通腑湯對急性肺損傷大鼠腸組織SP的影響

劉建秋 李竹英 王 玨 郅扶旻 隋博文 劉曉東 王雪慧

黑龍江中醫藥大學附屬第一醫院，黑龍江 哈爾濱 150040

急性肺損傷 (ALI)是指各種直接和間接嚴重肺內、外致病因素導致的急性進行性呼吸衰竭。其最終嚴重階段被定義為急性呼吸窘迫綜合征 (ARDS)。ALI當屬中醫學“暴喘”、“上氣”等范疇。本實驗將通過ALI大鼠模型腸組織SP含量的變化，探討通腑湯對ALI的作用機制。同時，也為“肺與大腸相表里”提供有力的實驗依據。

1 實驗資料

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 清潔級Wistar大鼠180只，購自哈爾濱醫科大學第二附屬醫院實驗動物中心，體重：200～250g。

1.1.2 主要試劑及藥品

(1)雙抗體夾心酶聯免疫吸附 (ELISA)法大鼠SP試劑盒; (2)凍干精制大腸桿菌內毒素脂多糖 (LPS)L2880;(3)通腑湯：大黃、枳實、厚樸、杏仁、黃芩等組成。由筆者所在醫院藥劑科提供;(4)地塞米松磷酸鈉注射液;(5)0.9%生理鹽水。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗動物分組 將180只實驗大鼠隨機分為正常對照組、模型組、地塞米松組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組6組，30只/組。

1.2.2 動物模型的建立 將LPS用蒸餾水配成1mg/ml的溶液，正常對照組大鼠尾靜脈注射生理鹽水 (2.5ml/kg)作為空白組。其余各組大鼠尾靜脈注射LPS溶液 (2.5ml/kg)復制ALI模型。

1.2.3 實驗動物給藥 造模后0.5h正常對照組、模型組用生理鹽水1ml/100g灌胃治療，其余各組分別予以各自藥物1ml/100g灌胃治療。本實驗大鼠給藥劑量是6.5g/kg。為方便灌胃，將藥物配成濃度分別為0.325g/ml、0.65g/ml、1.3g/ml的低、中、高濃度溶液。

1.2.4 實驗動物標本采集及檢測指標 制備腸組織勻漿，取大腸 (回腸末端1cm腸段)組織，備用組織勻漿，ELISA法測定組織中SP(操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行)。

1.3 統計學處理 實驗數據采用統計軟件SPSS13.0進行統計處理，數據用均數±標準差 (±S)表示，組間比較用t檢驗，多組間比較用單因素方差分析。P＜0.05有統計學意義。

表1 各時間點大鼠腸組織中SP含量 (pg/ml)(±S)

2 實驗結果

從表1可以看出：模型組腸組織SP含量在前6h內隨時間的延長而降低。模型組SP含量低于正常對照組，有統計學意義 (P＜0.05)，說明實驗造模是成功的。地塞米松、中藥各劑量治療均有效。中藥低劑量組SP含量低于地塞米松組，說明中藥低劑量療效不如地塞米松。中藥中劑量組、中藥高劑量組SP含量與地塞米松組無差異，說明中藥中劑量、中藥高劑量與地塞米松療效相當。△

3 討論

SP是一種神經肽，具有多種生物活性，能增加胃腸蠕動，促進胃腸激素及唾液的分泌。內毒素血癥狀態下，空腸腸壁內SP能神經釋放耗竭，使空腸組織局部SP減少，局部SP的釋放為肌電復合，引起不規則峰電位活動，說明內毒素血癥后腸道內SP含量變化與腸運動紊亂有關。研究表明，阻斷SP作用大鼠更容易受沙門氏菌感染[1]。SP可通過NK1R磷酸化和激活抗凋亡的Akt途徑，達到防止大腸炎過程中的進一步的組織損害及挽救結腸細胞的凋亡。作為一種免疫保護因子和抗應激因子SP逐漸受到人們的重視。SP在炎性反應中具有雙向調節作用，既參與促進炎性反應，也在抗炎性反應中發揮作用。近年研究表明：SP是ALI病理過程中重要的因子[3]。SP在胰腺和肺均高表達，NEP(SP降解酶)抑制劑能明顯上調SP的表達并加重肺損傷[4]。有人認為SP在異氟烷誘發脊髓損傷大鼠神經源性肺水腫中有重要作用[5]。實驗結果顯示在腸組織中，SP介導的抗炎反應占優勢，可能通過包括促進免疫球蛋白分泌等方式保護腸粘膜，而對機體產生正面影響。

腸源性感染及腸源性內毒素血癥的發生是增加SIRS/MODS病死率的最危險的因素[3]。近年來，對于ALI的病機中“二次打擊”學說受到重視，內毒素血癥和細菌易位為因果、協同作用，導致機體器官功能損傷。通過本實驗我們推斷通腑湯可能通過促進胃腸運動，蕩滌胃腸積滯，暢通氣機，改善腸道微循環，促進sIgA分泌，保護腸道免疫屏障，減少細菌和內毒素異位，調節促炎因子和抗炎因子平衡，減輕SIRS，保護臟器功能。它通過降低肺組織中SP，減輕呼吸道炎性反應，減輕病理損害，同時糾正內毒素血癥后腸道功能紊亂，SP能神經釋放耗竭，上調SP，控制細菌易位，從而減輕肺損傷。通腑湯治療后，使肺氣得升，腑氣得降，相輔相成，相得益彰，陰平陽秘，共成雙向調節作用。

綜上所述，通腑湯對內毒素血癥后急性肺損傷有一定的治療作用，為中醫“肺病治腸理論”提供了依據。它從整體上調節人體免疫機制，平衡促炎反應與抗炎反應，改善微循環，糾正機體內環境紊亂，從而減輕肺損傷，保護全身各個臟器，使疾病“向愈”發展。

[1] Pascual DW.Ther ole of tachykinins on bacterial infections.Front Biosci，2004，9：3209-3217.

[2] Bhatia M，Moochhala S.Role of inflammatory mediators in the pathophysiolo-gy of acute respiratory distress syndrome.JPathol.2004，202(2)：145～156.

[3]馬春蕾.P物質在大鼠重癥急性胰腺炎相關性肺損傷中的作用[D].天津醫科大學碩士學位論文集，2007：21.

[4]張劭博，鄒最，石學銀.P物質在異氟烷誘發脊髓損傷大鼠神經源性肺水腫中的作用[J].中國矯形外科雜志，2009，17(10)：774～776.