規模化奶牛場口蹄疫O-Asia 1型二價滅活苗不同免疫程序免疫抗體水平分析

張潤祥,高明春,劉慧環,曹永生,王曉東,王君偉

(1.東北農業大學動物醫學學院,黑龍江 哈爾濱 150030;2.哈爾濱良種奶牛繁育中心,黑龍江 哈爾濱 150069)

口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的以感染偶蹄動物為主的急性、熱性、高度接觸傳染性和快速遠距離傳播的動物疫病,以傳染性強、傳播速度快、危害嚴重而著稱。世界動物衛生組織(OIE)將其列為必須通報的多種動物共患傳染病之一,我國將其列為一類動物傳染病。根據OIE公布數據,2009年內地全年通報了16起口蹄疫疫情,感染動物主要為牛,其中的7起為我國過去未見的A型口蹄疫感染,其余均為A sia 1型感染。2010年又報道多起牛、羊A型FMDV豬O型FMDV。因此,口蹄疫的防控任務依然艱巨。

我國家畜口蹄疫的防控,以免疫接種措施為核心,輔以其他防控措施如監測、檢疫、隔離、封鎖、撲殺、消毒等相結合來控制疫情蔓延和流行。我國對口蹄疫實行強制免疫,通過牛群整體免疫水平的提高來預防口蹄疫的感染和流行,要求免疫密度必須達100%,免疫抗體合格率≥70%判定為合格。因此,對于規模化奶牛場,制定并實施合理的免疫程序,對于口蹄疫的防控至關重要。本試驗中,我們選擇了黑龍江省具有代表性的3個規模化奶牛場(免疫程序不同),從2006年到2010年每年按比例抽檢

一定數目的血清樣本,進行1～2次的免疫抗體檢測,評估規模化奶牛場口蹄疫不同免疫程序的免疫效果。

1 材料與方法

1.1 疫苗 口蹄疫O型-Asia 1二價滅活疫苗,主要來源于金宇保靈生物藥品有限公司、中牧實業股份有限公司蘭州生物藥廠、中農威特生物科技股份有限公司等國家口蹄疫疫苗定點生產企業。疫苗的使用按說明書進行。

1.2 免疫程序 牛場A,存欄100多頭,每年免疫2次,間隔時間為6個月。牛場B,存欄奶牛近1400頭,每年免疫3次,間隔4個月。牛場C,存欄奶牛近1000頭,每年免疫4次,每次間隔3個月。犢牛出生3～4個月首免,1個月后二免,以后按上述免疫程序免疫。為防止免疫副反應,可多點多次注射。

1.3 血清樣品 免疫后21～30 d采集血清。所有血清樣品均從A、B、C 3個規模化奶牛場按一定比例抽檢,每次40～80份血清,每年抽檢1～2次。

1.4 檢測試劑 O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒,批號 2008022001,2009050403和2010011201等;Asia 1型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒,批號2008030502,2009050402和2010011103等,購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所。所有操作按試劑盒說明書進行。結果判定:ELISA抗體效價大于1∶128時,判為抗體陽性。ELISA抗體效價與免疫牛攻毒保護的關系為抗體效價≥1∶128,99%以上保護;＜1∶16不保護;1∶22～90,50%保護。按照每年出臺的《高致病性禽流感和口蹄疫等主要動物疫病免疫方案》規定,ELISA抗體效價≥26判定為合格。

2 結果與分析

A奶牛場2006～2009年每年抽檢40～60份血清樣本,O型和A sia 1型口蹄疫免疫抗體的陽性率即抗體效價≥1∶128,提供99%以上保護的牛只所占牛群的比率在45%～70%之間;免疫抗體合格率在65%～80%之間,O型免疫抗體水平每年差異不大,A sia 1型免疫抗體合格率其中2年未達到國家規定的70%水平(表1)。B奶牛場2006～2009年每年抽檢50～80份樣品,2010年檢測160份樣品,O型和Asia 1型口蹄疫免疫抗體提供99%以上保護的牛只所占牛群的比率在80%～92%之間;免疫抗體合格率在85%～98%之間,O型和Asia 1型免疫抗體水平差異不大,2010年免疫抗體水平較之前低是因為抽檢的160份血清中含有較大比例的未免疫犢牛,其母源抗體水平較低(表2)。C奶牛場O型免疫抗體水平較高,陽性率和合格率幾乎均在90%以上,Asia 1型免疫抗體水平稍低,但合格率均在75%以上(表3)。

綜合分析:(1)規模化牛場抽檢奶牛O型和A-sia 1型抗體水平合格率基本都超過國家所要求的70%水平。其中 B和C牛場奶牛免疫合格率在90%左右,而能夠提供99%保護的牛只占抽檢奶牛的比例達80%左右。(2)2008～2009年抽檢奶牛免疫抗體水平2006年比較有一定程度的提高,但總體水平均較高,如C牛場Asia 1型口蹄疫免疫抗體水平2006～2009年的免疫合格率分別為:75.0%～82.5%、93.8%～96.7%。這得益于各牛場對口蹄疫等重大動物疫病的逐漸重視,以及在環境衛生、生物防控、疫苗免疫、消毒凈化、舒適度建設等方面進行綜合防控的結果。(3)口蹄疫的免疫抗體水平與免疫次數呈正相關,以O型口蹄疫免疫抗體水平為例,C牛場免疫口蹄疫雙價滅活苗4次/1年,其免疫抗體合格率平均97.3%(214/220)高于B牛場(3次/年)的免疫抗體合格水平89.3%(366/410),并且明顯高于A牛場(2次/年)合格率73.8%(177/240)的水平。

表1 A奶牛場O型和Asia 1型口蹄疫免疫抗體水平檢測

表2 B奶牛場O型和Asia 1型口蹄疫免疫抗體水平檢測

表3 C奶牛場O型和Asia 1型口蹄疫免疫抗體水平檢測

因此,推薦規模化奶牛場免疫程序為每年3～4次免疫,以使奶牛群體常年保持較高的免疫抗體水平(大于80%),從而預防口蹄疫的發生。在2009年和2010年初全國多起牛口蹄疫發生的情況下,3個規模化牛場均未感染口蹄疫,常年的綜合防控和合理的免疫程序發揮了重要作用。