乙型肝炎血清HBV-DNA定量檢測及其臨床意義

任秀麗

(吉林省圖們市人民醫院 吉林圖們 133100)

乙型病毒性肝炎在我國有較高的發病率,已經成為危害群眾健康的公眾性問題［1］,實驗室的診斷對于乙型肝炎的預防以及患者的病情觀測、抗病毒治療效果的觀察等有著至關重要的作用,目前臨床上檢測乙肝病毒及其復制情況的方法主要有酶聯免疫法檢測乙肝兩對半(HVB M)血清標志物和PCR法測定HBV-DNA［2］。因此在臨床中通過監測乙肝患者血清HBV-DNA的動態變化,來了解乙刑肝炎HBV-DNA病毒復制活躍與臨床的關系以及拉米夫定治療效果。

1 材料與方法

1.1 標本來源

100例,乙型肝炎均為我院2006年9月至2008年4月門診或者住院患者,男68例,女32例,年齡(50.48±11.52)歲,診斷符合西安病毒性肝炎學術會議診定診斷標準［3］。其中25例為對照組,75例肝功能化驗治療前ALT>40μ,HBV-DNA≥1.0×104copies/mL HBV-M示HbsAg、HBcAb均為陽性的患者。

(1)HBV-DNA檢測采用熒光定量方法,檢測試劑盒購自深圳匹基生物工程有限公司。

(2)肝功能檢測,血清ALT測定采用全自動生化分析儀,ALT>40UL視為異常。

(3)乙肝二對半檢測采用酶聯免疫方法,乙肝檢測試劑盒為夏門新創生物制品所提供。

(4)LAM(葛蘭素史克中國投資有限公司)100mg片/d,療程52周,于治療前治療期間,每隔3個月檢測HBV-M、HBV-DVA定量,并動態觀察ALT水平,療程結束后隨診24周。

1.3 儀器

美國PE7700自動熒火PCR儀、日本奧林巴斯AU600全自動生化分析儀。

1.4 療效評價

完全應答治療結束時HbeAg轉陰,或HBeAg/HBeAb出現轉換,ALT正常,HBV-DNA陰性,部分答應:HBeAg陰轉或HBeAb未陽轉,HBV-DNA短暫消失,ALT值下降為治療前一半,無應答:未達上述標準者。

1.5 統計學處理

各組治療前后均數變化,組間率比較采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA含量與HBV-M之間的關系(見表1)

結果顯示慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA含量在104～109copie/mL之間,HBsAg＋,HBeAg＋,HBcAb＋組血清HBVDNA含量顯著高于其他組。

2.2 LAM治療期間動態監測HBV-DNA的含量變化(表2)

所有病例治療6～9個月時,病毒含量均有不同程度的下降,以完全應答組下降明顯,于治療前病毒的含量較其他組低有關,且治療后病毒消除速度也快,9個月完全應答組均低于正常水平線,無應答組患者LAM治療前病毒含量高,治療后病毒含量無明顯變化,治療后12個月和隨訪24周病毒含量又回到治療前水平。

表1 HBV M與HBV DNA檢測比較[例(%),(±s)]

表1 HBV M與HBV DNA檢測比較[例(%),(±s)]

注:※P<0.05,△P<0.01

組別例數 陽性 HBV-DNA(copies/mL)HBsAg＋,HBeAg+,HBcAb+HbsAg+,HBeAb+HbcAb+HBsAg+,HbcAb+正常對照42 25 8 25 42(100.0)※16(64.0)1(12.5)0 8.497±2.961 7.631±1.405(5.427±1.318)△

表2 LAM治療不同應答患者血清HBV-DNA的含量變化[(Copies/mL, ±s)]

表2 LAM治療不同應答患者血清HBV-DNA的含量變化[(Copies/mL, ±s)]

注:與完全應答組比較,△△P<0.01;與治療后6個月比較,※P<0.05

反應模式 例數(%)治療前 治療后3個月 治療后6個月 治療后9個月 治療后12個月 隨訪48周完全應答部分應答無應答36(48.0)13(17.3)26(34.6)5.731±1.369 6.354±1.312(7.849±1.6)△4.71±0.925 5.672±1.54 6.807±1.724(2.45±1.731)※4.315±1.324 5.134±1.150 0 3.473±1.961 6.051±1.296 0 1.115±1.247 7.081±1.270 0 4.021±1.072 7.011±0.842

3 討論

LAM作用的靶位是HBV聚合酶能抑制DNA合成,從而抑制病毒復制。筆者采用熒光定量法對慢性乙型肝炎患者用LAM治療前后的血清HBV-DNA進行檢測,HBsAg,HBeAg,HBcAb指示均陽性的患者中檢出率較高42/42(100.0%),在HBsAg,HbeAb,HBcAb指標均陽性的患者中檢出率稍低16/25(64.0%),而在HbsAg,HBcAb陽性組中也能檢測到HBV-DNA12.5%。說明HBeAg陽性,和HBcAb的出現并不能表明HBV復制停止,而是復制水平的降低,相關分析顯示慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA的含量與ALT無明顯相關性,與肝細胞損害程度也無相關性。

LAM已廣泛應用于慢性乙型肝炎的治療。并取得了較好的治療效果。檢測血清HBV-DNA含量可作為LAM應答的一個預測因素,筆者觀察LAM治療期間患者血清HBV-DNA含量低的患者療效較好,反之則較差,提示HBV-DNA的含量高低是影響療效的重要因素。故筆者認為HBV-DNA定量測定是預測和評價LAM的治療效果,病毒復制的可靠指標。

[1]駱抗先.乙型肝炎基礎和臨床[M].第2版.北京:人民衛生出版社,2001:100.

[2]宋平.乙肝患者血清中檢測乙肝表現抗原大蛋白的臨床意義[J].中華臨床內科雜志,2006,6.

[3]中華醫學會傳染病與寄生病學會肝病學分會修訂病毒性肝炎防治方案［J］.中華肝臟病雜志,2003.8.