科技進展

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加工條件影響豬用冷壓油菜餅的營養消化能力

冷壓油菜餅是生物柴油生產的副產品，與機械壓榨和溶劑萃取相比，冷壓制得的餅粕含油量較高。由于當地富產油菜，因此，油菜餅有望成為一種很好的豬飼料。但冷壓油菜餅營養品質和抗營養因子的含量還不明確，并且因加工工藝的不同而變化。

本試驗對在4種工藝條件下加工的冷壓油菜餅進行了評價：在2×2因子設計中，以低速和快速螺旋壓榨分別在加熱和不加熱的條件下生產油菜餅。7頭安有回腸瘺管的去勢公豬（體重26kg）每天飼喂兩次，日糧為維持日糧的2.8倍，在7×7拉丁方設計中，日糧分別含有44%的冷壓菜籽餅、機械壓榨油菜餅、油菜籽和無氮日糧。試驗的目的是測量能量和氨基酸消化率及計算氨基酸標準回腸消化率（standardized ileal digestible， SID）和凈能（NE）。每9天的試驗期包含5天日糧適應期，2天收糞期和2天回腸消化物收集期，每種日糧獲得7個觀測值。冷壓菜籽餅含41%粗蛋白，16%乙醚提取物，5mmol總硫苷/g（干物質計——DM）。在不考慮交互效應的情況下，冷壓菜籽餅表觀腸道消化率（apparent ileal digestibility，AID）和總腸道消化率加熱的油菜餅比不加熱的高出36%（P＜0.05），快速螺旋壓榨油菜餅的比低速螺旋壓榨的高出8%（P＜0.05），說明加熱能提高能量消化率。冷壓菜籽餅的能量AID分別比機械壓榨和油菜籽高出13%和118%。測試的氨基酸營養成分的SID與是否加熱和螺旋壓榨轉速快慢存在交互效應，但此效應在氨基酸之間并不一致。冷壓菜籽餅的消化能（DE）和計算NE分別比機械壓榨菜籽餅高出0.73Mcal/kg和0.52Mcal/kg（P=0.001；DM計），但與油菜籽無明顯差異。冷壓菜籽餅的營養成分如下：DE 4.17Mcal/kg，NE 2.84Mcal/kg，SID Lys 0.87%，SID Met 0.46%，SID Thr 0.79%（均以DM計）。

總之，加工條件對冷壓油菜餅的可消化營養成分影響很大。乙醚提取物的含量是冷壓油菜餅能量值的最重要決定因素，但殘留的硫苷似乎不會破壞營養成分的消化。

譯自： Seneviratne RW，Beltranena E，Newkirk RW，et al.Processing conditions affect nutrient digestibility of cold-pressed canola cake for grower pigs.J Anim Sci，2011，89（8）:2452-2461.

山梨酸改善豬的生長性能并調控胰島素樣生長因子系統基因表達

山梨酸（SA）是一種具有共軛雙鍵的多不飽和脂肪酸（PUFA）。共軛脂肪酸如共軛亞油酸（CLA），是一種多功能的具有生物活性的脂肪酸，其具有促進生長的作用。通過測定平均日增重 （ADG，Average daily gain）、 平均日采食量（ADFI，Average daily feed intake）， 血清 IGF-I（胰島素樣生長因子）濃度，肝臟IGF-I的分泌和IGF系統基因的表達考察山梨酸對豬生長性能的影響以明確其作用機理。240頭21日齡杜洛克×長白×約克夏斷奶仔豬（6.86±0.02kg）隨機分為4組，每個組有3個圈，每個圈20頭仔豬（10公、10母）。所有仔豬飼養在溫控室內（26～28℃），自由飲水和采食。試驗為期42天，四個處理組斷奶仔豬日糧中添加山梨酸的量分別為0g/kg、0.5g/kg、2g/kg、4g/kg。3個山梨酸添加劑量均提高了仔豬21～42日齡的ADG和重料比（G:F）。日糧中添加4g/kg山梨酸處理組仔豬血漿中的甘油三酯濃度最高。山梨酸增加了血漿總蛋白和球蛋白濃度，并存在劑量效應（0.5g/kg，P ＞ 0.05;1g/kg，P ＜0.05;2g/kg，P ＜0.05）。 值得注意的是最小山梨酸添加劑量降低了血尿氮和糖皮質激素濃度 （P＜0.05）。在豬原代肝臟細胞中山梨酸增加了IGF-I、IGF-II、IGF-I受體 （IGF-IR）、PPARalpha基因mRNA的表達和IGFI的分泌（P＜0.05），但對IGFBP和PPARgamma mRNA的表達無影響。這些結果表明山梨酸通過調節IGF系統基因表達和激素分泌促進仔豬生長。

譯自： Luo ZF，Fang XL，Shu G，et al.Sorbic acid improves growth performance and regulates insulin-like growth factor system gene expression in swine.J Anim Sci，2011，89（8）:2356-2364.

ELISA方法用于檢測豬飼料中氟苯尼考和甲砜霉素

抗氟苯尼考和甲砜霉素的一個多克隆抗體用來生產競爭ELISA，用于檢測豬飼料中的氟苯尼考和甲砜霉素。ELISA對氟苯尼考50%抑制濃度（IC50）為1.02ng/mL。豬飼料藥物添加濃度0.05～3.0mg/kg，氟苯尼考和甲砜霉素日間回收率為86.4～118.6%，而兩種藥物的日內回收率為90.1～126.5%，變異系數（CV）低于15%。從高效液相色譜-串聯質譜法獲得的結果顯示，這個ELISA方法可以作為在豬飼料中檢測氟苯尼考和甲砜霉素的便捷方法。

譯自：Luo PJ，Jiang WX，Chen X，et al.TECHNICAL NOTE:Development of an ELISA for the determination of florfenicol and thiamphenicol in swine feed.J Anim Sci，2011Jul 1.[Epub ahead of print]

發明一個TaqMan實時PCR檢測豬博卡類病毒

目前發現的豬博卡類病毒是細小病毒家族成員，為博卡病毒屬，與豬病有密切的關系。幾個研究證明豬斷奶后多系統衰竭綜合征與博卡類病毒感染有關。但是博卡類病毒的感染流行和感染后的疾病仍不清楚。快速、可靠的分子診斷技術的應用，將有助于未來研究這種新病毒。因此，我們開發了一個敏感和特異的TaqMan實時PCR檢測博卡類病毒（Pbo-likeV）的NP1基因。可重復檢測20拷貝含有NP1基因的重組DNA質粒，檢測范圍包括六個數量級（102～107拷貝）的動態范圍。這個檢測與其他動物病毒沒有交叉反應。臨床發現博卡類病毒在中國豬群中感染率達到44.2% （114/258）。它在病豬中感染率極高（56.1%，101/180），健康豬的感染率相對較低 （16.7%，13/78），P＜0.05。這個檢測方法對于診斷和量化豬博卡類病毒是非常靈敏和特異的，為博卡類病毒感染的流行病學和致病研究提供了一個可靠工具。

譯自： Li B，Xiao S，Ma J，Liu Y，et al.Development of a novel TaqMan-based real-time PCR assay for the detection of porcine boca-like virus （Pbo-likeV）.Virol J， 2011， 8（1）:357.

典型豬瘟病毒通過調節單核細胞衍生的樹突狀細胞抑制細胞的成熟未激活NF-κB

典型豬瘟病毒（CSFV）損害宿主的免疫系統，導致豬只發病。樹突狀細胞（DCs）是最強的免疫反應的發起者。此試驗研究了典型豬瘟病毒對豬單核細胞衍生的樹突狀細胞（Mo-DCs）的影響。結果顯示DCs表面標志的表達沒有被削弱，例如MHC-II、CD80、CD83和 CD86，但是在感染典型豬瘟病毒后的48小時DCs表達CD172a明顯增加。培養的Mo-DCs在不同處理后48小時，通過Q-RT-PCR檢測細胞因子表達，細胞因子表達的剖面圖被描繪出來。結果暗示CSFV感染明顯增加IL-10、TNF-α的mRNA表達，抑制IL-12mRNA表達，而對IFN-α和IFN-γ的表達影響很小。試驗證明了CSFV不能激活感染的DCs中的NF-κB，以穩定的DNA連接NF-κB，p65/RelA不能從細胞漿遷移到細胞核，穩定的p65/RelA表達為特征。此外，Western blot分析顯示不活動的NF-κB導致了IκBα不能降解。數據表明 CSFV可以在DCs中復制，并且CSFV感染能調節共刺激因子和細胞因子的分泌，下調DCs成熟度，且沒有激活NF-κB。試驗結果暗示了CSFV逃避宿主先天免疫的機制，提供了一個研究CSFV發病機理的基礎。

譯自： Chen LJ，Dong XY，Shen HY，et al.Classical swine fever virus suppresses maturation and modulates functions of monocyte-derived dendritic cells without activating nuclear factor kappa B.Res Vet Sci，2011Jul 15.[Epub ahead of print]

日糧中加入海藻提取物和甘草精對豬免疫的影響

在豬業生產中，日糧中加入抗生素作為刺激生長抵御疾病的手段是常用的方法。由于公眾擔心食品安全和藥物殘留問題，可以用天然的植物提取物如海藻提取物和甘草精代替抗生素。

在這個研究中，我們評估了豬日糧中添加海藻提取物和甘草精對于提高豬的免疫力的作用。每組動物（一組8只）在42天和49天時被致敏，免疫球蛋白和細胞因子的表達通過ELISA和RT-PCR檢測。結果唾液中的IgA與對照組相比增加了5倍（56天）。海藻提取物處理組延遲過敏反應，使IgG的量增加1.8～2.0倍。另外，在甘草精處理組50天檢測到唾液中IgA含量提高兩倍，在51天檢測到唾液中IgA含量提高五倍，并且在甘草精處理組51天觀察到腫瘤壞死因子α信使mRNA低水平表達（約1/25）。

結論是用天然植物提取物代替抗生素添加到飼料中可提高豬只免疫力。

譯自： Katayama M，Fukuda T，Okamura T，et al.Effect of dietary addition of seaweed and licorice on the immune performance of pigs.Anim Sci J， 2011， 82（2）:274-281.

基因芯片和細胞因子分析豬腹瀉病病例

本研究比較了19個患腹瀉病的豬（這些豬有長期感染胞內勞森菌的歷史）和9個健康豬的腸道組織中、血清中細胞因子表達變化。增生性腸病（PE）以腹瀉、生長發育不良、血痢和突然死亡為特征，但是該病的免疫病理學還不清楚。通過組織病理學、PCR和血清抗體檢測證實胞內勞森菌和豬圓環病毒2型（PCV2）同時存在于腸道組織。血清中IL-1β、IL-6、 IL-10、 IFN-α、 IFN-γ、 TNF-α 和 TGF-β 通過免疫方法測定，腸道細胞因子和IL-12p40mRNA表達用qPCR檢測。取豬的腸腺瘤樣本（n=2）、增生性出血性腸病或豬痢疾樣本（n=2）、對照樣本 （n=2）進行全基因組基因芯片分析。PE臨床癥狀并不是總支持隨后的分析，腸道組織中存在PCV2可能對于增加腸道樣本中的IFN-γ的mRNA表達有一定的作用。芯片分析中限性基因表達以及在血清和腸中細胞因子受限表達，揭示了在最初感染胞內勞森菌的豬體內免疫反應激活不良。在兩頭豬腸道的突起黏膜增生中檢測到編碼胰島素樣生長因子結合蛋白3（IGFBP-3）的基因表達被上調。

譯自： Jacobson M，Andersson M，Lindberg R，et al.Microarray and cytokine analyses of field cases of pigs with diarrhoea.Vet Microbiol，2011Jun 15.[Epub ahead of print]