白細胞介素-20在類風濕關節炎患者血清中的表達及影響因素探討

鄭遜

類風濕關節炎(rheumatoid arthritis，RA)是一種常見的以關節炎癥和滑膜細胞增殖為特征的全身性自身免疫性疾病，臨床上以多關節損傷為主要表現，具有較高致殘性。本病至今發病機制尚未被闡明，眾多資料表明該病與免疫系統調節功能紊亂有關，多種細胞因子的參與是引起RA發生的重要因素。而且近年研究證實一些炎性細胞因子如腫瘤壞死因子-α(TNF-a)、白細胞介素-1(IL-1)、IL-18、IL-6 等在 RA 滑膜病變中起核心作用。本研究旨在探討IL-20在RA患者血清中的表達水平，并分析其影響因素。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2009年1月至2010年1月在我科就診的55例 RA患者，年齡35～72歲，平均(51.37±12.32)歲。其中女42例，年齡36～71歲，平均(54.47±11.26)歲;男13例，年齡35～72歲，平均(48.62±13.28)歲。所有患者均符合美國風濕病學會1987年修訂的類風濕關節炎診斷標準，均未經正規治療，采血前無近期服用糖皮質激素及其他免疫抑制劑治療史，且未合并感染、腫瘤及其他結締組織疾病。同時選取29例正常人群作為對照組，排除高血壓、糖尿病等疾病，年齡33～70歲，平均(50.56±12.08)歲。其中女20例，年齡33～68歲，平均(49.32±13.16)歲，男9例，年齡36～70歲，平均(51.57±12.17)歲。經檢測，兩組在性別、年齡上相近，差異無統計學意義。

1.2 主要試劑 人IL-20定量EIA試劑盒，試劑由上海森雄科技實業有限公司提供。

1.3 實驗方法 采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

1.3.1 標本采集 留取兩組血清，3000r/min離心10 min，取上清，置于-20℃保存備檢，同批檢測。洗滌液用重蒸水1∶20稀釋。使用前配制底物工作液，將鄰苯二胺片放入底物稀釋液中溶解，每片加液5 ml。標準品液配制則為使用前每管中加入蒸餾水200 μl溶解后即可。

1.3.2 試驗流程 建立標準曲線，加樣，反應板置于37℃水浴120 min，洗板。加入第一抗體工作液，溫育，再洗板。加酶標抗體工作液，再次洗板，加入底物工作液100 μL，置37℃暗處反應5～10 min。加入終止液混勻，在492 nm處測吸光值。

1.3.3 觀察指標 患者在采集血清標本同時檢測類風濕因子(RF)、C反應蛋白(CRP)、紅細胞沉降率(ESR)。

1.4 統計學方法 采用SPSS 13.0統計軟件進行分析。計量資料采用t檢驗，計數資料應用χ2檢驗，組間比較用方差分析，以P＜0.05具有統計學意義。

2 結果

2.1 組間血清IL-20濃度比較 類風濕關節炎患者血清中IL-20水平為(31.74±30.86)×10-3g/L，對照組血清中IL-20水平為(14.67±7.15)×10-3g/L。RA患者血清中IL-20水平顯著高于對照組(P＜0.001)，差異有統計學意義。

2.2 類風濕關節炎患者IL-20與RF、CRP、ESR相關性分析

將L-20濃度與RF、CRP、ESR進行秩相關檢驗，結果提示RA患者的IL-20血清濃度與 RF、CRP、ESR無相關性。見表1。

表1 IL-20與RF、CRP、ESR相關性分析

3 討論

類風濕關節炎是免疫介導的炎癥性疾病，發病率為0.3% ～4%，平均為1%。主要臨床表現為對稱性、進行性及侵蝕性的關節炎癥，主要病理表現是滑膜細胞增生，多種炎性細胞浸潤，血管翳形成，繼而侵犯關節軟骨、軟骨下骨、韌帶和肌腱等，造成軟骨、骨和關節囊損壞，如不能早期發現并及時治療，最終將導致關節強直、畸形和功能喪失。至今RA病因及發病機制不清，一般認為與遺傳、環境等因素有關。在其致病過程中，伴隨多種免疫活性細胞的活化及細胞因子、炎癥介質的共同參與。細胞因子是RA損傷的重要介質，貫穿于RA發展的始終，與其發病機制改變、治療及預后有著密切的關系。

IL-20是近年來發現的IL-10相關細胞因子家族的新成員，主要由活化的單核細胞產生，與IL-10有28%的同源性，與其他IL-10家族成員如IL-19、IL-22、IL-24在氨基酸序列上具有一定的同源性，但生物學功能卻不盡相同。研究發現：①IL-20可以促進TNF-α、單核細胞趨化蛋白(MCP)等致炎因子的分泌和表達。②促進角質細胞的增生和分化。

Hsu等研究了16例RA患者、32例骨關節炎患者及8例痛風患者，發現RA患者關節液中IL-20水平明顯高于骨關節炎和痛風的患者，但3組病例IL-20血清水平并無差異;同時證實RA患者關節滑膜中有IL-20R表達，其滑膜成纖維細胞(RASFs)表達 IL-20受體復合物，IL-20能激活 RASFs的ERK-1/2(細胞外信號調節激酶)［1］。本試驗結果表明：RA患者血清中IL-20水平顯著高于對照組，但與其RF、CRP、ESR無相關性。對比上一研究中對照為骨關節炎和痛風的結果有所不同。上一研究IL-20血清水平組間差異統計學意義不顯著，可能與病例數相對少有關，也有可能骨關節炎和痛風IL-20水平比正常人高，而與類風濕關節炎無差異，在這方面尚需進一步研究證實。本研究提示IL-20可能與RA相關，但尚無證據說明其與RA的活動性及關節破壞程度相關。RA血清IL-20水平較正常對照高可能的原因有［2］：①IL-20作為RA發病的始動因素之一，與滑膜等組織的IL-20R結合，促進TNF-α等炎癥介質產生，參與RA發病。②RA患者與炎癥正相關的基因處于上調水平，外周血中的單核細胞等分泌IL-20增多。③RA滑膜等局部組織分泌IL-20增加，致關節液及血清中水平升高。④RA患者炎癥介質增多，細胞因子網絡失衡，刺激IL-20產生增加。以上可能均有待進一步研究。

雖然類風濕關節炎存在一些IL的升高或下降，但不能簡單地認為降低的IL即具保護作用，升高的IL則具致病作用。多種細胞因子間的相互作用可能更為重要。目前有關類風濕關節炎與IL-20的研究與其他IL相比相對較少，但是從IL-20生物學功能以及類風濕關節炎發病特點上都提示二者存在緊密聯系。雖然目前研究結果尚不能直接證實是何種聯系以及相關性，但進一步的研究與試驗仍在繼續，希望能從更深入角度探討二者關系，加深對類風濕關節炎病因及發病機制的認識，為類風濕關節炎的臨床診治提供新的思路。

［1］Hsu Y H，LI H H，HSIEH M Y，et al.Function of Interleukin-20 as a proinflammatory molecule in rheumatoid and experimental arthritis.Arthritis Rheum，2006，54(9)：2722-2733.

［2］蒲曉英，楊南萍，李敏.類風濕關節炎患者血清白介素-20水平及影響因素研究.華西醫學，2009，24(8)：2054-2056.