血栓心脈寧片對大鼠腸系膜微循環障礙的改善作用

李 敏 趙學忠 于 水 (吉林大學第一醫院心血管內科，吉林 長春 130021)張曉天 王 放 (吉林大學白求恩基礎部病原微生物實驗室)

微循環直接參與組織、細胞的物質、信息、能量傳遞。微循環障礙表現為血液不暢，微血管痙攣，微血流黏度增高，紅細胞聚集，血栓形成或有栓塞。血瘀證是血脈瘀滯不暢，氣滯血瘀所致的各種有關病證。由此可見，微循環障礙和血瘀證有著相似的病理改變，微循環觀測可作為血瘀證診斷的一項重要指標〔1〕。血栓心脈寧片用于治療冠心病、腦梗死等缺血性心腦血管疾病取得了一定的療效。本文觀察血栓心脈寧片對實驗性微循環障礙的改善作用，進一步證明血栓心脈寧片抗血栓、抗凝活性，并探討其機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 清潔級 Wistar大鼠，體重180～210 g，雌雄各半，由吉林大學動物室提供。動物合格證號 SCXK-(吉)-2007-0003。

1.1.2 藥品與試劑 血栓心脈寧片(吉林華康藥業有限公司，批號:110601)。步長腦心通:(陜西步長制藥有限公司，批號:110552)。高分子右旋糖酐(葡聚糖T500，Pharmacia法碼西亞試劑公司，批號:17-0320-01)。臺式液試劑均為市售。

1.1.3 儀器 HW-ZOOO型恒溫儀，恒溫控制實驗鼠板，BI-2000動態微循環圖像觀察測量系統軟件(成都泰盟科技有限公司);OYLMPUS生物顯微鏡 (日本);DELL計算機(美國)。

1.2 方法

1.2.1 分組及給藥方法 50只大鼠隨機分為微循環障礙模型組(灌胃予蒸餾水)、血栓心脈寧片低劑量組(予血栓心脈寧350 mg/kg體重)、中劑量組(予血栓心脈寧700 mg/kg體重)、高劑量組(予血栓心脈寧1 400 mg/kg體重)，步長腦心通陽性對照組(予步長腦心通800 mg/kg體重)，每組10只。各組大鼠每日灌胃給藥1次，0.5 ml/100 g，連續給藥5 d。實驗前將高分子右旋糖酐(葡聚糖T500)和蒸餾水按照1∶10配成10%的濃度。臺式液按照 NaCl 8.0 g，KCl 0.2 g，CaCl20.2 g，MgCl20.1 g，NaH2PO40.05 g，NaHCO31.0 g，葡萄糖 1.0 g 的比例加蒸餾水配成1 000 ml液體。

1.2.2 實驗方法 連續灌胃給藥第4天晚禁食不禁水，第5天灌胃半小時后，給予10%水合氯醛3 ml/kg腹腔注射麻醉，背位固定，行腹正中線切口2～3 cm，輕拉回盲部一段小腸系膜，置于充滿37℃臺式液的有機玻璃恒溫水浴槽中，并平鋪在浴槽中央的有機凸型觀察臺上，壓上固定板，利用恒溫彩色微循環顯微儀上攝像頭采集顯微鏡下視頻圖像，通過視頻采集卡輸入微機，以微循環觀測系統對所采集的鏡下視頻圖像進行實時分析。固定一個視野，觀察選定區域的微血管管徑、微血管流速、紅細胞流態等指標。待以上參數穩定后，各組均舌下靜脈注射10%高分子右旋糖酐(3 ml/kg)，造成大鼠微循環障礙，觀察 5、10、15、20、25、30 min 時上述指標的變化情況，并計算給藥后微循環管徑、微血管流速變化率。變化率=(給藥前測定值－給藥后測定值)/給藥前測定值×100%。

2 結果

2.1 血栓心脈寧片對腸系膜微循環障礙血管管徑的影響 模型組在給予10%高分子右旋糖酐后，微血管血流速度明顯減慢，微血管管徑變細;紅細胞流態可出現粒緩流，粒擺流，甚至血流處于淤滯狀態無恢復，造模成功。

血栓心脈寧片中劑量組和陽性對照組微血管管徑在給予10%右旋糖酐后15 min即開始恢復，并在30 min內逐漸恢復到給藥前，給藥后不同時間段微動、靜脈管徑的變化率與模型組相比具有顯著差異(P＜0.01)。高劑量組和低劑量組給予10%右旋糖酐后20 min和25 min管徑開始恢復并逐漸增加，但在30 min內尚未恢復到給藥前管徑大小，其血管管徑變化率與模型組相比有顯著差異(P＜0.05，P＜0.01)。表明血栓心脈寧片對微循環有改善作用，以中劑量組最明顯。見表1。

2.2 血栓心脈寧片對腸系膜微循環障礙血管血流速度的影響中劑量組和陽性對照組微動脈血流速度在給予10%右旋糖酐15 min后開始恢復，在30 min流速大致恢復到給藥前，給藥后與模型組比較有統計學差異(P＜0.01)。低、高劑量組給予高分子右旋糖酐后20～25 min起流速開始恢復，不同時間段流速變化率與模型組比較具有統計學差異(P＜0.05，P＜0.01)。見表2。

表1 血栓心脈寧片對腸系膜微循環障礙血管管徑的影響(n=10，x ± s，%)

表2 血栓心脈寧片對給予高分子右旋糖酐后血流速度變化率的影響(n=10，x ± s，%)

3 討論

冠心病在祖國醫學中屬于“胸痹、心痛”范疇，主要是由于多種病理產物導致血行不暢，心血痹阻，脈絡不通。研究表明，冠心病血瘀證是最常見的基本證型〔2〕。現已證實血瘀即為血液循環障礙，尤其微循環障礙〔3〕。由此可見改善微循環對于治療冠心病有重要意義。

研究發現，活血化瘀療法多有改善微循環的功能〔1〕。血栓心脈寧片是道地取材，包含兩味國家一類新藥(牛黃、麝香)，是我國第一個針對二級預防進行二次研究開發的現代中藥。本實驗通過對大鼠腸系膜微循環障礙活體標本的觀察，驗證血栓心脈寧片可以促進微循環障礙的微血管動、靜脈管徑恢復，縮短微血管管徑變化率;促使微循環障礙的血流暢通和血流速度加快;使紅細胞聚集減少，減少血栓形成，降低血液黏度，從而使微循環障礙得以緩解。同時也證明了該藥具有良好的活血化瘀作用。

前期藥理實驗表明，血栓心脈寧片能抑制腦缺血時自由基的氧化損傷，改善血小板黏附及聚集功能，減少腦組織MDA的生成〔4〕;降低缺血性心肌組織MDA的濃度，提高心肌組織中一氧化氮(NO)水平〔5〕;降低血液中TXA2含量，增加PGI2含量，抑制血小板聚集活性，并可以使急性血瘀模型大鼠全血黏度、血漿黏度降低，抑制血小板聚集〔6〕。血栓心脈寧片改善微循環的作用可能與上述作用機制相關。

1 田 牛.血瘀證的微循環研究〔J〕.中國中西醫結合雜志，2001;21(4):248.

2 曠惠桃，潘遠根.冠心病心絞痛臨床證型分類探討〔J〕.中醫雜志，1997;38(12):742-3.

3 劉 偉，胡曉晨，金慧心，等.心血淤阻型冠心病微循環變化〔J〕.中醫藥信息，1996;3:39.

4 劉建偉，曲紹春，于曉風，等.血栓心脈寧片對大鼠實驗性腦缺血的保護作用〔J〕.中西醫結合心腦血管病雜志，2011;9(3):333-4.

5 郭清軍.血栓心脈寧片對急性心肌梗死患者再灌注后心肌和微血管的保護性研究〔J〕.中西醫結合心腦血管病雜志，2008;6(9):1019-20.

6 王 宏，曲紹春，于曉風，等.血栓心脈寧片對急性血瘀模型大鼠血小板功能和血液流變學的影響〔J〕.中國老年學雜志，2010;30(11):3335-7.