淺談小鼠腹腔注射的方法與技巧

俞玉忠 穆斌

用小鼠來檢測藥品的異常毒性，是各國藥品檢驗中用得最多的生物檢定方法，我國從1953年第一部藥典發(fā)行以來，異常毒性檢測方法一直被收載在各版藥典中，并且不斷地進(jìn)行了改進(jìn)。從2005年版藥典開始，雖然從很多品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中刪去了異常毒性的檢查項目，但一直到2010年版藥典仍然保留了部分品種的異常毒性檢查項目，并且在附錄中也介紹了異常毒性檢查法［1］。此外，在新藥的臨床安全性評價試驗中，小鼠仍得到了廣泛應(yīng)用［2-3］，有時還用小鼠做成動物模型［4］，對新開發(fā)藥物的療效進(jìn)行研究。靜脈注射和腹腔注射是小鼠最常見的兩種給藥途徑，小鼠的尾靜脈注射對初學(xué)者來說，可能有一定難度，但注射是否成功容易判斷，不會對實驗結(jié)果造成影響。而腹腔注射雖然看似簡單，可如果操作不當(dāng)，很容易造成注射失敗，并不被發(fā)現(xiàn)，直接影響到實驗結(jié)果。本文主要對小鼠腹腔注射的正確方法及注射時需注意的事項進(jìn)行了介紹。

1 小鼠的選擇

1.1 小鼠應(yīng)同一來源同品系，雌者無孕，健康無傷，毛色光滑，眼睛紅亮，活潑，體重17 ～20 克［5］。

1.2 盡量選擇雌性小鼠，因為整群飼養(yǎng)的雄性小鼠時常打斗，如確實需要選擇雄性小鼠則應(yīng)分開籠飼。

2 腹腔注射的方法

2.1 小鼠的抓取 左手握小鼠，用拇指、食指捏住小鼠頸背部，用無名指及小指固定其尾和后肢，腹部向上，頭呈低位［5］。

2.2 在下腹部離腹白線約0.5 cm處將注射針刺入皮下，沿皮下向前推進(jìn)3～5 cm，然后使針頭與小鼠腹部約成30°角刺入腹腔，針頭刺入的速度要快，剛開始刺時會有一種明顯的抵抗力，那是因為鼠皮具有韌性，后來突然會有一種抵抗力消失的感覺，說明針頭已刺入腹腔內(nèi)，此時就可以開始進(jìn)藥。

2.3 注射完畢后，輕輕將針頭旋轉(zhuǎn)一定角度，緩慢拔出針頭，防止藥液外漏。

2.4 注射成功與否的判斷 刺入腹腔后可輕拉針筒，如確認(rèn)無血液或腸內(nèi)容物流入，說明注射成功。

3 試驗技巧

3.1 小鼠腹腔類似于小氣球，扎針前有阻力，扎穿后可直接進(jìn)入，里面空空的。

3.2 如以前沒有腹腔注射經(jīng)驗，則在做實驗前應(yīng)先練習(xí)幾次，可以選已做完實驗需淘汰的小鼠來練習(xí)，如果條件允許，最好選跟試驗條件要求一致的健康小鼠，用純化水替代藥品進(jìn)行注射，注射后再觀察一段時間。這樣不僅能體驗手感，還可以判斷出針頭是否刺入內(nèi)臟。

3.3 針頭刺入小鼠腹腔內(nèi)一般不超過1 cm，如刺入過淺，不易刺破腹腔壁，過深的話就容易刺破內(nèi)臟。

4 注意事項

4.1 注射時，小鼠頭部一定呈低位，尾部稍稍提起，使內(nèi)臟前移。

4.2 有的實驗人員為了避免針頭刺入內(nèi)臟，針頭剛插入皮膚就向上挑起，這是一種不正確的操作手法。首先，針頭剛插入皮膚時可能還沒刺破腹腔壁，此時挑起注射往往只是將藥液注射在皮下，而皮下注射和腹腔注射是兩種不同的給藥途徑。另外，針頭挑起后，一不小心就容易從皮膚上掉出，致使注射不能成功。

5 結(jié)論

5.1 腹腔注射成功的關(guān)鍵在于個人手法，只要按操作規(guī)程要求進(jìn)行操作，不擅自創(chuàng)新或改變注射方法，就能順利完成實驗。

5.2 實驗人員膽子要大，心要細(xì)，注射時應(yīng)做到穩(wěn)、準(zhǔn)、狠，這樣操作起來就會更順利。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典.第2部.北京，中國醫(yī)藥科技出版社，2010:98-99，附錄XI C.

［2］ 劉冬戀，馬松濤，曾仁勇，等.肉桂揮發(fā)油對小鼠的半數(shù)致死量測定.西南國防醫(yī)藥，2010，20(5):481-482.

［3］ 吳正平.一枝黃花皂苷對小鼠腹腔注射半數(shù)致死量(LD50)的測定.黑龍江中醫(yī)藥，2009，(3):41-42.

［4］ 石丹萍，陳小嬌，陳銀寶，等.腹腔注射七氟烷對小鼠鎮(zhèn)痛及催眠作用的影響.中國實用醫(yī)藥，2010，5(3):1-2.

［5］ 中國藥品生物制品鑒定所.中國藥品檢驗總所.中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范.北京，中國醫(yī)藥科技出版社，2010:304-306.