復(fù)方氨基酸注射液(18AA－I)中鉀含量測定方法的改進(jìn)

董雪菊，陳美田，徐艷華，劉 妍

(1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東 濟(jì)南 250012;2.山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公司，山東 濟(jì)寧 272031)

復(fù)方氨基酸注射液(18AA－I)為復(fù)方制劑，是由18種氨基酸與鉀、鈉、鈣、鎂等無機(jī)鹽配制而成的滅菌水溶液。靜脈滴注于人體，用于改善手術(shù)前后病人的營養(yǎng)狀況及各種原因所致低蛋白血癥患者。在能量供給充足的情況下，氨基酸輸液可進(jìn)入組織細(xì)胞，參與蛋白質(zhì)的合成代謝，獲得正氮平衡，并生成酶類、激素、抗體、結(jié)構(gòu)蛋白，促進(jìn)組織愈合，恢復(fù)正常生理功能。

復(fù)方氨基酸注射液(18AA－I)執(zhí)行部頒標(biāo)準(zhǔn)二部第六冊，部頒標(biāo)準(zhǔn)中鉀的含量測定存在如下缺陷:①以前因儀器本身靈敏度不高，故鉀的測定濃度較高。現(xiàn)使用的原子吸收分光光度儀靈敏度大幅提高，因而部頒標(biāo)準(zhǔn)中鉀的測定濃度太高，甚至超出了儀器規(guī)定的線性范圍;②火焰原子吸收分光光度法是根據(jù)某元素的基態(tài)原于對(duì)該元素的特征波長輻射產(chǎn)生選擇性吸收來進(jìn)行測定的分析方法。由于復(fù)方氨基酸注射液(18AA－I)含有其他高濃度的鈉、鈣、鎂金屬離子，存在電離干擾，因而造成鉀的含量檢測不穩(wěn)，實(shí)際得出的檢測結(jié)果比理論值高出60%以上，無法體現(xiàn)真實(shí)樣品的含量，更無法保證產(chǎn)品質(zhì)量。所以樣品中需加入消電離劑氯化銫溶液和氯化鍶溶液以消除其他金屬離子的干擾。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 電子天平AE－200和SX205(梅特勒)，原子吸收分光光度計(jì)TAS－986(北京普析通用公司)。

1.2 試劑 氯化鈣、硫酸鎂、氫氧化鈉、焦亞硫酸鈉、氯化鍶、氯化銫與氫氧化鉀均為分析純。注射用水為山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公司自制。

1.3 對(duì)照品及樣品 氯化鉀為基準(zhǔn)試劑。其他氨基酸溶液［18種氨基酸原料谷氨酸、脯氨酸、絲氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、纈氨酸、門冬氨酸、異亮氨酸、鹽酸賴氨酸、精氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、組氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸、鹽酸半胱氨酸、色氨酸、酪氨酸(天津天安藥業(yè)有限公司)］按照工藝處方由山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公司配制。

2 方法與結(jié)果

2.1 小試溶液的配制 ①稱取氯化鉀0.3760 g，置100 mL容量瓶中用注射用水稀釋至刻度，搖勻即得;②氫氧化鉀0.4150 g，置50 mL容量瓶中用注射用水稀釋至刻度，搖勻即得。

分別精密量取①、②溶液各5 mL置50 mL量瓶中，制備2個(gè)樣品(樣品a和樣品b)，樣品a:加19 mL其他氨基酸溶液，后用注射用水稀釋至刻度，搖勻即得(與復(fù)方氨基酸注射液18AA－1工藝配制一致);樣品b:用注射用水稀釋至刻度，搖勻即得。

2.2 檢驗(yàn)方法

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取經(jīng)130℃干燥至恒重的氯化鉀約1.14 g，精密稱定，置1000 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻;再精密量取5 mL至50 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，再精密量取1 mL、2 mL、3 mL、4 mL分別置100 mL容量瓶中(濃度比原標(biāo)準(zhǔn)縮小了10倍)，分別加入氯化銫溶液(取氯化銫6.35 g，加水溶解成100 mL)4 mL，和氯化鍶溶液(取氯化鍶15.25 g，加水溶解成100 mL)4 mL(消電離劑氯化銫溶液和氯化鍶溶液以消除其他金屬離子如鈉、鈣和鎂的干擾)，加水稀釋至刻度，制成每1 mL中含鉀0.60、1.20、1.80、2.40 μg 的溶液。按照原子吸收分光光度法［1］(《中國藥典》2010年版二部附錄Ⅳ D第一法)，分別在766.5 nm的波長處測定鉀的吸光度。以相應(yīng)的吸光度和相應(yīng)的濃度計(jì)算回歸方程。

2.2.2 鉀供試品溶液的制備 精密量取鉀溶液1 mL置10 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻;再精密吸取1 mL置50 mL容量瓶中，加入上述氯化銫、氯化鍶溶液各2 mL，用水稀釋至刻度，搖勻。照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法測定吸光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算含量。

2.3 線性關(guān)系 按照原子吸收分光光度法［1］(《中國藥典》2010年版二部附錄IV D第一法)，分別在766.5 nm的波長處測定，測得每 1 mL 中含標(biāo)準(zhǔn)鉀0.60 μg、1.20 μg、1.80 μg、2.40 μg的溶液測得鉀的吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，以濃度(μg·mL－1)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為 Y=4.069X －0.4017，r=0.9995，結(jié)果表明鉀在 0.60 ～2.40 μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.4 重復(fù)性試驗(yàn) 將樣品a連續(xù)測定6次吸光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算平均含量為 1.51 μg·mL－1，RSD 為 0.24%(n=6)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本方法重復(fù)性良好。

2.5 回收率試驗(yàn) 根據(jù)2.1小試溶液的配制方法分別配制供試品(小試1，2，3)測定吸光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算含量，見表1～3。

表1 小試1的回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

高中低濃度平行做3份，平均回收率為:99.8%，9份樣品測定結(jié)果的RSD(n=9)為:0.685%。結(jié)果表明，測定方法的回收率良好。

表2 小試2的回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3 小試3的回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.6 專屬性試驗(yàn) 從表1、表2、表3的結(jié)果可以看出，樣品a(加入其他成分)和樣品b(未加其他成分)結(jié)果無顯著性差異。說明處方中其他成分對(duì)鉀的測定結(jié)果無影響。

2.7 樣品測定 取6批樣品，分別制備樣品溶液，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法測定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下繪制的回歸方程計(jì)算含量，測定結(jié)果見表4。

表4 鉀的含量測定結(jié)果

3 討論

3.1 通常在原子吸收光譜法中，吸收在0.5以下校準(zhǔn)曲線呈現(xiàn)線性，所以改進(jìn)后的方法，鉀的濃度比原標(biāo)準(zhǔn)降低了10倍，吸收度在0.2～0.6之間，線性關(guān)系良好。

3.2 當(dāng)未知樣品的濃度高于設(shè)置的濃度范圍，則可調(diào)節(jié)燃燒器的角度降低火焰原子吸收法的靈敏度。如果燃燒器角度轉(zhuǎn)動(dòng)90°，靈敏度下降到1/20，與標(biāo)準(zhǔn)條件比較可測定相當(dāng)于20倍的濃度。

3.3 經(jīng)試驗(yàn)表明本方法專屬性、準(zhǔn)確度和精密度能達(dá)到試驗(yàn)的要求。結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性好，可有效控制該制劑的質(zhì)量。

［1］國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典2010年版(二部)［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄ⅣD.