科技進展

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甘露聚糖酶和玉米干酒糟及可溶物對生長育肥豬生長性能、營養物質消化率和肌肉特性的影響

設計了4個試驗研究玉米干酒糟及可溶物（DDGS）配合甘露聚糖酶對生長育肥豬生產性能，能量和營養物質全消化道表觀消化率（ATTD），血液代謝指標和肌肉特性的影響。

試驗一，96頭生長豬（初始體重57.6kg）被分進4個處理，每個處理4個圈，每個圈6頭豬，飼喂含10%DDGS及甘露聚糖酶0、200、400和600U/kg的玉米大豆基礎日糧。日增重（ADG）和血糖隨著日糧甘露聚糖酶濃度的增加而增加（線性效應，P＜0.05）。隨著豬甘露聚糖酶飼喂水平的增加，干物質和粗蛋白的ATTD得到改善（二次效應，P＜0.05）。

試驗二，64頭育肥豬（初始體重92.7kg）被分進4個處理，每個處理4個圈，每個圈4頭豬，飼喂含15%DDGS及甘露聚糖酶0、200、400和 600U/kg玉米大豆基礎日糧。ADG、血糖、干物質、能量和粗蛋白的ATTD隨著日糧甘露聚糖酶水平增加而呈線性增加（P＜0.05）。

試驗三，利用2×2雙因子設計，將208頭生長豬（初始體重60.5kg）分進4個處理，每個處理4個圈，每個圈13頭豬，飼喂含0、10%DDGS及甘露聚糖酶0、400U/kg的玉米大豆基礎日糧。飼喂含有甘露聚糖酶的豬的ADG和血糖增加。豬的干物質和粗蛋白ATTD因日糧含有DDGS降低（P＜0.05）， 但因含有甘露聚糖酶而增加（P＜0.05）。

試驗4，利用2×2雙因子設計，將208頭育肥豬（初始體重86.5kg）分進4個處理，每個處理4個圈，每個圈13頭豬，飼喂含0、15%DDGS及甘露聚糖酶0、400U/kg的玉米大豆基礎日糧。飼喂含有甘露聚糖酶的豬的ADG和血糖增加 。 豬 的 干 物 質 （P＜0.05） 、 能 量 （P＜0.1） 和 粗 蛋 白（P＜0.05）的ATTD因日糧含有甘露聚糖酶而增加。肌肉特性和肉質沒有受到DDGS和甘露聚糖酶的影響。這些結果表明，傳統日糧中添加10%和15%的DDGS對豬的生長性能和肌肉特性沒有負面影響。另外，日糧中含10%和15%的DDGS并配以甘露聚糖酶400U/kg可以改善育肥豬生長性能和粗蛋白的ATTD。

譯自： Yoon SY,Yang YX,Shinde PL,et al.Effects of mannanase and distillers dried grain with solubles on growth performance,nutrient digestibility,and carcass characteristics of grower-finisher pigs.J Anim Sci,2010（88）： 181-191.

副豬嗜血桿菌細胞壁表面蛋白6-磷酸葡萄糖酸酯脫氫酶的特性及克隆表達

（His）（6）6PGD 蛋白引導 SJPLC 的 IL-8和 IL-6的產生。此外， 用（His）（6）6PGD 蛋白免疫在腹腔攻毒 5×LD（50）劑量的SH0165株副豬嗜血桿菌后能產生75%的保護率，免疫保護效果較好，說明6PGD具有很重要的細菌抗原性。了解6PGD蛋白的特性將有助于我們研究新的藥物和疫苗。

譯自： Fu S,Yuan F,Zhang M,et al.Cloning,expression and characterization of a cell wall surface protein,6-phosphogluconate dehydrogenase,of Haemophilus parasuis.Res Vet Sci，2011Aug 11.[Epub ahead of print]

在生產疫苗的細胞系和其他細胞系調查1型豬圓環病毒感染情況

1型圓環病毒（PCV1）在豬只中廣泛流行，最近美國報道允許輪狀病毒疫苗上市。從動物中提取的原料，比如細胞、胰島素和血清，是導致生物制品病毒污染的主要原因。

我們調查了從ATCC（美國模式培養物集存庫）獲得的許多細胞系中PCV1污染的情況（這些細胞系廣泛用于研究、診斷或者疫苗的研發）。在這些細胞系的建立和使用歷史上，由于使用的血清和胰蛋白酶沒有經過新的病毒滅活方法，也沒有通過目前實驗測試的記錄，預計這些細胞系已經感染牛和豬的病毒。這個研究顯示VERO、MRC-5和 CEFs,已經用于許多疫苗的生產，其他細胞系用于研究疫苗，包括MDCK、HEK-293、HeLa和 A549（上述所有細胞系用巢式PCR分析，PCV1陰性）；還有一些細胞系通過感染試驗分析確定為陰性。然而MDBK細胞系（用于動物疫苗生產的一個細胞系），雖然沒有分離到病毒，但是檢測到含有PCV1的基因序列。

雖然結果顯示，豬圓環病毒感染可能沒有在以前的培養條件下發生，最近發生的疫苗污染事件，提示人們應繼續重視預防從動物材料中引入病毒。

譯 自 ： Ma H,Shaheduzzaman S,Willliams DK,et al.Investigations of porcine circovirus type 1 （PCV1）in vaccine-related and other cell lines.Vaccine， 2011Aug 8.[Epub ahead of print]

編碼胸膜肺炎放線桿菌Ⅳ型菌毛基因的DNA疫苗引起強烈的免疫反應對血清型2型的菌株攻毒保護力有限

胸膜肺炎放線桿菌是革蘭氏陰性細菌能引起豬的胸膜肺炎，該病在全世界范圍內是一個致死性的疾病，傳染性極高。

我們之前的研究顯示編碼Apx外毒素結構蛋白ApxIA和ApxIIA的DNA疫苗，可有效對抗致死劑量的胸膜肺炎放線桿菌血清1型菌株攻毒。胸膜肺炎放線桿菌的疫苗研究由于疫苗的交叉保護力不確定而受阻（各血清型之間）。IV型菌毛蛋白ApfA已被證明是目前在各種血清型的胸膜肺炎放線桿菌中高度保守的。

一個新的DNA疫苗編碼ApfA（pcDNA-apfA）被構建，其對胸膜肺炎放線桿菌血清型2型菌株的攻毒保護力被評估。在免疫pcDNA-apfA以后，對于菌毛蛋白的抗體反應明顯，暗示了菌毛蛋白在體內的表達。通過對IgG亞型的分析（IgG1和 IgG2a）顯示pcDNA-apfA疫苗能激活Th1和Th2免疫反應。通過IgA分析顯示DNA疫苗也能提高黏膜免疫，然而，pcDNA-apfA疫苗雖然能產生大量菌毛蛋白的抗體，但是只能對攻毒（血清型2型的豬肺炎放線桿菌）產生有限的免疫保護率（30%）。這項研究的結果與前人的研究結果不同（Ⅳ型菌毛蛋白是一個廣譜有效的候選疫苗蛋白），表明菌毛蛋白在豬胸膜肺炎放線桿菌的疫苗開發中發揮的作用有限。

譯自： Lu YC,Li MC,Chen YM,et al.DNA vaccine encoding type IV pilin of Actinobacillus pleuropneumoniae induces strong immune response but confers limited protective efficacy against serotype 2challenge.Vaccine， 2011Aug 9. [Epub ahead of print]

中國東北部地區分離出新的豬呼腸孤病毒

我們分離出一個新的呼腸孤病毒（MRV-HLJ/2007），該病毒是從中國黑龍江省的豬身上分離出來的。基因組序列分析顯示MRV-HLJ/2007與SC-A株具有很近的遺傳學關系。SC-A株是2006年從四川的豬身上分離出來的。雖然系統發育分析顯示MRV-HLJ/2007可能來自于SC-A株，但這兩株病毒的M2和S3基因不同。系統發育分析顯示：除了S1基因與感染人的呼腸孤病毒不同，MRV-HLJ/2007和SC-A株的其他基因與感染人的呼腸孤病毒很接近。這些發現暗示了MRV-HLJ/2007株可能是一種流行在中國的呼腸孤病毒新毒株。

譯 自 ： Zhang C， Liu L， Wang P， et al.A potentially novel reovirus isolated from swine in northeastern China in 2007.Virus Genes， 2011Jul 15.[Epub ahead of print]

編碼口蹄疫病毒B和T細胞表位定位到豬白細胞抗原經典Ⅱ類分子的DNA疫苗在攻毒后對豬只起到保護作用

研發有效安全的口蹄疫病毒疫苗是非常重要的。以前我們實驗室的研究證實DNA疫苗編碼C型口蹄疫病毒（FMDV）的B和T細胞表位，能有效控制病毒在小鼠中復制，然而在豬身上卻沒有保護作用。

這個研究工作發現通過運用新的DNA疫苗（pCMVAPCH1BTT），編碼FMDV B和T細胞表位融合到單鏈可變區（1F12小鼠抗豬白細胞抗原經典Ⅱ類分子的單克隆抗體），以增加在豬上的保護力，DNA疫苗免疫的豬只攻毒后得到100%的保護，然而其余的豬只與對照組相比為部分保護，顯示出延遲、短暫和溫和的病癥。疫苗免疫得到完全保護的豬只在FMDV攻毒之前激活相關分泌特異的IFNγ的T細胞，在FMDV攻毒之后，很快產生大量中和抗體。說明該DNA疫苗與免疫反應相關的所有結構都起到保護作用。我們的試驗結果找到了一個研究FMDV亞單位疫苗的新方向。

譯 自 ： Borrego B,Argilaguet JM,Pérez-Martín E,et al.A DNA vaccine encoding foot-and-mouth disease virus B and T-cell epitopes targeted to class II swine leukocyte antigens protects pigs against viral challenge.Antiviral Res， 2011Jul 26.[Epub ahead of print]

開發A型口蹄疫單克隆抗體

為了開發A型口蹄病毒（FMDV）單克隆抗體（mAb），BABL/C小鼠用A型FMDV免疫。抗A型FMDV的單克隆抗體（mAb）7B11和8H4被SP2/0骨髓瘤細胞和脾細胞融合的細胞表達出來。單克隆抗體7B11和8H4的滴度分別為1024和512。所有的mAb都包括κ輕鏈，mAb為IgG1。為了確定mAb鏈接表位，用間接ELISA研究這些mAb對A型口蹄疫病毒的反應，結果顯示兩種mAb都與A型FMDV作用。這些mAb可以在未來用于FMDV疫苗、診斷方法、預防、病原學及免疫研究。這些mAb沒有與豬水皰病毒（SVD）或O型，亞洲1型和C型FMDV的交叉反應。腹水中它們的滴度分別為 1： 5×106and 1： 2×106,7B11為 IgG1亞型,8H4為IgG2b亞型。mAb可以用來臨床檢測A型FMDV。

譯自： Lin T,Li J,Shao JJ， et al.Develope monoclonal antibody against foot-and-mouth disease virus A type.Virol Sin，2011， 26（4）:273-278.