雞群反復(fù)發(fā)生強耐藥葡萄球菌感染的診斷與病因分析

陸新浩,陳秋英,劉 鴻,諸明濤,黃建勇,任祖伊,吳 勇

(浙江省余姚市禽畜病防治研究所,浙江 余姚 315400)

2010年9月份以來寧波某雞場10多萬羽海藍白雞群反復(fù)發(fā)生一種以皮下、翅膀等部位潰瘍并滲出暗紅黃色膠凍樣物為特征的病癥,導致雞群存活率與生產(chǎn)性能下降,造成一定的經(jīng)濟損失。本研究所禽病門診部對送檢病死雞進行臨床和實驗室診斷,結(jié)果發(fā)現(xiàn)該雞群感染的是金黃色葡萄菌,并通過藥敏試驗篩選治療藥物,發(fā)現(xiàn)所分離細菌對常見的35種抗生素(包括多種人用抗生素與禁用藥)產(chǎn)生了極強的耐藥性,對其中的20種抗生素完全產(chǎn)生了耐藥性。因此,我們對其原因進行分析與探討。現(xiàn)報告如下。

1 發(fā)病特點

2010年9月份,該雞場的1號雞舍共2萬羽16周齡的種雞在注射傳染性鼻炎疫苗后2 d,雞群大量排出白色糞便,繼而出現(xiàn)綠色糞便,精神沉郁,羽毛松亂,皮膚潰爛出血,采食量降低約20%,死亡率為1%,使用阿莫西林和環(huán)丙沙星進行治療無效,送本所求治,之后10月重發(fā),此次死亡率高達5%,2～5號雞舍9月份舊鐵籠飼養(yǎng)的雞先發(fā)病,治愈之后,這4號雞舍的雞在之后的2個月中陸續(xù)發(fā)病,總死亡率1%,反復(fù)治療多次無效后,送我門診部求助。經(jīng)臨床調(diào)查發(fā)現(xiàn),雞群發(fā)病有以下幾個特點:(1)在9～10月全場共10多萬羽海藍白雞幾乎都感染了金黃色葡萄球菌。全場雞群平均死亡率達1%,有的雞舍死亡率高達5%。(2)感染雞群對畜禽生產(chǎn)常用抗生素幾乎都產(chǎn)生了耐藥性,用常規(guī)藥物治療效果或不夠理想。藥敏試驗也驗證了這一現(xiàn)象。(3)發(fā)病雞群經(jīng)敏感藥物治療康復(fù)后20～30 d,會重復(fù)發(fā)病,說明雞金黃色葡萄球菌的發(fā)病具有反復(fù)性。(4)雞群在發(fā)生金黃色葡萄球菌流行過程中我們還發(fā)現(xiàn)雞群飼養(yǎng)密度過高(10～11羽/籠)的雞群發(fā)病較重,飼養(yǎng)密度低(4～5羽/籠)的雞群發(fā)病較輕。(5)同一雞場的土雞群未見發(fā)病。

2 剖檢病變

9月和10月送檢的3批死亡雞翅膀部潰爛,羽毛被滲出物染成暗紅色,剖檢病死雞可見皮下組織潰爛,皮下有黃色膠凍樣水腫物,肌肉暗紅,肝臟有少量白色壞死點,偶見覆蓋少量假膜,腹腔發(fā)出酸臭味兒。

3 細菌分離鑒定

取病死雞肝臟及潰爛組織,無菌操作取樣接種鮮血瓊脂平板,37℃恒溫培養(yǎng)24 h,挑取單個菌落進行革蘭染色,并劃線接種麥康凱培養(yǎng)基,另外接種微量生化反應(yīng)管與使用氧化酶試紙進行檢測。

4 藥敏試驗

送檢的3批死亡雞分離到的細菌,挑取單個菌落均勻涂布鮮血平板,后用無菌小鑷子均勻的貼上藥敏紙片,37℃恒溫培養(yǎng)12 h后讀取結(jié)果[1-2]。

5 SPF雞發(fā)病試驗

10羽15日齡SPF雞平均分成2個組,第1組挑取純培養(yǎng)的 5個菌落與1 m L滅菌生理鹽水混合,皮下注射0.1 mL/羽,隔離飼養(yǎng)并記錄發(fā)病情況,發(fā)現(xiàn)死亡雞立即剖檢并進行細菌分離和鑒定。第2組為空白對照組。

6 結(jié)果

6.1 細菌分離鑒定結(jié)果 培養(yǎng)24 h后血平板上長出金黃色、光滑、隆起的較大菌落,菌落周圍有明顯的不完全溶血環(huán),挑取單個典型菌落進行革蘭染色可見2個、4個相連或連成串的革蘭陽性球菌,生化結(jié)果顯示,本菌發(fā)酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇等,不發(fā)酵木糖,氧化酶試驗陰性,細菌能使兔血漿發(fā)生凝集現(xiàn)象(見表1),鑒定為金黃色葡萄球菌。第3次送檢的病死雞還分離到在麥康凱培養(yǎng)基上為桃紅色的革蘭陰性小桿菌,經(jīng)生化鑒定為大腸桿菌。

表1 生化試驗結(jié)果

6.2 藥敏試驗結(jié)果 紙片法藥敏試驗結(jié)果見表2。從表2可見,對喹諾酮類、林可胺類、酰胺醇類、四環(huán)素類等20種抗菌藥完全耐藥,對青霉素類和氨基糖苷類藥物大部分耐藥,對4種頭孢類藥物比較敏感,不過前后3次分離到的細菌對相同藥物的敏感性逐漸降低。

表2 藥敏試驗 (mm)

6.3 SPF雞發(fā)病試驗結(jié)果 第1組的試驗雞皮下注射葡萄球菌后,16 h死亡1羽,剖檢死雞,可見皮下有少量膠凍狀物,肝有少量壞死點,心包出血,其余試驗雞排出大量白色糞便,精神沉郁、羽毛松亂、雞冠發(fā)黑、食欲廢絕,接種部位水腫。48 h出現(xiàn)第2羽死亡雞,剖檢可見皮下有大量膠凍狀物,有酸臭味,肝臟有白色壞死點,腹腔有少量黃色滲出物,可檢測到金黃色葡萄球菌。其余存活試驗雞可見接種部位及周圍皮膚破潰、化膿,排綠色稀糞,雞冠發(fā)黑,精神沉郁,扎堆,呆立于一角。攻毒試驗組發(fā)病率100%,死亡率40%。空白對照組則無發(fā)病現(xiàn)象。

7 病因分析與討論

根據(jù)臨床癥狀、剖檢病變、細菌分離鑒定與致病性試驗,可知導致該雞場雞群發(fā)病的病原菌為金黃色葡萄球菌,后期并發(fā)大腸桿菌病。

調(diào)查得知,該海藍白種雞場飼養(yǎng)史較長,鐵籠陳舊,設(shè)計不合理,籠內(nèi)有許多金屬接口暴露在外,部分焊接口脫落形成“毛刺”,由于飼養(yǎng)密度過大,與鐵籠摩擦的可能增加,雞皮膚破損的幾率增大,加上轉(zhuǎn)群時操作粗暴、給雞帶翅號及免疫等造成的損傷,使雞群發(fā)生葡萄球菌病。疾病首次發(fā)生后,通過藥敏試驗篩選出有效藥物,治療雞群痊愈后,各種致病條件沒能有效去除,包括過高的飼養(yǎng)密度、破舊的雞籠等,葡萄球菌病再次發(fā)生,最終出現(xiàn)反復(fù)發(fā)生的現(xiàn)象。

金黃色葡萄球菌強的耐藥性與該雞場常年反復(fù)盲目的在飼料中添加各種抗生素有關(guān),結(jié)果是在發(fā)病時無有效藥物可選用。該雞場葡萄菌病反復(fù)發(fā)生,而細菌的耐藥性逐漸變得更加嚴重。

近年來,有關(guān)雞群感染免疫抑制病導致雞群免疫力下降的文獻很多,特別是禽白血病等一些免疫抑制病對雞群危害越來越大,我們也對該雞場2個品種的雞群進行了白血病的抽檢調(diào)查,結(jié)果顯示,該場海藍白雞群抽檢樣品禽白血病陽性率高達43%,另一種土雞群陽性率僅6.6%,明顯低于海藍白雞群。因此認為禽白血病病毒的感染在葡萄球菌病反復(fù)發(fā)生中起到了一定的促進作用。但是否是導致雞群反復(fù)發(fā)生強耐藥葡萄球菌感染的主要病因之一,仍有待于進一步的研究。

針對反復(fù)發(fā)生的嚴重耐藥葡萄球菌病,除了加強平時的飼養(yǎng)管理外,該雞場應(yīng)采取如下措施進行預(yù)防:首先,清除雞籠上造成外傷的金屬鉤等異物,避免雞受到外傷;其次,減少飼養(yǎng)密度,每籠按照標準飼養(yǎng)4～5羽雞;再次,盡量減少往飼料中盲目添加抗生素;最后,對祖代或者父母代種雞群進行白血病的凈化,減少免疫抑制病的發(fā)生與傳播。

[1]劉新金,周寶坤.雞金黃色葡萄球菌的分離鑒定及藥敏試驗[J].家禽科學,2007(6):34-35.

[2]程國富,王德海,谷長勤,等.45種藥物對雞關(guān)節(jié)源性金黃色葡萄球菌的體外抑菌效果[J].動物醫(yī)學進展,2004,25(6):87-89.