自身抗體檢測在慢性肝病診斷中的意義

曾東良，莫寶妹，姜煥好，李艷紅

(深圳市寶安區人民醫院，廣東 深圳 518101)

自身免疫性肝病是一組由于自身抗體存在而引起的肝組織持續損傷為特征，而非病毒性感染的一類肝臟疾病，主要包括自身免疫性肝炎(AIH)、原發性膽汁性肝硬化(PBC)和免疫性膽管炎(PSC)，近年來隨著對此類疾病的深入研究，自身免疫性肝病的發病率有逐年增加的趨勢[1-2]。我國是一個慢性肝病的高發區，以病毒性肝炎特別是乙型和丙型肝炎為主，通過對一些長期的慢性肝病患者進行自身抗體的檢測，探討自身免疫性肝病和病毒性肝病之間自身抗體的相關性。

1 資料與方法

1.1 實驗對象 選取2003-2010年間在我院就診的患者，其中診斷為自身免疫性肝病的患者32例，包括：AIH患者11例，男2例，女9例，平均32歲；PBC患者17例，男6例，女11例，平均53歲；PSC患者4例，男3例，女1例，平均38歲。慢性病毒性肝炎214例，包括：慢性乙型肝炎(CHB)患者131例，男78例，女53例，平均38歲；慢性丙型肝炎(CHC)患者83例，男59例，女24例，平均44歲。自身免疫性肝病診斷參照國際組織自身免疫性肝病小組修訂的評分標準[3]；病毒性肝炎診斷標準參照2004年和2005年制定的丙型和乙型病毒性肝炎防治指南中診斷標準[4-5]。

1.2 方法

1.2.1 ANA測定 采用酶聯免疫吸附試驗，試劑由深圳亞輝龍生物科技有限公司提供，受檢者空腹12 h，不飲酒24 h后采集血樣，按說明書操作。酶標儀選擇雙波長450/630 nm，測定吸光度的靈敏度達到0.001ABS以上。

1.2.2 自身抗體檢測 自身免疫性抗體線粒體抗體(AMA-M2)、抗肝腎微粒體(LKM-1)、抗可溶性酸性核蛋白抗體(Sp-100)、抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)、抗肝細胞漿Ⅰ型抗原抗體(LC-1)和抗可溶性肝抗原抗體(SCA)測定采用免疫印跡法，試劑由深圳亞輝龍生物科技有限公司提供，受檢者需空腹12 h，不飲酒24 h采集血樣，使用EDTA-Na2抗凝劑分離血漿，按說明書操作。

1.2.3 統計學處理 資料以例數和百分率描述，應用χ2檢驗，采用SPSS10.0軟件進行統計學分析。

2 結果

214例病毒性肝病患者中ANA檢出率為14.4%，其中CHB患者ANA陽性率為13.7%，1例同時檢出ANA、LKM-1和LC-1陽性，兩例檢出ANA和AMA-M2陽性；CHC患者ANA陽性率為15.7%，其中6例檢出LKM-1陽性。32例自身免疫性肝病患者的ANA陽性率為81.6%，AIH、PBC和PSC的ANA陽性率分別為81.8%、88.2%、75.0%，與病毒性肝病患者的ANA比較差異有統計學意義(P＜0.01)。AIH的LKM-1、LC-1、SLA 和 PBC 的 AMA-M2、Sp-100、gp210的陽性率明顯高于病毒性肝炎患者，差異有統計學意義(P＜0.01)。AIH 患者中，1例 AMA-M2和SLA陽性，1例AMA-M2、LKM-1和LC-1陽性；PBC患者中，有1例同時檢出AMA-M2、Sp100、gp210和SLA，見表1。

表1 各種肝病患者血清自身抗體陽性率[例(%)]

3 討論

自身免疫性肝病是機體自身免疫反應過度造成肝組織損傷，出現肝功能異常及相應癥狀體征的一組慢性肝臟疾病，包括由肝細胞受累的AIH和主要因肝內、肝外膽管細胞受累的PBC和PSC，三種疾病的特點是在肝臟出現病理性免疫損傷的同時，血液中伴有特征性與肝臟相關的自身抗體，因此，檢測自身抗體成為自身免疫性肝病診斷和鑒別診斷的重要手段。病毒性肝炎由多種不同肝炎病毒引起的，主要通過機體對病毒的免疫應答而導致肝細胞損害的一組疾病，病理持續半年以上者轉化為慢性病毒性肝炎，主要以乙型肝炎和丙型肝炎為多見。在本文中，自身免疫性肝病ANA總陽性(81.6%)明顯高于病毒性肝病(14.4%)，差異有統計學意義(P＜0.01)，自身免疫性肝病中AIH、PBC和PSC的ANA檢出率也明顯高于病毒性肝病CHB和CHC的檢出率，兩組間差異有統計學意義(P＜0.01)，身免疫性肝病的AIH的LKM-1、LC-1、SLA和PBC的AMA-M2、Sp-100、gp210自的檢出率也明顯高于病毒性肝病，與陳作芬等[6]的報道一致。在具有自身免疫性肝病特異性自身抗體AMA-M2、抗SLA、抗LKM-1和LC-1的檢出中，慢性乙肝患者中有2例ANA和AMA-M2陽性，1例ANA、LKM-1和LC-1陽性，經過肝穿刺活檢檢查和其他生化指標檢驗，2例ANA和AMA-M2陽性者診斷為PBC，1例ANA、LKM-1和LC-1陽性者診斷為AIH，3例患者給予激素等免疫抑制劑治療，病程都有不同程度好轉。在83例CHC患者中，有6例檢出LKM-1陽性，HCV患者血清中存在自身抗體，能引起自身免疫紊亂[7]，提示LKM-1抗體和HCV存在交叉免疫現象，對指導臨床治療非常重要。在4例PSC患者中，3例ANA陽性，其他抗體陰性，抗體陽性率低可能與病例少有關。

研究顯示AIH患者同時檢出AMA-M2和SLA陽性的1例，AMA-M2、LKM-1和LC-1同時陽性的1例，PBC患者1例同時檢出AMA-M2、Sp-100、gp210和SLA，而AMA-M2對PBC的診斷具有特異性，M2抗原的表達在肝臟的膽管上皮，而在肝細胞不表達，對PBC診斷特異性非常高；LKM-1是Ⅱ型AIH的血清學指標，而LC-1是Ⅱ型AIH的特異性抗體，Sp-100和gp210是PBC的高度特異性抗體，SLA是Ⅲ型AIH的標志性抗體，這多種標志物的同時出現，表現自身抗體在自身免疫性肝病間的存在并非完全獨立，關于自身免疫性肝病重疊綜合征，有學者報道[8]，有些病例確實同時具備兩種疾病的臨床或生物化學和免疫學指標，并有組織學支持，證明存在重疊綜合征。

對一些長期肝功能異常患者，其中一部分可能是自身免疫性肝病，目前認為自身免疫性肝病與潛在的激發因素導致天然免疫耐受性被打破，發生對自身抗原的免疫應答及異常自身反應造成免疫系統攻擊相應的靶細胞，引起肝臟損傷、炎癥反應、靶細胞凋亡和壞死，以及遺傳易感性有關，有研究認為，激發因素可能來源于病毒[9]，由于病毒表位與某些肝抗原有交叉反應，說明兩者在分子上有相似性，其中最令人關注的是病毒性肝炎。自身抗體檢測在自身免疫性肝病中具有重要意義，對一些長期肝功能異常患者，有必要進行自身免疫抗體的檢測，以便盡早診斷和治療。

[1]姚光弼.關注我國自身免疫性肝炎的診斷和治療[J].中華肝臟病雜志,2005,13(1)：1-2.

[2]柯比努爾,張躍新.自身免疫性肝病的自身抗體的研究進展及臨床意義[J].臨床肝臟病雜志,2008,24(6)：463-465.

[3]Czaja AJ,Frccsc DK.American association for the study of liver disease.Diagnosis ang treatment of autoimmune hepatitis[J].Hepatology,2002,36：479-497.

[4]中華醫學會肝病學分會,中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會.丙型肝炎防治指南[J].中華肝臟病雜志,2004,12(4)：7.

[5]中華醫學會肝病學分會,感染病學分會.慢性乙型肝炎防治指南[J].2005,13(7)：881.

[6]陳作芬,萬榮珍.不同慢性肝病患者自身抗體的表達差異分析[J].重慶醫學,2009,38(19)：2421-2422.

[7]王 蓉,耿秀蓉,覃 沙,等.自身抗體在丙型肝炎和身免疫性肝炎中的特點分析[J].四川醫學,2011,32(2)：253-256.

[8]Onji M,Fumkana S.Significance of study on prevalence of AMA in healthy subjects[J].Castroenterod,2004,39：306.

[9]Krawitt EL.Autoimmune hepatitis[J].N Euge J Med,2006,354：54-66.