泰山沙棘果抗炎鎮(zhèn)痛及耐缺氧抗疲勞作用研究

張 穎，張立木，李同德，彭吉星，崔萌納

(1.泰山醫(yī)學(xué)院動(dòng)脈粥樣硬化研究所，山東泰安271016;2.泰安市第一人民醫(yī)院，山東泰安271000)

泰山沙棘果抗炎鎮(zhèn)痛及耐缺氧抗疲勞作用研究

張 穎1，張立木2，李同德1，彭吉星1，崔萌納1

(1.泰山醫(yī)學(xué)院動(dòng)脈粥樣硬化研究所，山東泰安271016;2.泰安市第一人民醫(yī)院，山東泰安271000)

目的:研究沙棘果的抗炎鎮(zhèn)痛及耐缺氧抗疲勞作用。方法:二甲苯法和扭體法研究抗炎鎮(zhèn)痛作用，游泳實(shí)驗(yàn)和耐缺氧實(shí)驗(yàn)研究抗疲勞及耐缺氧作用。結(jié)果:沙棘果提取物具有顯著鎮(zhèn)痛作用(p＜0.01)，水提物較醇提物效果明顯，沙棘果醇提物有抗炎作用(p＜0.05)，而水提物作用不明顯;沙棘果提取物能增強(qiáng)小鼠的抗疲勞能力和耐缺氧能力(p＜0.05)。結(jié)論:沙棘果具有鎮(zhèn)痛抗炎作用及增強(qiáng)小鼠耐缺氧能力和抗疲勞能力，且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。

泰山沙棘果，抗炎，鎮(zhèn)痛，耐缺氧，抗疲勞

表1 沙棘果對冰醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響(n=8s)

表1 沙棘果對冰醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響(n=8s)

注:與空白對照組比較:*p＜0.05;＊＊p＜0.01。表2～表4同。

30min 30min空白對照 0.9%生理鹽水 4.8±1.9 34.4±2.2組別 劑量(mg/kg) 潛伏期(min) 扭體次數(shù) 抑制率(%)—吲哚美辛 12.5 15.5±0.5 11.4±1.4＊＊ 66.86 1500 4.2±2.0 17.8±1.6＊＊ 48.26沙棘果醇提物 1000 3.2±1.2 23.4±2.9* 31.98 500 4.8±0.8 29.5±2.5 14.24 1500 7.0±1.7 15.5±1.9＊＊ 54.94沙棘果水提物 1000 6.0±0.7 21.5±2.5* 37.39 500 6.0±0.8 25.3±1.9 26.45

表2 沙棘果對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響(n=8s)

表2 沙棘果對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響(n=8s)

組別 劑量(mg/kg) 右耳重量(mg) 左耳重量(mg) 耳腫脹度(%)空白對照 0.9%生理鹽水20.55±1.58 10.37±0.86 98.98吲哚美辛 12.5 17.25±2.25* 10.60±0.90 62.10* 1500 18.08±3.11* 10.98±1.79 68.26*沙棘果醇提物 1000 19.08±1.75 10.58±1.19 81.90 500 20.58±12.92 11.06±3.13 96.00 1500 23.22±2.92 9.93±0.66 133.10沙棘果水提物 1000 23.19±2.46 11.30±1.05 107.40 500 21.67±2.32 10.92±1.04 100.70

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

沙棘果 2008年11月采集于泰山，經(jīng)中藥學(xué)專家鑒定;吲哚美辛腸溶片 批號080701，臨汾寶珠制藥有限公司;冰乙酸、二甲苯 均為分析純;健康昆明種小鼠 泰山醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，雌雄兼半，體重20～28g，小鼠分籠飼養(yǎng)，在實(shí)驗(yàn)環(huán)境下適應(yīng)1周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

粉碎機(jī) FW117型，天津泰斯特儀器有限公司;電子天平 MP300D，上海恒平科學(xué)儀器有限公司;電恒溫水浴鍋 北京市長風(fēng)儀器儀表公司;循環(huán)水式多用真空泵 鄭州長城科工貿(mào)有限公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 RE-52A，上海亞榮生化儀器廠;分析天平AR-2140，上海奧豪斯公司;小鼠耐缺氧石灰瓶 泰山醫(yī)學(xué)院研制;小鼠恒溫游泳池 安徽省淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 提取物的制備 將干燥無雜質(zhì)的沙棘果粉碎，揀除果柄，粗粉過20目篩，將所得粉末稱重后冷藏。

稱取沙棘果粉末282g，按1∶6(W∶V)于70%乙醇浸泡24h。于80℃條件下回流提取3次(1.5h/次)，濾液濃縮得浸膏。稱取沙棘果粉末280g，按1∶6(W∶V)加蒸餾水浸泡24h。煎煮提取3次(2h/次)，濾液濃縮得浸膏。

1.2.2 溶液配制 稱取沙棘果提取物適量，0.9%NS配制溶液，按1500、1000、500mg·kg-1給藥。稱取吲哚美辛適量，0.9%NS配制成陽性對照溶液，按12.5mg·kg-1給藥。

1.2.3 鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)［4］選取健康昆明種小鼠，稱重，隨機(jī)分為空白對照組、吲哚美辛組、沙棘果提取物高、中、低劑量組(水提物、醇提物)，共8組(8只/組)，連續(xù)灌胃5d(1次/d，0.15mL·10g-1)。末次給藥1.5h后，小鼠均腹腔注射0.6%冰醋酸(0.2mL/只)，記錄小鼠扭體反應(yīng)潛伏期和30min內(nèi)扭體次數(shù)，計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。鎮(zhèn)痛百分率(%)=(空白對照組扭體次數(shù)-給藥組扭體次數(shù))/空白對照組扭體次數(shù)×100%

1.2.4 抗炎實(shí)驗(yàn)［5］動(dòng)物分組與給藥見1.2.3。末次給藥1.5h后，將0.05mL二甲苯涂于小鼠右耳廓前后兩面致炎，左耳廓作為對照。致炎30min后處死小鼠，用9號打孔器打取左右耳相同部位耳片稱重，以右耳重量減左耳重之差比左耳重量作為右耳炎癥腫脹度。

1.2.5 耐缺氧實(shí)驗(yàn)［6］動(dòng)物分組與給藥見1.2.3。連續(xù)給藥14d(1次/d)，末次給藥2h后，將小鼠分別置于裝有鈉石灰的耐缺氧瓶中，加蓋密封后，記錄其存活時(shí)間，以呼吸停止時(shí)間為死亡指標(biāo)。

1.2.6 抗疲勞實(shí)驗(yàn)［7］動(dòng)物分組與給藥見1.2.3。連續(xù)給藥14d(1次/d)，末次給藥2h后，在小鼠尾部系上其體重5%的鉛絲，放入恒溫游泳箱游泳，水深30cm，水溫30℃左右，以小鼠頭部全部入水持續(xù)8s為判定終點(diǎn)，記錄游泳衰竭時(shí)間。

1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 SPSS軟件統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示。組間差異用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 扭體反應(yīng)的影響

與空白組比較，沙棘果提取物能減少小鼠扭體次數(shù)，皆呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。特別是高劑量組效果顯著(p＜0.01)。即沙棘果具有鎮(zhèn)痛作用，且水提物效果略優(yōu)于醇提物，結(jié)果見表1。

2.2 對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

與空白組比較，沙棘果醇提取物能明顯減輕二甲苯致小鼠耳廓腫脹(p＜0.05)，且隨劑量的增加，效果增強(qiáng)，而水提物組作用不明顯。見表2。

2.3 對小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間的影響

與空白組比較，沙棘果提取物能提高小鼠耐缺氧能力，延長小鼠存活時(shí)間(p＜0.05)，呈劑量-效應(yīng)關(guān)系，水提物較醇提物效果顯著，結(jié)果見表3。

表3 沙棘果對小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間的影響(n=8s)

表3 沙棘果對小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間的影響(n=8s)

組別 劑量(mg/kg) 常壓耐缺氧存活時(shí)間(min) 21.38±2.33 1500 36.06±4.25*沙棘果醇提物 1000 32.51±2.66* 500 27.72±3.86 1500 36.82±2.47*沙棘果水提物 1000 32.36±2.79* 500 30.69±4.74*空白對照 0.9%生理鹽水

2.4 對小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響

與空白對照組比較，沙棘果水提物與醇提取物高、中、低劑量均可以提高小鼠負(fù)重游泳能力，延長小鼠的負(fù)重游泳時(shí)間，且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系，但醇提物效果顯著(p＜0.05)，見表4。

表4 沙棘果對小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響(n=8s)

表4 沙棘果對小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響(n=8s)

組別 劑量(mg/kg) 負(fù)重游泳時(shí)間(min) 5.18±1.58 1500 10.84±5.4*沙棘果醇提物 1000 9.26±1.69* 500 7.07±1.61* 1500 7.49±3.26沙棘果水提物 1000 5.55±1.76空白對照 0.9%生理鹽水500 5.18±0.89

3 結(jié)論

與空白對照組比較，沙棘果醇和水提取物明顯減少小鼠扭體次數(shù)(p＜0.01)，能顯著抑制二甲苯致小鼠耳腫脹的炎癥反應(yīng)(p＜0.05)，而且其抑制作用隨劑量增加越明顯。即沙棘果具有抗炎鎮(zhèn)痛作用。沙棘果提取物能提高小鼠耐缺氧能力和負(fù)重游泳能力，延長小鼠存活時(shí)間和負(fù)重游泳時(shí)間，而且隨劑量的增加效果越明顯。該實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)將為進(jìn)一步研究沙棘果的藥效作用和藥效成分提供參考，同時(shí)為該藥的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

［l］劉文東.沙棘的綜合利用與產(chǎn)業(yè)化發(fā)展趨勢［J］.黑龍江農(nóng)業(yè)科技，2007(3):120-121.

［2］王養(yǎng)正，王紅英，孟恒，等.沙棘果油與沙棘籽油的鎮(zhèn)痛作用及其對體外抑菌實(shí)驗(yàn)的影響［J］.沙棘，2008，2(1):4-5.

［3］包文芳，李銳，張群林，等.沙棘屬植物藥理作用進(jìn)展［J］.沙棘，2007，20(4):27-28.

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［5］趙曉亞，向明，張勇慧，等.冷水七活性部位鎮(zhèn)痛抗炎作用的研究［J］.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2005，24(1):10-12.

［6］陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1994:71-72.

［7］趙光.蜂王漿對小鼠力竭運(yùn)動(dòng)能力的影響［J］.體育學(xué)刊，2001，10(3):33-35.

Study on the anti-inflammatory effect，analgesic，anti-fatigue and hypoxia tolerance of Taishan Hippophae Rhamnoides fruits

ZHANG Ying1，ZHANG Li-mu2，LI Tong-de1，PENG Ji-xing1，CUI Meng-na1
(1.Institute for Arterosclerosis in Taishan Medical College，Taian 271016，China; 2.Medicamental Department of Taian People Hospital，Taian 271000，China)

Objective:To study the anti-inflammatory and analgesic effect of extract of Hippophae Rhamnoides fruit and the effect on anti-hypoxia and anti-fatigue in mice.Methods:The rat ear edema induced by dimethyl benzene and writhing in rats to study anti-inflammation effect and analgesic effect，the hypoxia bearing was observed in experimental mice and the swimming test to study the anti-fatigue effect.Results:The extract of the Hippophae Rhamnoides fruit had analgesic effect(p＜0.01)，and water extract was better than the alcohol extract，the alcohol extract had anti-fatigue effect(p＜0.05)and water extract hadn’t the effect，the extract of the Hippophae Rhamnoides fruit had hypoxia tolerance and anti-fatigue effect.Conclusion:The Hippophae Rhamnoides fruit had remarkable anti-inflammatory effect，analgesic，anti-fatigue and hypoxia tolerance effect，and it had dosagedomino effect.

Taishan Hippophae Rhamnoides fruits;anti-inflammation;analgesic effect;hypoxia tolerance;anti -fatigue

TS201.4

A

1002-0306(2011)03-0377-03

沙棘(Hippophae Rhamnoides.L)，俗稱醋柳，酸刺，胡頹子科(Elaeagnaceae)沙棘屬(Hippohae)落葉灌木或小喬木，果實(shí)為沙棘果，呈類球形或扁球形，秋冬二季果實(shí)成熟時(shí)或凍硬時(shí)采收，性溫，味酸、澀，歸肝、胃、大腸、小腸經(jīng)。具止咳祛痰、消食化滯、活血散瘀，用于咳嗽痰多，飲食不消等癥［1］。另有文獻(xiàn)［2-3］報(bào)道，沙棘果油及沙棘籽油有抗炎鎮(zhèn)痛和耐缺氧抗疲勞作用。現(xiàn)對泰山沙棘果醇提物和水提物的上述藥理作用進(jìn)行分析比較。

2009-10-22

張穎(1972-)，女，副教授，碩士，主要從事天然藥物化學(xué)教學(xué)與實(shí)驗(yàn)研究。

泰山醫(yī)學(xué)院基金項(xiàng)目(ZR2008048)。