奶牛隱性乳房炎的檢測及其治療方法

余彥國,張 瑾

(甘肅畜牧工程職業技術學院,甘肅 武威 733006)

奶牛隱性乳房炎的檢測及其治療方法

余彥國,張 瑾＊

(甘肅畜牧工程職業技術學院,甘肅 武威 733006)

奶牛乳房炎是困擾奶牛養殖業發展最嚴重的疾病之一,特別是隱性乳房炎,臨床癥狀不明顯,不僅導致奶牛產乳量和乳質量的降低,還可能傳染給其他奶牛,導致疾病的擴散。因此,只有對乳汁進行檢測,通過其生理、生化等指標變化來判斷乳房炎的發生情況。為減少該病的發生、提高乳質量,本文總結了奶牛隱性乳房炎的微生物學檢驗、細胞學檢查、酶學指標等檢測方法以及用乳腫消膏、鹽酸左旋咪唑、消炎增乳散、生物制劑、生殖股神經封閉等治療措施。

奶牛;隱性乳房炎;檢測;治療

前言

乳房炎是奶牛常見的頑固性疾病,全世界每年因其造成的經濟損失達20億美元,平均每頭每年損失約200美元。我國每年因其造成的損失超過3億元[1]。美國國家乳房炎委員會根據乳房和乳汁有無肉眼可見變化,將奶牛乳房炎分為臨床型和隱性型兩種[2]。據報道,臨床型與隱性型發病之比為1∶15～1∶45[3]。隱性乳房炎是病原從乳頭表面或乳頭管經乳池、乳導管入侵乳腺泡引起的[4],其乳腺組織和乳汁無肉眼可見變化,而乳汁理化性質、成分、體細胞數及產乳量會改變。

1 檢測方法

1.1 乳中病原微生物檢驗

奶牛隱性乳房炎由細菌、真菌、病毒、支原體等非特定病原引起,主要病原有鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌(占病原菌的90%)[5]等,有些病原菌雖存在于乳房內,但不一定致病,因此,病原菌診斷并不可靠,只能根據病原菌的種類、數量初步診斷,而且該法成本高,需要時間長。

1.2 乳酶檢驗

乳中含多種酶,而許多酶在隱性乳房炎的病理過程中有十分重要的意義,所以乳酶作為奶牛隱形乳房炎的診斷指標已成為國內外研究的熱點。

用于奶牛隱性乳房炎檢測的酶指標有:髓過氧化物酶(MPO)、N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)、乳過氧化物酶(LP)、過氧化氫酶(CAT)、脂酶、谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)等[6]。如患隱性乳房炎的奶牛乳汁堿性磷酸酶(ALP)、脂酶等的活性高于健康牛乳[7]。國外已有商品化的MPO ELISA試劑盒,NAGase是乳腺上皮細胞破壞的標志。但酶活性受溫度、時間、p H、介質中的離子濃度、底物等的影響,決定了酶活性不是很穩定的指標,所以酶活性要成為診斷指標還需進行大量的研究和探索工作。

1.3 乳汁細胞學檢驗法

體細胞數是奶牛乳房健康狀況的一項重要指標,也是牛奶質量的一項重要指標,乳中體細胞由巨噬細胞、淋巴細胞、中性粒細胞、酸性粒細胞和各種乳腺上皮細胞等組成,每毫升牛奶中含有這些細胞的數量即為體細胞數(somatic cellcounts,SCC),其數量受年齡、胎次、泌乳期、季節、個體特征等因素的影響。健康奶牛的體細胞數小于105個/m L,大部分是巨噬細胞和淋巴細胞,患乳房炎時,乳汁中的體細胞數目增加(尤其白細胞數顯著增加),非正常升高的體細胞數表明乳腺的炎癥及其嚴重程度[8]。若體細胞數25～30萬個,表明乳腺受到感染;超過50萬個,表明已發生隱性乳房炎;超過100萬個,可能患有臨床型乳房炎[9]。

1.4 乳中體細胞直接計數法

1.4.1 顯微鏡計數法 最早的乳中體細胞直接計數法,是鮮乳涂片后,通過顯微鏡計數直接計算牛奶中SCC,是體細胞檢測中的標準方法,常用于校正其他方法的準確性,但速度較慢。

1.4.2 白細胞分類計數法 白細胞分類計數的刻度管檢驗法,是根據中性粒細胞占白細胞總數的多少來判定乳房炎的方法。中性粒細胞占白細胞總數的12%～20%定為可疑,20%以上則定為乳房炎[2]。

1.4.3 體細胞自動計數儀 用專門的體細胞自動計數儀來檢測乳中的體細胞數。如牛博士系列體細胞檢測法,取1滴生奶滴入試紙,再加3滴激活劑,插入檢測儀就能讀出體細胞準確數據[9]。丹麥福斯公司出品的Foss Matic 5000系列奶牛體細胞測定儀,全自動計算機操作,每小時可檢測樣品200～500個。Foss Matic 5000的工作原理是讓被染色的體細胞通過一個流路系統,此流路非常狹窄,這樣被染色的體細胞就會一個個的通過,體細胞的紅色光放大就可被光電倍增器作為光脈沖計數出來。

1.4.4 乳中體細胞間接計數法 乳中體細胞間接計數法原理為:乳汁中的體細胞在表面活性劑和堿性物質的作用下,脂類物質乳化,細胞破裂釋放出DNA,使乳汁產生沉淀或形成凝塊,根據沉淀或形成凝塊的強弱,間接判定乳汁體細胞含量。間接體細胞計數國外常用的為加州乳房炎檢測法(california mastitis test,CMT),國內有杭州 HMT,蘭州LM T,上海SMT,北京BMT、黑龍江 HM T等。北京農業大學以洗衣粉為主要成份配制乳房炎簡易診斷液。東北農學院潘軍等利用十二烷基磺酸鈉加指示劑制成改進CMT試液。此類診斷液種類雖多,但其原理相同,主要成分為陰離子表面活性劑。

1.5 乳酸度檢測法

正常鮮牛乳的pH6.2～6.6。乳房炎病牛乳汁的p H上升,呈堿性,堿性的高低反應炎癥的程度。

1.5.1 麝香草酚蘭檢驗法(BTB) BTB法有試管法和玻片法兩種,操作簡單,但檢出率較低,因顏色判斷易出現較大誤差甚至錯誤[10],特別是泌乳末期奶牛乳汁易出現假陽性。

1.5.2 試紙法 按保存于4℃的乳樣1滴直接滴于精密試紙上,按試紙顏色判定乳樣酸度。現有奶牛乳房炎試紙和BPB濾紙片。

1.5.3 酸度計檢驗法 酸度計的基本原理:指示電極(玻璃電極)的電極電位隨溶液中氫離子濃度變化而變化,而參比電極(甘汞電極)電極電位不變,所以將電極插入被測溶液后電池電動勢即與溶液的p H有關,進而測定其p H。

1.6 乳汁電導率檢查法

該法的技術依據是牛血漿與牛奶的滲透壓相等,健康奶牛乳汁滲透壓約75%由氯化鈉和乳糖形成。當奶牛患乳房炎后,乳上皮組織細胞產生乳糖能力下降,乳汁滲透壓降低,使血液成分滲進乳汁,特別使乳汁中氯化鈉含量增加,使乳汁電導率升高。方海田等研究表明,牛乳電導率的變化與體細胞數呈正相關[11]。

1.7 乳成分檢驗

隱性乳房炎乳的成分發生變化:例如乳糖含量降低,但乳糖下降程度與炎癥嚴重性不成正相關。乳蛋白量增加,其中血清淀粉樣A蛋白(SAA)、結合珠蛋白(Hp)被認為是炎癥反應最敏感的指標,陳國燦等通過對奶樣中SAA和Hp的檢測證明,健康奶牛乳中幾乎不含或含量很少以至無法檢測到,而在43%隱性乳房炎奶牛乳中均可檢測到SAA和Hp[12]。乳房炎乳的乳脂率顯著低于健康奶牛乳。

另外,還可用苛性鈉凝乳試驗、氯化物硝酸銀試驗等方法進行檢驗。

2 治療藥物及其使用方法

2.1 乳腫消膏

乳腫消膏是由黃柏、蒲公英、紫花地丁、三棱、莪術等10味中藥材制成的復方膏藥。方法:擠奶后,將乳房洗凈擦干,將藥膏加熱溶化后均勻涂于患病乳區1～2 mm厚,每個乳區約20 g,每兩天給藥1次,治愈后為鞏固療效再給藥1次。郭斌等臨床試驗發現該藥對奶牛隱性乳房炎治愈率達86.54%。

2.2 乳康寧及鹽酸左旋咪唑

李峰等用乳康寧和鹽酸左旋咪唑分別治療隱形乳房炎感染奶牛,方法為:試驗1組奶牛拌料飼喂乳康寧,劑量150 g/(d·頭),試驗2組拌料飼喂鹽酸左旋咪唑,劑量2.5g/(d·頭),均連喂5 d,結果:乳康寧對隱形乳房炎有效率為92.11%,治愈率為52.63%;鹽酸左旋咪唑有效率為58.97%,治愈率為10.25%。

2.3 生殖股神經封閉

奶牛站立保定,在患隱性乳房炎乳房一側3～4腰椎橫突間,距背中線6 cm～7 cm的背最長肌外緣斜進針,注入2%鹽酸普魯卡因溶液20mL。

2.4 消炎增乳散

消炎增乳散主要由蒲公英、金銀花、當歸、黃芪、蛇床子、木芙蓉花等十幾味中草藥粉碎而成。王飛等將消炎增乳散拌料喂服,每頭200 g/d,連用3 d,結果顯示,該藥對奶牛隱性乳房炎的治愈率為72.2%。

2.5 炎康注射液

炎康注射液主要成分為蟾酥與甘草。用炎康注射液5 m L加生理鹽水20mL稀釋,擠奶后注入陽性乳區,2次/d,試驗發現對奶牛隱性乳房炎療效較好。

2.6 生物制劑

生物制劑具有高效、無毒、無殘留等優點,是治療奶牛乳房炎的理想藥物。如酶制劑,試驗發現其有效率達 72.6%,溶菌酶有效率為85.60%～95.83%,還有細菌素、微生態制劑、乳鐵蛋白和乳鐵素、細胞因子、疫苗等都有很好的臨床作用,在奶牛乳房炎的防治中具有廣闊的應用前景。

2.7 其他藥物

還可用金銀花、知母、連翹、蒲公英、穿心蓮、黃芪等中草藥防治。或每噸料添加奶牛專用賜力健10～50kg,配合乳房內灌注抗生素。或用小蘇打粉50 g,每天 2次內服,連用6 d;補充維生素E和硒[9]。抗生素治療,周慶新等藥敏試驗證明奶牛乳房炎病原菌對頭孢噻吩鈉、諾氟沙星、氨芐西林、羧芐青霉素較敏感。

3 結束語

奶牛隱性乳房炎發病率為38%～62%,患病牛產乳量和乳品質下降,每頭牛產奶量平均減少約15%,因此,要加強奶牛隱性乳房炎的防治工作,堅持預防為主,防治結合的方針。其發病主要因飼養管理不當,環境因素不良造成的,還與胎次、泌乳時間、季節等有關,所以要注重加強奶牛飼養管理、重視環境和牛體衛生。

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Detection and Treatment of Bovine Subclinical Mastitis

YU Yan-guo,ZHANG Jin＊

(Gansu Polytechnic Co llege of Animal Husbandry&Eng ineering,Wu wei Gansu 733006,China)

Mastitis is one of the mostharmfuldiseases in dairy production,particularly subclinicalmastitis.Its symptom was not obvious and led to a decline in milk production of dairy cow s and low quality of milk.It also may spread to other cow s,leading to the spread of the disease.So through the changes of physiologicaland biochemicalindicators could test the situation of subclinical mastitis by milk testing.In order to reduce the incidence ofsubclinicalmastitis in dairy cow s and to increase their milk production,this paper summarized the detection methods such as microbiological testing,cytology,enzymology and using Ruzhongxiao plaster,Levamisole hydrochloride,Xiao Yan Zeng Ru pow der,biologicalagents,genitofemoralnerve seal treatment measures for bovine subclinical mastitis.

Dairy Cattle;Subclinical Mastitis;Detection;Treatment

S858.237.2+6

A

1001-9111(2011)04-0044-03

2011-03-28

2011-05-02

余彥國(1980-),男,甘肅天水市人,講師,主要從事畜牧獸醫教學研究。

＊通訊作者:張 瑾(1980-),女,甘肅白銀市人,講師,主要從事獸醫藥理學教學研究。