幾種常見蔬菜清除自由基活性的研究

盧 青

（聊城大學東昌學院 山東 聊城 252059）

自由基是生物機體在生命活動中通過生物化學反應所產生的中間產物。在正常的生理情況下，機體內的自由基的產生和消除處于一個動態平衡之中，其濃度也維持在較低水平，此時自由基不僅不會損傷機體，還可顯示出獨特的生理作用；而在某些病理情況下，機體自由基的產生和消除功能將失去平衡，由于自由基具有很高的反應活性，因此它將在分子、細胞乃至器官水平給機體造成損傷，從而加快機體的衰老過程，并可誘導癌癥心血管疾病等諸多疾病的發生。[1，2]生物體內氧化代謝產生的羥基自由基 （·OH）具有強反應活性，它能與蛋白質、糖類等物質發生鏈反應，導致細胞損傷甚至疾病。具有清除自由基活性的物質，即自由基清除劑。由于自由基清除劑具有廣泛的生物活性，因而有關研究受到世界各國的普遍重視。目前已發現的天然自由基清除劑主要包括酶和非酶兩大類。酶類如：超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）等。非酶類有：肽和非酶蛋白類、生物堿及含氮雜環類、抗壞血酸、生育酚、胡蘿卜素類、多酚類、黃酮及類黃酮、苯丙素類等。我們日常食用的蔬菜、水果和中藥中往往含有大量的自由基清除劑。本文選取常見蔬菜作為研究對象，其中含有的維生素C、維生素E、胡蘿卜素、生物堿、檸檬酸等都具有一定的自由基清除能力[3]，其乙醇提取液的自由基清除率是多種自由基清除劑共同作用的結果。

1 試驗部分

1.1 儀器、試劑與樣品

自動分析天平，TU-1810紫外可見分光光度計，超聲波清洗器。

水楊酸（AR），H2O2（30%），FeSO4·7H2O(AR)，乙醇（AR）。

選取市售新鮮成熟生菜、油菜、青辣椒、柿子椒、胡蘿卜、青蘿卜。

1.2 實驗方法

1.2.1 ·OH的產生及測定原理

·OH-自由基產生體系模型:H2O2+Fe2+→OH+Fe3+。在反應體系中加入水楊酸,能有效捕捉·OH并產生有色產物。該產物在510nm處有強吸收,若加入有清除·OH功能的被測物,便會與水楊酸競爭·OH,使有色產物的生成量減少,采用固定反應時間法,在510nm處測量含被測物的反應液的吸光度,與空白液比較,便能測定被測物對·OH的清除作用[4]。

1.2.2 樣品液的提取

以生菜的乙醇提取液為例，將生菜洗凈干燥，準確稱取50g生菜，搗碎，加入100mL的乙醇，室溫下用超聲波清洗器震蕩三小時，得樣品粗提取液。

1.2.3 ·OH的制備

在 50mL容量瓶中加入 2.5mL H2O2（0.088mol/L）,2.5mL Fe2+（9.0mmol/L）和 0.5mL 水楊酸（9.1mmol/L）。

1.2.4 空白試液吸光度的測定

將配制好的自由基試液定容至50ml,取2ml在510nm處測其吸光度記為A0。

1.2.5 提取液吸光度的測定

將配制好的自由基試液中加入樣品提取液，定容至50ml,搖勻固定反應時間為3min，測其吸光度，記為As。每個樣品平行測定三次，取平均值進行計算：消除率（%）=A0-As/A0×100%

2 結果與討論

2.1 柿子椒和紅辣椒對·OH的清除作用及清除能力的比較

向·OH產生體系中分別加入柿子椒和紅辣椒的提取液，測定吸光度。兩種提取液對·OH的清除率均隨提取液的濃度升高而升高。紅辣椒較柿子椒強，但差異不明顯，見圖1。分析原因是紅辣椒雖比柿子椒中胡蘿卜素、抗壞血酸的含量高，但維生素E的含量后者較高[5]。

圖1 柿子椒和紅辣椒對羥基自由基清除作用的比較

圖2 胡蘿卜和青蘿卜得羥基自由基清除作用的比較

圖3 生菜對羥基自由基的清除作用

圖4 油菜對羥基自由基的清除作用

2.2 胡蘿卜和青蘿卜對·OH的清除作用及清除能力的比較

向·OH產生體系中分別加入胡蘿卜和青蘿卜的提取液，測定吸光度。兩種提取液對·OH的清除率均隨提取液的濃度升高而升高。胡蘿卜較青蘿卜強,見圖2。分析原因是胡蘿卜中維生素C的含量與青蘿卜中維生素C的含量幾乎一樣；胡蘿卜中維生素E的含量大約是青蘿卜中維生素E的含量的2倍；胡蘿卜中胡蘿卜素的含量遠遠超過青蘿卜中胡蘿卜素的含量，大約是青蘿卜的70倍[5]。

2.3 生菜對·OH的清除作用

向·OH產生體系中加入生菜的提取液，測定吸光度。提取液對·OH的清除率隨提取液的濃度升高而升高，見圖3。分析原因是生菜中含維生素C、維生素E、胡蘿卜素和抗壞血酸。這些成分是清除自由基的有效成分。

2.4 油菜對·OH的清除作用

向·OH產生體系中加入油菜的提取液，測定吸光度。提取液對·OH的清除率隨提取液的濃度升高而升高，見圖4。分析原因是生菜中含維生素C、維生素E、胡蘿卜素和抗壞血酸。這些成分是清除自由基的有效成分。

2.5 結論

以上結果表明生菜、油菜、胡蘿卜、青蘿卜、柿子椒和紅辣椒的乙醇提取液對自由基都有一定的清除作用。通過比較表明：紅辣椒較柿子椒的清除自由基作用高但差異不顯著，胡蘿卜較青蘿卜的清除自由基作用高，差異顯著。生菜和油菜都有清除自由基的作用。因此，如果我們在日常的飲食生活中有針對性的選擇蔬菜，同樣可以很好地清除自由基，達到預防疾病和保健駐顏得的目的。

［1］鄭榮梁,黃中洋.自由基醫學與農學基礎[M].北京:高等教育出版社,施普林格出版社,2001.

［2］趙保路.氧自由基與天然抗氧化劑[M].北京:科學出版社,2001.

［3］陸瑞利，胡豐林，丁曉娟，等.黃山欒樹葉中具有清除自由基活性物質的分離和制備[M].安徽農業大學學報，2002（04）.

［4］丁利軍，鐘金玲.幾種水果蔬菜對羥自由基清除作用的研究.廣州食品工業科技，2002（04）.

［5］中國預防科學院和營養與視頻衛生所.食品成分表.科學出版社，1997，52.