適用創傷骨科外周血細胞復檢規則的探討

陳延演,劉 誠,張會英

(北京積水潭醫院 檢驗科,北京 100035）

骨科患者,大部分由外傷,感染等因素引起外周血細胞數量和形態的應激變化,如使用通用的復檢規則會造成假陽性標本的數量增加,為確保質量,我們參考“國際血液學41條復檢規則”[1]和“XE-2100復檢協作組”的23條復檢規則[2]對創傷骨科的外周全血細胞復檢規則進行探討。

1 材料與方法

1.1 標本來源1050份血標本(840份用于篩選方案的效果評價,210份用于驗證試驗）來自創傷骨科、手外科、脊柱外科、矯形骨科、小兒骨科及其他科的骨傷患者,初診標本508份,術后復診標本542份。

1.2 儀器與試劑SYSMEX XE-2100全自動血細胞分析儀,原裝配套試劑、校準物和質控物。按要求對儀器進行校準和每日進行嚴格的室內質量控制。OLYMPUS CX-21雙筒顯微鏡;瑞氏染液。

1.3 檢測方法所有標本于采血后30min至4 h用XE-2100自動進樣模式檢測,將檢測報告備份存檔。同時每份標本制備2張血涂片,瑞氏染色,由兩名具有五年以上臨檢工作經驗人員按中華人民共和國衛生行業標準的白細胞分類計數參考方法進行鏡檢[3]。

1.4 初定復檢規則參考“國際血液學41條復檢規則”和“XE-2100復檢協作組”23條復檢規則,根據我院骨科患者為主的特點,與臨床醫師討論,初步制定血細胞復檢規則(見表1）。

1.5 復檢規則評估與改進方案應用人工鏡檢的結果對初定復檢規則進行統計學評估,以鏡檢結果為金標準,評估初定復檢規則對標本判斷的真陽性率、假陽性率、真陰性率和假陰性率,并對以上各條規則進行統計學評價。其中真陽性定義為觸發規則且鏡檢結果為陽性,假陽性定義為觸發規則但鏡檢結果為陰性,真陰性定義為不觸發規則且鏡檢結果為陰性,假陰性定義為不觸發規則而鏡檢結果為陽性。并根據骨科患者的臨床特點,對復檢規則進行改進。

表1 初步制定血細胞復檢規則

改進方案一:更改初定規則3、4、5條為,WBC＜3.0或 ＞30.0×109/L,PLT＜70或＞1000×109/L,HGB＜70g/L或＞180g/L

改進方案二:更改方案一11條為Neut%≥90%

改進方案三:更改方案二12條為Lym%≥50%(年齡＞8歲）

改進方案四:更改方案三19條為AL≥150(儀器無其他陽性）

改進方案五:更改方案四17條為IG≥140(儀器無其他陽性）

改進方案六:更改方案五17、19條為 IG≥160,AL≥160(儀器無其他陽性）

1.9統計方法:使用Excel軟件進行統計分析。

2 結果

2.1 各方案評估應用840例儀器檢測數據和顯微鏡人工鏡檢結果對初定復檢規則及6個改進方案進行評估,并對其真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率以及復檢率進行統計,見表2。

2.2 初定復檢規則及改進方案假陽性及假陰性統計

2.2.1 假陽性 IG報警53例(6.31%）,假陽性34例(4.05%）。AL報警59例(7.02%）,假陽性57例(6.78%）。AL/BL報警20例(2.38%,6例同時有AL報警）,假陽性19例(2.26%）。BL報警 7例(0.83%,6例同時有IG和AL報警）,假陽性5例(0.6%）。血小板凝集報警9例(1.07%）,假陽性8例(0.95%）。

2.2.2 假陰性 中晚幼粒細胞鏡檢陽性34例(4.05%）,假陰性19例(2.26%）。鏡檢發現血小板凝集7例(0.83%）,假陰性6例(0.71%）。有核紅細胞鏡檢陽性4例(0.48%）,假陰性4例(0.48%）。

2.3 復檢規則的制定根據“國際血液學41條復檢規則”、“XE-2100復檢協作組”23條復檢規則和6個改進方案,對840份標本進行數據統計分析,并結合初定復檢規則在日常工作使用中發現的某些缺陷、創傷骨科特點和XE-2100的性能特點進行了反復研究,最終確定方案六為創傷骨科適用的外周全血細胞復檢規則。

2.4 驗證試驗選用210例臨床標本對該方案進行驗證試驗。結果為假陽性16例(7.62%）,假陰性10例(4.76%）,真陰性184例(87.62%）。滿足假陰性＜5%的要求。

3 討論

XE-2100能快速準確地對各種血細胞進行分類計數,甚至能對原始、幼稚細胞等非正常外周血細胞進行報警提示。但是與人工鏡檢相比,仍存在較高的假陽性報警。Bourner等[4]曾對4種型號的血細胞分析儀進行比較,結果發現XE-2100假陽性率最高。

隨機抽取的840例標本均來自本院創傷骨科、手外科、脊柱外科、矯形骨科、小兒骨科及其他骨科創傷病房(除骨腫瘤科）,患者多以外傷、骨折、失血、感染或擇期手術后再創傷為主。其外周血象多見白細胞和中性粒細胞的絕對增多[5]。但這現象多為一過性,是機體的一個正常反應。因此復檢方案提高了白細胞計數和中性粒細胞分類上限。

此次異型淋巴細胞在鏡檢中多見,但多數未達到鏡檢陽性標準是規則中假陽性的主要組成部分。可能是因為淋巴細胞離體后因為容器、抗凝劑等外界刺激以及隨著放置時間延長而發生活化[6],導致儀器報警。

單獨BL報警一例,單獨AL/BL報警14例,鏡檢均為陰性。我們在工作中也發現單獨BL或AL/BL報警時未見人工鏡檢陽性。與李亞紅等[7]報道相似。但因為出現原始細胞對于血液病診斷意義重大,故未刪改,以保證不漏檢原始細胞。

回顧近兩年的血常規復查記錄,發現在標本采集符合要求的前提下,血常規數據的復查結果均與初次檢測結果相符。建議對WBC、HGB、PLT復查范圍進行了相應的調整,在不降低結果可信度的情況下,減少復查標本數量。

國際血液學復檢專家組認為5%是為保證患者檢測結果安全性的最大可接受的假陰性率[8]。因此,在制定新復檢規則的過程中,為了降低假陽性率和假陰性率我們修改了7個報警指標的臨界值。對最后確定方案進行驗證試驗的結果顯示,假陰性10例占4.76%,其中6例為血小板凝集,4例為鏡檢發現中性中幼粒細胞占1%,這與“XE-2100復檢協作組”[2]所得結果相似。本次試驗發現血小板凝集的假陽性率很高,李寶青等[9]也有相似發現。其可能的原因是當出現較多破碎的紅細胞、白細胞或巨大血小板時,儀器容易出現血小板凝集報警。血小板凝集報警的假陰性率也很高,可能是因為血小板只有微小凝集且數量不多,大血小板計數和血小板體積分布寬度未達到一定的閾值,未達到儀器設置的報警限而不觸發儀器報警。

綜上所述,我們根據所用XE-2100血細胞分析儀的性能,結合創傷骨科的特點,不斷完善復檢規則。在保證假陰性率＜5%的情況下,降低了復檢率,并且未發現白血病細胞漏檢。因此本復檢規則適用于創傷骨科的外周全血細胞分析。

[1]Barnes PW,McFadden SL,Machin S,et al.The international consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis[J].Laboratory Hematology,2005,ll(2）:83.

[2]XE-2100血細胞分析復檢標準制定協作組.Sysmex XE-2100自動血細胞分析和白細胞分類的復檢規則探討[J].中華醫學檢驗雜志,2008,31(7）:752.

[3]中華人民共和國衛生部.中華人民共和國衛生行業標準一細胞分類計數參考方法[M].北京:人民衛生出版杜,2005.

[4]Bourner G,Dhaliwal J,Sumner J.Perfor mance evaluation of the latest fully automated hematology analyzer in a large commercial laboratory setting:a 4-way,side-by-side study[J].Lab Hematol,2005,11:285.

[5]王鴻利,主編 血液學和血液學檢驗[M].第2版.北京:人民衛生出版社,1999,139-142.

[6]樊笑霞,吳 飛,王 凌,等.EDTA-K2對異型淋巴細胞檢測的干擾[J].第二軍醫大學學報.2009,30(5）:595.

[7]李亞紅,林志遠,羅建偉.XE-2100血細胞分析儀白細胞報警功能的評價[J].實用醫技雜志,2006,13(6）:936.

[8]盧興勇,叢玉隆.應重視和提升傳統血液形態學檢驗診斷水平[J].中華檢驗醫學雜志,2006,29(6）:481.

[9]李寶青,葉映月,林 莉,等.Sysmex XE-2100計數血小板時出現QFlags報警提示的可靠性評價[J].臨床檢驗雜志,2009,27(2）:158.