（4）：295.

[3] 劉昌孝.香茅葉的藥理研究[J].國外醫藥·植物藥分冊，1989，1：29.

[4] 程必強，許 勇，喻學儉，等.六種香茅屬植物資源及精油成分[J].香料香精化妝品，1994，3：6.

[5] 陳集雙，彭崇勝，杜琪珍，等.香茅葉揮發油化學成分的研究[J].中國藥學雜志，2000，35（7）：462.