Survivin和Ki-67在卵巢漿液性囊腺癌中的表達及意義

李俊霞

卵巢癌是女性生殖系統常見的三大惡性腫瘤之一。婦女一生罹患卵巢癌的風險為1/70。一直以來，其發病率呈上升趨勢，且死亡率極高，晚期確診患者的5年生存率只有25%左右［1］。近年來腫瘤分子生物學研究認為，凋亡抑制和增殖能力增強是腫瘤發生的兩大主要機制。本研究通過檢測凋亡抑制蛋白Survivin(生存素)和增殖指標Ki67在卵巢癌組織中的表達及二者的相關性，從凋亡與增殖的角度探討卵巢癌的發生發展機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標本來自2001年1月至2009年1月在我院接受手術治療且有完整臨床資料的卵巢漿液性腫瘤患者61例，其中46例囊腺癌，術前均未行放療、化療及生物治療;15例囊腺瘤。臨床分期采用國際婦產科聯盟2000年修訂的分期標準進行，病理組織學分級采用WHO分級標準進行。

1.2 標本置備 標本用10%福爾馬林液固定，石蠟包埋，作4 μm連續切片，分別行常規HE染色和鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連接(SP)法免疫組化分析。

1.3 試劑 兔抗人Survivin多克隆抗體、鼠抗人Ki67單克隆抗體、SP免疫組化試劑盒，聯苯二胺顯色試劑盒均購于福州邁新生物技術開發公司。

1.4 實驗方法 采用SP法，實驗步驟按試劑盒說明書進行。

1.5 結果判定 按照試劑盒說明，Survivin和Ki67兩種蛋白均以在組織切片中顯示細胞核或胞漿染色為淡黃至黃棕色顆粒為陽性表達。根據陽性細胞顯色深淺分級:不顯色或顯色不清為陰性(-);淺黃色為弱陽性(+);棕黃色為中度陽性(++);深褐色為強陽性(+++)。

1.6 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件，免疫組化結果比較采用χ2檢驗，各組別間相關性檢驗采用Spearman等級相關分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Survivin和Ki67在卵巢漿液性囊腺癌、囊腺瘤組織中的表達及與卵巢癌臨床病理特征的關系，見表1。

表1 Survivin和Ki67表達與卵巢漿液性囊腺癌臨床病理特征的關系

2.2 Survivin、Ki67表達的相關性，見表2。

表2 Survivin和Ki67在卵巢漿液性囊腺癌中表達的相關性

3 討論

Survivin蛋白是最近新被發現的一種結構獨特IAP族的凋亡抑制因子，與細胞分裂、增殖有關，在胚胎組織和惡性腫瘤中表達，正常成年分化組織一般不表達或弱表達［2］。是分子量最小的IAP族成員，具有抑制細胞凋亡和調節細胞增殖的雙重功能，與卵巢癌的發生、發展及預后密切相關［3］。本研究發現Survivin在卵巢漿液性囊腺瘤和囊腺癌組織的陽性表達率分別為26.7%和84.8%，顯示:從卵巢良性腫瘤到惡性腫瘤，其表達明顯增高，結合近年在一些癌前病變如重度宮頸上皮內瘤樣變、子宮內膜不典型增生等組織中檢測出Survivin的表達，推測它在腫瘤惡性變的早期即有表達，可能通過抑制細胞凋亡，為存在基因缺陷的細胞提供生存優勢，促使基因突變的積聚和細胞惡性轉化，最終導致了卵巢癌的發生發展。本研究還發現，Survivin在Ⅲ～Ⅳ期卵巢漿液性囊腺癌中陽性表達率明顯高于Ⅰ～Ⅱ期，在中低分化囊腺癌中陽性率明顯高于高分化，也就是腫瘤分化越差，分期越晚，則它的陽性表達率越高。因此Survivin表達程度與病期進展和不良組織學分級相一致，而臨床分期及組織學分級程度是卵巢癌的重要預后因素，提示檢測它的表達水平對于判斷卵巢癌的惡性程度有一定意義，是一個具有潛在價值的腫瘤標志物。

細胞的惡性增殖是惡性腫瘤的顯著特征之一，檢測腫瘤細胞的增殖狀態對協助診斷、估計預后及指導治療具有重要意義。Ki67是與細胞增殖相關的核抗原之一，與細胞的有絲分裂密切相關，其抗原性的表達在S期的后半期增加明顯，G2/M期達高峰，半壽期為1 h或更短，故可以準確地反映細胞的增殖活性，是檢測細胞增殖活性的理想指標。本實驗檢測Ki67在卵巢漿液性囊腺癌組織中的陽性表達率顯著高于囊腺瘤(P＜0.05)，差異具有統計學意義。說明這兩種分化程度不同的腫瘤其處于S期的細胞數量差異有統計學意義，提示卵巢癌的發生與細胞增殖有關。本實驗結果還顯示Ki67陽性表達率在卵巢癌Ⅲ-Ⅳ期顯著高于Ⅰ-Ⅱ期;在高、中、低分化的卵巢漿液性囊腺癌中的陽性表達率呈遞增趨勢，且中低分化組織中Ki67表達與高分化組織差異有統計學意義。這與宋歡歡［4］的實驗結果一致。由此可見Ki67可以輔助病理檢查對良惡性腫瘤進行鑒別，并且用Ki67檢測卵巢癌細胞的增殖能力方便快速，靈敏度、特異性均較高，具有一定的臨床應用價值。

本研究顯示卵巢漿液性囊腺癌中Survivin蛋白表達陽性組織的Ki67陽性表達率明顯高于Survivin蛋白表達陰性組織中Ki67陽性率，Survivin與Ki67表達率間呈正相關(r=0.364，P＜0.05)。推測Survivin過表達可能促進轉化細胞異常增殖，使Ki67蛋白表達明顯增加，在卵巢癌的發生發展中起重要作用。因此，聯合檢測Survivin和Ki67蛋白的表達，可為卵巢漿液性囊腺癌的病理診斷、臨床診治及預后判斷提供客觀指標。

綜上所述，Survivin在卵巢漿液性癌中高表達，它可能與卵巢癌的發生、發展有關。Ki-67可作為鑒別卵巢良惡性腫瘤重要的指標。聯合檢測Survivin和Ki-67可作為卵巢漿液囊腺癌的診斷、評價惡性程度和預后的重要指標。

［1］Colombo N，Van Gorp T，Parma G，et al.Ovarian cancer.Crit Rev Oncol Hematol，2006，60(2):159-179.

［2］Chawla Sarkar M，Bae SI，Reu FJ，et al.Downregnlation of Bcl-2，FLIP or IAPs(XIAP and survivin)by siRNAs sensitizes resistant melanoma cells to Apo2L/TRAIL-induced apoptosis.Cell Death Differ，2004，30:1160-1175.

［3］Duffy MJ，O’Donovan N，Brennan DJ，et al.Survivin:a promising tumor biomarker.Cancer Lett，2007，249(1):49-60.

［4］宋歡歡，封全靈.卵巢上皮性腫瘤中磷酸化STAT3與Ki67的表達及其臨床意義.河南醫學研究，2008，17(3):210-213.