止嗽立效丸的抗炎及調節免疫作用的實驗研究

陳魁敏 沈春紅 郝 偉 余秋穎*

（1 沈陽醫學院機能實驗室，遼寧 沈陽 110034；2 沈陽醫學院沈洲醫院，遼寧 沈陽 110002）

止嗽立效丸是由麻黃、石膏、葶藶子、苦杏仁、甘草、嬰粟殼所組成的中藥復方制劑，具有止咳平喘、抗炎、提高機體免疫力的作用，臨床應用療效可靠。現將其抗炎、調節免疫力的實驗報道如下。

1 實驗材料

1.1 材料

止嗽立效丸由赤峰天奇制藥有限公司提供，批號080713；消咳喘由哈爾濱松花江制藥廠生產，批號061213；阿司匹林山東興華制藥廠生產；角叉菜膠由沈陽藥科大學購入。

1.2 動物

昆明種小鼠，體質量l8～24g，Wistar大鼠，體質量150～200g，雌雄兼用，均由沈陽醫學院實驗動物研究中心提供。

2 方法與結果

2.1 小鼠二甲苯耳腫脹法

取小鼠50只，隨機分成5組：生理鹽水對照組，阿司匹林6g/kg和止嗽立效丸1.5、3.0、6.0g/kg組，空白對照組。止嗽立效丸組每天灌胃給藥1次，連續2d。阿司匹林第2天灌胃給藥1次，于第2天給藥1h，右耳兩面滴二甲苯0.05mL/只，致炎30min后頸椎脫白致死，用直徑6mm打孔器取左右兩面耳同一部位圓耳片，用分析天平稱重，以兩耳片重量之差為腫脹度進行t檢驗。結果：止嗽立效丸6g/kg組和阿司匹林6g/kg組對小鼠耳腫脹有抑制作用。結果見表1。

表1 止嗽立效丸對小鼠耳腫脹度的影響[n＝10，（±s）]

表1 止嗽立效丸對小鼠耳腫脹度的影響[n＝10，（±s）]

注：與對照組比較※P＜0.05，※※P＜0.01

組別 劑量（g/kg） 耳腫脹度（mg）等量生理鹽水 9.18±1.28止嗽立效丸 1.5 9.43±2.19止嗽立效丸 3.0 8.56±1.32止嗽立效丸 6.0 6.34±2.33※阿司匹林 6.0 5.31±2.03※※

2.2 大鼠角叉菜膠致炎作用

取體質量200g左右大鼠40只，雌雄兼用，隨機分為鹽水對照組，阿司匹林已知藥對照組，止嗽立效丸1.5、3.0、6.0g/kg劑量組。每組8只大鼠，禁食不禁水12h后，分別ig給予不同藥物，給藥后30min分別在大鼠右后肢足趾皮下注射1%角叉菜膠0.1mL/只致炎[1]。用玻璃容積法及足趾容積測量器測量各鼠致炎前和致炎后lh、2h、4h、6h的足趾容積，并計算出足趾腫脹度（致炎前后容積之差）。結果見表2。

表2 角又菜膠對大鼠足趾腫脹度的影響[n=8，（±s）]

表2 角又菜膠對大鼠足趾腫脹度的影響[n=8，（±s）]

注：與對照組比較※P＜0.05，※※P＜0.01

足趾腫脹度（mL）1h 2h 4h 6h等量生理鹽水 16.7±6.71 18.8±2.55 19.3±0.84 18.3±2.34止嗽立效丸 1.5 13.2±40.7 16.5±6.06 16.3±8.97 15.4±2.23止嗽立效丸 3.0 14.8±2.15 13.1±10.0 13.6±7.42※ 12.2±5.67※止嗽立效丸 6.0 11.2±3.78※ 9.8±5.70※※ 13.2±6.73※ 12.1±3.348※※阿司匹林 6.0 9.50±5.89※ 9.90±4.64※※ 12.8±5.17※※ 10.6±5.96※※組別 劑量(g/kg)

2.3 對小鼠中性粒細胞吞噬活性的影響

取健康小鼠50只，雌雄兼用，體質量18～42g，分組及給藥量見表3，各組小鼠連續ig給予各不同藥物7d，于第7天末次給藥1h后眼眶取血備用，另于一清潔玻璃上滴肝素抗凝劑2滴及NBT染液2滴，37C孵育15min再于室溫下放置15min，并輕輕混勻，在己制備好的載玻片上推成薄血涂片，干燥后用甲醇固定，Wright-Giensa染色，鏡檢，計數100個白細胞中有還原NBT呈紫色沉淀物的白細胞數。結果可見，止嗽立效丸對小鼠中性粒細胞的吞噬指數無明顯影響，即止嗽立效丸具有無影響機體非特異性免疫功能的作用。結果見表3。

2.4 溶血空斑實驗（PFC法）[1]

取小鼠50只，體質量18～22g，雌雄兼用，分組及給藥劑量見表4，連賣ig給予不同藥物7d，于給藥第3天時間10%RSBC致敏小鼠0.2mL/只（含4×108個SRBC）ip，免疫4d后，處死小鼠，分離脾臟，剪碎，加入Hanks液2mL，混勻，過濾，1500r/min，離心10min，去上清液，Hanks液洗3次，將細胞沉淀懸于4.8mL Hanks液中，取0.2mL指示細胞懸液（SRBC+補體）+0.2mL（125×）脾細胞灌注小室用（l00μL/室），密封，37C培養30min，計數空斑，抗體產生細胞數=[脾細胞懸液總mL數（50mL）/注入小室脾細胞（mL）]×標本PFC數，實驗結果與對照組比較進行統計學檢查，結果可見，止嗽立效丸可使溶血空斑生成減少，具有降低體液免疫功能。結果見表4。

表3 止嗽立效丸對小鼠中性粒細胞吞噬功能影響[n=10，（χ— ±s）]

表4 止嗽立效丸對小鼠抗體產生細胞總數的影響[n=10，（±s）]

表4 止嗽立效丸對小鼠抗體產生細胞總數的影響[n=10，（±s）]

注：與對照組比較※P＜0.01

組別 劑量 抗體產生細胞總數（個/只）等量生理鹽水 13.14±2.67止嗽立效丸 1.5（g/kg） 8.5±2.20※止嗽立效丸 3.0（g/kg） 8.63±1.85止嗽立效丸 6.0（g/kg） 11.5±2.98消咳喘 1.5（mg/kg） 3.1±12.33

3 討 論

實驗結果顯示止嗽立效丸可抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹癥及角叉菜膠致大鼠足腫脹炎癥。同時對小鼠中性粒細胞的吞噬功能無明顯影響，并便溶血空斑實驗中抗體產生數減少，具有調節機體特異性免疫及非特異性免疫功能[2]。全方在平喘化痰、消炎、止咳基礎上可調節機體免疫反應，對平喘、止咳、抗炎有較好的治療作用。

[1]徐叔云.藥理實驗方法學[M].2版.北京:人民衛生出版社,1985:532-533.

[2]陳奇.中藥藥理實驗方法學[M].北京:人民衛生出版社,1996:646.