化療聯合參附注射液對急性白血病患者T淋巴細胞亞群、白介素-6、腫瘤壞死因子-α的影響

于紅濤，吳 濤，何錦照，張忠強

廣東省河源市人民醫院內二科，廣東河源 517000

急件白血病是血液科的常見病、多發病，患者常出現細胞免疫功能低下，且應用各種不同的化療方法及藥物后，容易使患者的細胞免疫功能進一步降低，而化學后應用輔助藥物治療可促進患者細胞免疫功能的恢復。T淋巴細胞在細胞免疫中起著重要的調控作用，白血病患者表現為T淋巴細胞減少，T淋巴細胞亞群比例失調[1]。本研究旨在探討化療聯合參附注射液對急性白血病患者T淋巴細胞亞群、白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的影響，進一步分析其治療急性白血病的免疫作用機制，為臨床治療提供進一步的指導依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2008年1月～2010年1月在我院就診的急性白血病患者30例作為治療組，患者年齡在36～76歲之間，平均（48.5±3.7）歲。另選同期30例急性白血病僅給予化療治療的患者作為對照組，患者年齡在34～73歲之間，平均（47.1±2.5）歲。兩組性別、年齡、分型等一般資料經統計學分析，差異無統計學意義，具有可比性（P＞0.05）。見表1。

1.2 治療方法

兩組均采用相同的化療方案，治療至少兩周以后評價療效。化療前后查血液肝腎功能、心電圖、尿常規。對照組采用單一化療方案治療急性白血病。治療組在停化療時開始使用參附注射液40～60 ml加入5%GS 250 ml中靜脈點滴，每日1次，連用14 d。而治療兩周后復查血常規。化療前常規給予昂丹司瓊止嘔，化療過程中給予水化、堿化。觀察患者的發熱，齒齦、皮膚、黏膜出血現象及其他不良反應。

1.3 檢測方法

①采集兩組患者的外周靜脈血 3～5 ml，3000 r／min 離心10 min，取上層血清于-80℃冰箱保存待測。采用美國BD公司生產的流式細胞儀FACS Calibuv測定兩組患者的T淋巴細胞亞群（CD4+T、CD8+T淋巴細胞百分比，并計算CD4+T/CD8+T比值）。②采用ELISA方法檢測兩組血清IL-6和TNF-α水平。檢測試劑盒購于日本MBL公司，檢測過程嚴格按試劑盒說明書操作。

1.4 觀察項目

觀察比較兩組的療效，兩組患者治療前后T淋巴細胞亞群水平的變化，血清IL-6、TNF-α的變化以及兩組用藥的安全性。

表1 兩組一般資料比較（例）

1.5 療效評判標準

根據 《血液病診斷及療效標準》[2]評價療效。完全緩解（CR）：臨床癥狀消失，生活正常或接近正常；血象Hb≥100 g／L（男）或≥90 g／L（女），中性粒細胞絕對值≥1.5×109／L，PLT≥100×109／L，外周血分類無白血病細胞；骨髓像為原+幼稚淋巴細胞≤5%，或原+幼粒細胞≤5%，或原+幼稚單核細胞≤5%；紅細胞和巨核細胞系列正常。部分緩解（PR）：骨髓像為原+幼稚淋巴細胞＞5%，但＜20%，或原+幼稚粒細胞＞5%，但＜20%，或原+幼稚單核細胞＞5%，但＜20%；或臨床癥狀、血象中有一項未達CR者。未達CR或PR者為未緩解，CR和PR者之和為緩解。

1.6 統計學方法

采用SPSS 12.0軟件進行統計學分析，計數資料比較采用χ2檢驗，計量資料采用均數標±準差（）表示，組間及組內比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療后臨床療效比較

治療組總有效率為76.7%，對照組總有效率為56.7%，兩組總有效率比較，差異有統計學意義（χ2=8.346，P＜0.05）。 見表2。

2.2 兩組治療前后T淋巴細胞亞群水平變化比較

治療組和對照組治療后的CD4+T、CD4+T/CD8+T均較治療前明顯升高。與對照組上述指標比較，治療組改善的更明顯，兩組治療后比較差異有統計學意義 （P＜0.05）。兩組的CD8+T治療后較治療前無明顯變化，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表 3。

表2 兩組治療后臨床療效比較[n（%）]

表3 兩組治療前后T淋巴細胞亞群水平變化比較（）

表3 兩組治療前后T淋巴細胞亞群水平變化比較（）

組別 例數 時間30治療組 治療前治療后t值P值對照組30治療前治療后t值P值CD4+T（%）25.43±7.1431.30±6.256.375＜0.0526.37±6.4627.32±7.316.138＜0.05 CD8+T（%）32.76±5.6030.34±4.251.345＞0.0531.52±4.7429.25±6.181.541＞0.05 CD4+T/CD8+T 0.81±0.251.08±0.165.136＜0.050.78±0.160.96±0.295.243＜0.05

2.3 兩組治療前后血清白介素-6、腫瘤壞死因子-α變化比較

治療組和對照組治療后兩組的IL-6和TNF-α均較治療前明顯降低，差異有高度統計學意義（P＜0.01），且與對照組治療后比較，治療組降低的更明顯，兩組比較差異有統計學意義（P＜0.05）。 見表 4。

2.4 兩組不良反應比較

兩組在治療期間未見明顯不良反應發生，腎功能均正常，出現肝損害患者經對癥處理均好轉。

3 討論

急性白血病患者本身免疫功能低下，化療是臨床治療白血病的常規手段，但是化療對細胞的免疫功能有明顯的抑制作用。因此，在化療結束后應用輔助藥物可以使患者的細胞免疫功能有明顯的改善[3]。

表4 兩組治療前后血清IL-6、TNF-α變化比較（）

表4 兩組治療前后血清IL-6、TNF-α變化比較（）

治療組組別 例數30時間治療前治療后t值P值對照組30治療前治療后t值P值IL-6（ng/L）295.98±84.69107.22±63.4315.18＜0.01307.97±82.52156.33±71.6921.41＜0.01 TNF-α（μg/L）1138.91±147.89160.08±78.4146.15＜0.011122.13±145.64191.02±74.9648.16＜0.01

急性白血病患者 T淋巴細胞亞群 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的水平，能直接反映患者細胞的免疫功能。CD4+是輔助性T細胞的代表，CD8+是抑制性T細胞的代表。CD4+/CD8+值是機體免疫調控網絡的重要樞紐，生理狀態下CD4+和CD8+之間始終保持動態平衡，調節機體的免疫狀態[4]。TNF-a主要由脂多糖（LPS）或卡介苗（BCG）活化的單核巨噬細胞產生，具有抗腫瘤、抗病毒的作用，也是重要的免疫調節分子和致炎因子[5]。IL-6通常以Th2細胞、單核巨噬細胞、成纖維細胞產生為主，可以促進B細胞分化成熟，還可以刺激造血干細胞增生分化，參與炎癥反應。化療后急性白血病患者IL-6分泌水平明顯降低，說明化療后白血病患者處于免疫功能抑制狀態。因此，積極尋找有選擇性殺傷及免疫調節藥物成為治療白血病研究的重要課題[6]。

參附注射液由人參、附子的提取物組成，有調中益氣、實衛固脫的作用，益肺健脾，補氣養血，激活骨髓造血功能，減少細胞破壞作用，能減輕化療對骨髓功能的抑制，使白細胞恢復時間縮短，降低白細胞、血小板減輕程度[7]。

本組資料結果顯示，治療組30例急性白血病患者在化療的同時應用參附注射液后，治療組和對照組治療后的CD4+T、CD4+T/CD8+T均較治療前明顯升高，且治療組上述指標改善較對照組更明顯，說明其能改善急性白血病患者的免疫功能；同時，治療組和對照組治療后IL-6、TNF-α水平明顯降低，且治療組降低程度明顯低于對照組，說明參附注射液可通過影響急性白血病患者體內IL-6、TNF-α的表達水平，進一步干預二者對造血干細胞和白血病細胞增殖和分化的調控作用，從而達到治療的目的，與魏影非等[8]所報道的研究結果基本一致，但由于樣本量過小，對其機制仍需要擴大樣本量進一步研究。

[1]徐麗華.小兒急性白血病患者血清VEGF水平和外周血B細胞及T淋巴細胞亞群水平檢測的臨床意義[J].淮海醫藥,2008,26(1):7-8.

[2]張之南,沈悌.血液病診斷及療效標準[M].北京:科學出版社,2007:33.

[3]Brune M,Castaigne S,Catalano J,et al.Improved leukemia free survival after postconsolidation immunotherapy with histamine dihydro and chloride and interleukin-2 in acute myeloid leukemia:results of a randomized phase3 trial[J].Blood,2006,108(32):88-96.

[4]Angulo DG,Yuen C,Palla SL,et al.Absolute lymphocyte count is a novel prognostic indicator in AL and AML:implications for risk stratification and future studies[J].Cancer,2008,112(2):407-415.

[5]李輝,吳雨潔,仇海榮.T淋巴細胞亞群結合遺傳學檢測在初發急性白血病中的相關研究[J].現代檢驗醫學雜志,2010,25(2):84-85.

[6]吳朝陽,吳雅榮,王法春,等.急性白血病患者外周血T淋巴細胞亞群和NK細胞水平檢測及臨床意義[J].江蘇大學學報:醫學版,2008,18(5):432-433.

[7]譚琳,聶波,謝瑜.急性白血病患者化療后應用白介素-2對T淋巴細胞亞群的影響[J].中國醫學創新,2010,7(2):17-18.

[8]魏影非,杜惠蘭,王素云,等.參附注射液配合化療治療急性白血病療效及對細胞免疫、血清IL-6和TNF-α水平的影響[J].中國中西醫結合雜志,2003,23(4):258-259.