LiCA光激化學發光檢測儀應用評價

韓文明

（中國航天科技集團公司七三八療養院醫療部檢驗科，江蘇 無錫 214081）

光激化學發光免疫技術是一種利用化學發光物質進行免疫測定的方法，其基礎原理是一種均相免疫反應。它是基于兩種微粒表面包被的抗原或抗體，在液相中形成免疫復合物而將兩種微粒拉近，在激光的激發下，發生微粒之間的離子氧的轉移，進而產生高能級的紅光，通過單光子計數器和數學擬合將光子數換算為靶分子濃度。而當樣本不含靶分子時，兩種微粒間無法形成免疫復合物，兩種微粒的間距超出離子氧傳播范圍，離子氧在液相中迅速淬滅，檢測時則無高能級紅光產生。LiCA與傳統的化學發光分析儀在方法和原理等方面存在一定差異，為保證檢測結果的準確性，在使用中與i2000SR的測定結果進行對比評價。

1 材料與方法

1.1 標本來源

收集標本來自到中國航天科技集團公司七三八療養院健康體檢的中國航天科技集團公司上海第八研究院職工，共100例。

1.2 儀器與試劑

博陽生物科技（上海）有限公司的LiCA光激化學發光檢測儀及原裝配套試劑，美國雅培公司的i2000SR化學發光微粒子免疫分析儀及原裝配套試劑，定值血清由博陽生物提供。檢驗過程均按照試劑和儀器操作說明書進行。

1.3 方法

所有標本均抽取清晨空腹靜脈血4mL，離心分離血清待測。兩種儀器同時檢測100份血清中AFP和CEA，且用LiCA分別檢測AFP和CEA兩項指標的低、高值定值血清。由于兩種儀器檢測方法不同，其檢測項目的正常范圍也不同。參考值：LiCA AFP 0～7ng/mL、CEA 0～8.2ng/mL；i2000SR AFP 0～13.4ng/mL、CEA 0～5ng/mL。

1.4 統計學分析

用SPSS13.0統計軟件進行數據分析，兩組間采用配對t檢驗和直線回歸分析。

2 結 果

2.1 相關性試驗

用LiCA和i2000SR同時對100份血清標本檢測AFP和CEA兩項指標，檢測結果見表1。由表1可見，LiCA和i2000SR兩種儀器檢測結果具有很好的相關性，且無顯著差異（P＞0.05）。

表1 LiCA與i2000SR檢測AFP和CEA結果比較（n=100）

2.2 準確度和精密度試驗

用LiCA檢測AFP和CEA的低、高值定值血清（批號AFP：C1004；CEA：C1012）各測定20次，得低值和高值批內精密度，CV在1.95%～4.65%之間，檢測結果見表2。由表2可見LiCA檢測結果準確度高，精密度好。

表2 LiCA檢測AFP和CEA的低、高值定值血清的測定結果

3 討 論

LiCA檢測原理源于LOCI（luminescent oxygen channeling immunoassay，LOCI）技術，最初由Ullman等[1]在1994年報道，后由PerkinElmer公司生產相關試劑。該技術采用了納米級顆粒，增加了反應表面積，極大地提高了檢測靈敏度，這種納米顆粒在液相中保持穩定的懸浮狀態，并借助于“結合則發光”原理，實現了均相、一步、免清洗和高通量檢測[2]。檢測過程不易受到熒光淬滅現象、樣本常見干擾物質、pH值、離子強度及溫度等因素的影響，保證了檢測穩定性[3-5]。

本實驗100例血清標本分別用LiCA和i2000SR同時檢測AFP和CEA，各項目的相關系數均＞0.96；兩種儀器對各項目檢測結果配對t檢驗，P＞0.05，表明LiCA和i2000SR具有較高的相關性。

對定值血清檢測結果表明，LiCA具有較好的準確性和精密度，本法的批內CV＜5%與其他文獻的報道基本一致[6,7]。LiCA是均相免疫測定法，避免了酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、放射免疫法（RIA）等檢測方法中繁瑣的分離和洗滌步驟，且由于微粒表面積的增加，提高了檢測的靈敏度。

LiCA以其獨特的檢測技術實現了均相、免清洗檢測且具有標本用量少、檢測速度快、成本低等優點，適用于臨床和大批量健康體檢人群腫瘤篩查的檢測。

[1]Ullman EF,Kirakossian H,Singh S,et al.Luminescent oxygen channeling immunoassay: measurement of particle binding kinetics by chemiluminescence[J].Proc Natl Acad Sci,1994,91(12):5426-5430.

[2]Ullman EF,Kirakossian H,Switchenko AC,et al.Luminescent oxygen channeling assay(LOCITM):sensitive,broadly applicable homogeneous immunoassay method[J].Clin Chem,1996,42(9):1518-1526.

[3]Poulsen F,Jensen KB.A luminescent oxygen channeling immunoassay for the determination of insulin in human plasma[J].Biomol Screen,2007,12(2):240-247.

[4]Li Y,Choi M,Cavey G,et al.Crystallographic identification and functional characterization of phospholipids as ligands for the orphan nuclear receptor steroidogenic factor-1[J].Mol Cell,2005,17(4):491-502.

[5]Motola DL,Cummins CL,Rottiers V,et al.Identif i cation of ligands for DAF-12 that govern dauer formation and reproduction in C.elegans[J].Cell,2006,124(6):1209-1223.

[6]高云朝,趙衛國.光激化學發光法檢測甲胎蛋白實驗性能評價[J].檢驗醫學,2009,24(8):578-581.

[7]Le Moigne F,Beauvieux MC,Derache P,et al.Determination of myoglobin: comparative evaluation of the new automated VIDAS assay with two other immunoassays[J].Clin Biochem,2002,35(4):255-262.