ER、PR、C-erbB-2、HMFG 在乳腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義

李文華，孫 奇，覃 希，李 婷

(廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院，廣西柳州545005)

乳腺癌是危害女性健康和生命的主要惡性腫瘤之一，在歐美國家以每年3%的速度遞增，已成為女性發(fā)病首位的惡性腫瘤。我國近年來乳腺癌的發(fā)病率呈上升趨勢。2009年1月～2011年9月，我們采用免疫組化EnVision法檢測58例乳腺癌組織中雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、人表皮生長因子受體-2(C-erbB-2)、人乳脂肪球膜蛋白(HMFG)的表達(dá)水平，旨在進(jìn)一步探討乳腺癌的發(fā)生機(jī)制。

1 材料與方法

1．1 材料 選擇我院手術(shù)切除的乳腺癌組織標(biāo)本58份(腫瘤組)，同時取相應(yīng)癌旁正常乳腺組織58份作對照組，年齡31～85歲，平均51歲;年齡＜50歲38例，≥50歲20例。均經(jīng)病理檢查診斷，且術(shù)前未行放化療。其中浸潤性導(dǎo)管癌44例、浸潤性小葉癌8例、導(dǎo)管原位癌6例;浸潤性導(dǎo)管癌組織學(xué)分級［1］分為高分化8例，中分化26例，低分化10例。腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例。主要試劑:HMFG抗體購自福州邁新生物技術(shù)有限公司，ER、PR、C-erbB-2購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1．2 ER、PR、C-erbB-2、HMFG 表達(dá)檢測 采用免疫組化法。所有標(biāo)本經(jīng)甲醛固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋、切片，HE染色。采用 EnVision二步法，HMFG采用檸檬酸高溫高壓修復(fù)，ER、PR、C-erbB-2則采用微波修復(fù)，抗體濃度為1∶50～1∶100，所有操作按試劑盒說明書進(jìn)行。結(jié)果判定:ER、PR:細(xì)胞核可見棕黃色顆粒為陽性著色，陽性細(xì)胞數(shù)＜10%為陰性，＞10%為陽性。C-erbB-2:細(xì)胞膜可見棕黃色顆粒為陽性著色，細(xì)胞膜無著色或＜10%的細(xì)胞膜輕微著色為陰性，＞10%的細(xì)胞膜連續(xù)著色，形成網(wǎng)格狀判為陽性。HMFG:可為膜陽性、漿陽性或膜漿陽性。根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)和陽性強(qiáng)度評級:瘤細(xì)胞未見著色為陰性;＞50%腫瘤細(xì)胞強(qiáng)、彌漫著色判為陽性。

1．3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13．0統(tǒng)計軟件，蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系采用四格表和行×列表χ2檢驗進(jìn)行結(jié)果分析，蛋白表達(dá)之間的相關(guān)性采用Spearman等級相關(guān)分析。檢驗水準(zhǔn)α=0．05。

2 結(jié)果

2．1 ER、PR、C-erbB-2、HMFG 的表達(dá) 乳腺癌組中 ER、PR、C-erbB-2、HMFG的陽性率分別為75．9%、55．2%、34%、89．6%，對照組分別為82．8%、62．1%、13．8%、93．1%，乳腺癌組 C-erbB-2表達(dá)明顯高于對照組(P＜0．05)，余指標(biāo)兩組無統(tǒng)計學(xué)差異。

2．2 ER、PR、C-erbB-2、HMFG 表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系 見表1。

2．3 相關(guān)性分析 乳腺癌組織中ER表達(dá)與PR表達(dá)表達(dá)呈正相關(guān)(r=0．302，P=0．021);ER 與 HMFG表達(dá)呈正相關(guān)(r=0．338，P=0．01);ER 與 C-erbB-2、PR 與 C-erbB-2、PR 與 HMFG、HMFG 與 C-erbB-2均無相關(guān)性，P均＞0．05。

3 討論

乳腺癌是一種多因素疾病，在其發(fā)生、發(fā)展過程中伴隨多種基因和蛋白的改變。通過對生物標(biāo)志物的研究，可以更深入地認(rèn)識乳腺癌的生物學(xué)行為。ER、PR是調(diào)節(jié)性器官細(xì)胞生長發(fā)育的雌激素、孕激素受體，ER及PR的狀態(tài)對腫瘤生長有著重要影響，與乳腺癌的激素治療有密切關(guān)系，表達(dá)水平高低用于預(yù)測激素治療的反應(yīng)性。表達(dá)水平高意味著對激素治療的敏感性強(qiáng)，可使腫瘤縮小凋亡，預(yù)后好。文獻(xiàn)報道，ER、PR與各臨床病理特征的關(guān)系的研究結(jié)論不太一致［2］。本研究顯示，ER、PR在腫瘤組和對照組的表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異，且乳腺癌組中不同年齡、組織學(xué)類型、分化程度和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的ER、PR表達(dá)差異亦無顯著性，提示目前ER、PR檢測可作為預(yù)測激素治療反應(yīng)性的依據(jù)，但對乳腺癌的診斷及預(yù)后判斷還需結(jié)合其他指標(biāo)進(jìn)一步分析。

表1 ER、PR、C-erbB-2、HMFG表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系

C-erbB-2基因是一種原癌基因。C-erbB-2基因激活后，通過一系列信號傳導(dǎo)通路使細(xì)胞的生物學(xué)特性發(fā)生改變，并導(dǎo)致細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化和出現(xiàn)惡性表型。文獻(xiàn)報道，20% ～30%的乳腺癌中有C-erbB-2的擴(kuò)增和過表達(dá)［3］;C-erbB-2過表達(dá)與組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有相關(guān)性，組織分化越差，C-erbB-2陽性表達(dá)率越高［4］，而有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病例易出現(xiàn)C-erbB-2的過表達(dá)［5］。本研究顯示，腫瘤組C-erbB-2陽性率明顯高于對照組，且其陽性表達(dá)與乳腺癌組織學(xué)分型及腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示C-erbB-2不僅可作為靶向治療的靶點(diǎn)，還與預(yù)后關(guān)系密切，可作為預(yù)后判斷的指標(biāo)之一。

HMFG是存在于人乳中乳脂肪球表面的膜蛋白，可表達(dá)于正常人乳腺上皮細(xì)胞和乳腺癌上皮細(xì)胞。研究表明，在人正常乳腺組織、原發(fā)性乳腺癌和轉(zhuǎn)移性乳腺癌中可見 HMFG 的表達(dá)［3，6］，且陽性率較高(達(dá)80% ～90%);但有研究表明，HMFG不僅表達(dá)于乳腺，在卵巢、胃腸、肺和皮膚汗腺的腫瘤中也有不同程度表達(dá)。本研究兩組HMFG陽性率表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異，而乳腺癌高、中、低分化者HMFG陽性率呈逐漸下降趨勢，癌分化程度越高，HMFG陽性率越高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，與國外研究相符［7］。本研究不同年齡、組織學(xué)類型、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的HMFG陽性表達(dá)差異無顯著性。提示HMFG可作為判斷乳腺組織來源的腫瘤指標(biāo)之一，但仍需結(jié)合其他乳腺特異性標(biāo)志物綜合判斷;另外，由于癌分化程度越高，HMFG陽性率越高，癌分化程度與預(yù)后關(guān)系密切，提示HMFG也可作為乳腺癌預(yù)后判斷指標(biāo)之一。

本研究中Spearman等級相關(guān)分析顯示，ER與PR表達(dá)呈正相關(guān)，說明ER、PR對腫瘤生長的有協(xié)同作用，兩者均有表達(dá)者對激素治療效果會更好;本研究還發(fā)現(xiàn)，ER與HMFG表達(dá)呈正相關(guān)，提示HMFG對預(yù)測激素治療反應(yīng)有一定幫助，與國外研究一致［8］。本研究 ER 與 C-erbB-2，PR 與 C-erbB-2，PR與HMFG，HMFG與C-erbB-2均無相關(guān)性，提示ER、PR、C-erbB-2和HMFG與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，聯(lián)合檢測ER、PR、C-erbB-2和HMFG在乳腺癌組織中的表達(dá)情況，有助于客觀評價乳腺癌的生物學(xué)行為，從而指導(dǎo)治療及預(yù)后判斷。

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