急性胰腺炎患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP測定的臨床意義

鄭彩麗

（嘉峪關市疾病預防控制中心，甘肅嘉峪關 735100）

急性胰腺炎患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP測定的臨床意義

鄭彩麗

（嘉峪關市疾病預防控制中心，甘肅嘉峪關 735100）

目的探討急性胰腺炎（AP）時血清腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細胞介素6（IL-6）、一氧化氮（NO）、C-反應蛋白（CRP）測定的臨床意義。方法將43例AP患者，分為輕癥AP（MAP）組、重癥AP（SAP）組，發病后1、2、3、5、7 d分別抽取外周靜脈血檢測，并于發病后1 d取同期健康體檢者36例（對照組）血樣測定作為對照。用ELISA法、ABC-HRP法、化學法、比濁免疫法分別測定上述血清因子。結果上述因子在AP發病早期持續升高，MAP組TNF-α、IL-6、NO、CRP水平高于對照組，有顯著性差異（P＜0．05）；SAP組明顯高于MAP組，有非常顯著性差異（P＜0．01）。結論TNF-α、IL-6、NO、CRP測定可作為AP病情嚴重程度及判斷預后的指標，動態測定更具有重要的臨床意義。

急性胰腺炎；細胞因子；炎性介質

急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）是消化系統的一種常見急癥，是由多種病因引起的胰酶激活，繼以胰腺局部炎癥反應為主要特征，伴或不伴有其他器官功能改變的疾病。在臨床上可表現為輕至重型，輕型預后良好，多數屬自限性，約15%～30%發展成為重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）而危及生命，總體死亡率為10%～30%[1]。至今，急性胰腺炎發病機制仍未完全闡明。長期以來，胰腺炎一直被認為是各種因素致消化酶在胰腺內活化及消化酶的高分泌導致胰腺自身消化所致（自身消化學說），近年比較公認的四大機制是胰腺胰酶自身消化、胰腺血循環障礙、腸道細菌移居胰腺組織和白細胞過度激活學說。特別是1998年Rindernecht提出了AP的“白細胞過度激活學說”，認為在AP尤其是SAP期間，某些炎癥細胞及被破壞的胰腺組織釋放多種炎性介質、細胞因子，如氧自由基、血小板活化因子、前列腺素、白三烯、一氧化氮（NO）、腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細胞介素等，導致全身炎癥反應綜合征及多器官功能衰竭，是患者死亡主要原因。炎性因子的產生及其級聯瀑布效應（cascade teaction），使得胰腺局限性炎癥反應發展為威脅生命的SAP越來越受到關注。C-反應蛋白（CRP）是肝臟合成的一種炎癥因子,在各種炎癥狀態下其血清含量迅速升高,且與炎癥的程度相關。它能反映不同應激狀態如組織創傷、缺血、炎癥、感染和惡性疾病嚴重程度，也能在一定程度上反映AP的嚴重程度。本研究通過觀察AP血清TNF-α、白細胞介素6（IL-6）、NO、CRP水平及動態變化規律,從而探討其可能的作用機制和臨床意義。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

2002年11月至2004年12月，共收集AP患者43例,其中輕癥AP（MAP）32例,男性20例、女性12例，年齡20～72歲，平均44.6歲；重癥AP（SAP）11例，男性7例、女性4例，年齡24～75歲，平均48.5歲。所有病例按1997年全國胰腺外科學術會議診斷標準[2]，均經臨床癥狀，體征，血、尿淀粉酶，血生化等實驗室檢查及影像學診斷證實。對照組36例，男21，例、女15例，年齡21～74歲，平均43.7歲,系同期健康體檢者。

1.2 實驗方法

所有病例在發病后1、2、3、5、7 d抽取外周靜脈血，分離血清后檢測血清TNF-α、IL-6、NO、CRP水平,并于發病后1 d取同期健康體檢者36例血樣測定作為對照。TNF-α采用芬蘭產Labsystems WellscanMK3酶標儀、DragonMK2洗板機，ELISA法測定，試劑由法國制造；IL-6采用芬蘭產Labsystems Wellscan-MK3酶標儀、DragonMK2洗板機，ABC-HRP法測定法，試劑由上海西寶生物科技有限公司生產；NO采用日本產東芝120全自動生化分析儀，化學法測定，試劑由長春匯力生物工程技術開發中心生產；CRP采用日本產東芝120全自動生化分析儀，比濁免疫測定法測定，試劑由上海復星長征醫學科學有限公司生產。所有檢測嚴格按說明書和操作規程進行。

2 結果

發病后1 d MAP患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP水平高于對照組，有顯著性差異（P＜0.05），而SAP患者又明顯高于MAP患者,有非常顯著性差異（P＜0.01），見表1。動態測定可見TNF-α高峰出現在發病后1 d，IL-6、NO高峰出現在發病后1～2 d，CRP高峰出現在發病后2～3 d，SAP組上述因子明顯高于MAP組，有非常顯著性差異（P＜0.01），見表2。

表1 發病后1 d AP患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP水平測定（）

表1 發病后1 d AP患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP水平測定（）

注：與對照組比較，*P＜0．05；與MAP組比較，**P＜0．01

分組n TNF-αIL-6NOCRP（ng/ml）（pg/ml）（umol/L）（mg/L）對照組MAP組SAP組36 32 11 1．05±0．24 1．25±0．37* 3．03±1．07** 7．83±3．17 10．67±4．88* 30．11±15．03** 78．56±36．14 98．13±42．65* 160．74±53．28** 7．71±3．12 10．13±4．83* 118．47±20．95**

3 討論

AP時由于細菌、內毒素、炎癥等的刺激,激活體內巨噬細胞及T細胞等,釋放TNF-α、IL-6、NO等細胞因子和炎性介質，并進而通過“扳機樣作用”，觸發炎性介質“瀑布樣級聯反應”，對胰腺及其他重要臟器，如心、肺、腎組織及細胞造成毒性損害，使AP病情加重,嚴重者可并發多器官功能障礙綜合征（MODS）。本研究通過觀察AP患者TNF-α、IL-6、NO、CRP的動態變化表明，在AP早期明顯升高，MAP與對照組相比有顯著性差異（P＜0.05），SAP與MAP相比有非常顯著性差異（P＜0.01）。TNF-α是由單核細胞、巨噬細胞等產生的細胞因子,是AP最早升高的細胞因子，對AP發病起重要作用。它具有重要的炎癥、免疫反應調節功能，可促使PLA2活化，促使二十碳烯酸的分解代謝。炎性介質的釋放，使白細胞浸潤，紅細胞滲出，活化中性粒細胞，導致AP和內毒素的產生；可直接作用于胰腺血管內皮，導致局部出血壞死和DIC，同時能增加肺血管通透性，使肺間質水腫，促使ARDS的產生[3]。TNF-α作為單核巨噬細胞分泌的遞質之一，是感染過程中機體病理、生理改變的重要調節因子，適量時可發揮免疫調節功能，具有抗腫瘤、抗病毒及抗感染作用，但當TNF-α分泌過多或調節失控時則會引起機體膿毒血癥、感染性休克，且TNF-α的持續存在可進一步增加白細胞脫顆粒，產生氧自由基和白細胞醇等，進而引起白細胞代謝紊亂及MODS。本實驗結果表明，AP患者TNF-α在早期明顯升高，且在MAP和SAP之間有顯著性差異。實驗發現，TNF-α在疾病早期含量即開始升高，1 d達峰值，以后開始下降，說明TNF-α是SAP早期一種重要的炎癥遞質，在SAP早期參與了胰腺炎的發生、發展過程，并與病情的嚴重程度和死亡率密切相關，第一天血清TNF-α水平與患者的不良預后成正相關。本實驗結果證實，IL-6在AP病程中顯著升高且SAP尤甚,與國內外的研究結果相似[4]。IL-6系由單核巨噬細胞及T細胞產生的重要細胞因子,參與免疫、代謝和炎癥急性期反應。IL-6在AP早期就升高,在入院后1～2 d達到峰值，能反映胰腺損害程度。IL-6先于CRP 24～36 h升高，它可促進CRP的合成。更重要的是，血清IL-6水平在MAP、SAP中顯著不同，提示它對于區分MAP、SAP具有重要的臨床診斷價值。IL-6水平與AP的嚴重程度及持續時間直接相關,被認為是引起局部胰腺和全身器官損傷的重要促炎細胞因子,其機制可能與IL-6改變細胞內G蛋白活性并參與中性粒細胞功能上調有關。本組資料顯示,血清NO水平，MAP組較對照組升高,SAP組較MAP組顯著升高,在發病1～2 d達到高峰，有顯著性差異。NO對AP具有一定的保護作用,其機制主要系NO作為內源性舒血管因子,調節胰腺血流灌注，改善胰腺微循環。但NO作為一種自由基，過量產生后會導致直接抑制靶細胞的氧化呼吸；與銅鐵蛋白或其他氧自由基作用，產生過氧硝酸鹽；損害血管內皮,降低血管對縮血管物質的反應,致難治性休克；抑制環氧化酶活性,降低血中PGI2/TXA2比值；誘導炎癥細胞產生TNF-α等,增強血管通透性和炎癥反應[5]。CRP作為非特異性炎癥急性時相蛋白,是細菌感染和壞死的突出指標,在炎癥早期即急劇升高達峰值,并與炎癥的嚴重程度、范圍有一定的平行性。本實驗結果顯示，AP發病期間CRP的高低與其病情的嚴重程度密切相關,CRP峰值出現的時間在疾病發作后的2～3 d，重癥胰腺炎CRP值大于100 mg/L，而輕癥胰腺炎CRP值小于50 mg/L。對CRP進行定量分析還有助于早期發現腹腔內的感染并發癥,有助于指導治療及判斷預后[6]。因此,檢測血清中TNF-α、IL-6、NO、CRP水平可作為判斷AP病情嚴重程度和預后的輔助指標,并可能為細胞因子和炎性介質拮抗劑等免疫干預治療提供依據。

表2 在AP病程中患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP變化（）

表2 在AP病程中患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP變化（）

注：與MAP組比較，*P＜0．01

時間（d）MAP組SAP組2357 18．63±8．22 16．62±7．20 10．97±5．61 3．00±1．82 TNF-α（ng/ml）IL-6（pg/ml）NO（μmol/L）CRP（mg/l）TNF-α（ng/ml）IL-6（pg/ml）NO（μmol/L）CRP（mg/L）1．14±0．32 0．83±0．25 0．78±0．24 0．55±0．14 102．70±25．10 90．13±23．95 78．47±12．83 57．57±9．33 23．54±5．13 32．74±8．28 18．57±4．12 7．74±3．28 2．97±1．02* 2．82±0．97* 1．18±0．79 1．03±0．60 35．55±12．32* 26．60±10．21* 15．92±7．40* 5．05±3．97 169．33±54．14* 138．13±32．20* 108．56±26．10* 78．25±12．33 146．70±31．10* 172．13±40．95* 128．47±28．83* 110．70±16．12*

本研究通過觀察AP患者細胞因子TNF-α、IL-6和炎性介質NO變化的結果表明，AP早期時明顯升高，SAP時升高更為顯著。本實驗結果表明，AP患者TNF-α在早期明顯升高，發病后1 d達到峰值，以后開始下降，第一天血清TNF-α水平與所有患者的不良預后成正相關，說明TNF-α是SAP早期一種重要的炎癥遞質，且在MAP和SAP之間有顯著性差異。本實驗結果證實了IL-6在AP病程中明顯升高且SAP尤甚,與國內外的研究結果相似。IL-6在AP早期就升高,在發病后1～2 d達到峰值，能反映胰腺損害程度。本次研究也顯示，血清NO水平，MAP組較對照組升高，而SAP組較MAP組明顯升高，有顯著性差異，其高峰時間與IL-6相似。本組測定發現，AP時CRP升高，其高峰出現在發病后2～3 d，以SAP時升高特別明顯，SAP時CRP值大于100 mg/L，而MAP時CRP值小于50 mg/L，有非常顯著性差異。

4 結論

檢測血清中TNF-α、IL-6、NO、CRP水平可作為判斷AP患者病情嚴重程度和預后的輔助指標,并可能為細胞因子和炎性介質拮抗劑等免疫干預治療提供依據，具有重要的臨床意義。

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R657．5+1

B

1671-1246（2011）13-0151-02