日糧中不同銅源及添加水平對產蛋雞生產性能及蛋品質的影響

武書庚 齊廣海 中國農業科學院飼料研究所，北京100081

高銅（硫酸銅）能降低肉雞血漿和肌肉中膽固醇含量(Bakalli等，1995)。其它動物上的研究也表明，缺銅引起的高膽固醇血癥是一個與動物種類無關的普遍現象，缺銅時膽固醇合成以及組織沉積均增加。根據前期試驗結果，銅對降低雞蛋中膽固醇含量作用顯著，CuCit比同水平CuSO4作用效果明顯。銅作為生物抗氧化劑直接或間接參與活性氧的清除，銅的抗氧化作用主要通過對機體抗氧化酶的影響、頡抗其它微量元素和有害物質的毒性以及與其它抗氧化物質的協同來實現，銅對蛋雞機體抗氧化性能的影響，需要進一步研究。前期研究表明（齊廣海等，2000），產蛋雞日糧中銅的適宜添加量為6～30mg/kg，此銅的適宜添加量范圍比較寬，試驗動物周齡較大（78周齡產蛋雞）。不同銅源及添加量在機體內的生化作用是否與產蛋雞周齡有關，需要進一步探討。

1 材料與方法

1.1 銅源

硫酸銅（純度98%，含銅25%）。檸檬酸銅（分子量360.21，純度98%，含檸檬酸63.5%，含銅34.5%，中國農業科學院飼料研究所添加劑室提供）。硫酸銅和檸檬酸銅的理化指標見表1。

1.2 基礎日糧

本試驗采用玉米－豆粕-棉粕-菜粕型蛋雞日糧（粉料），基礎日糧組成及營養價值見表2。

1.3 試驗動物及試驗設計

試驗選用體重和產蛋率相近 （產蛋率大于90%）的海蘭褐23周齡產蛋雞，采用隨機單位組設計，試驗共設11個處理（表3），每個處理采食一種試驗日糧。每個處理4個重復，每個重復9只雞，共用雞396只，預試期1周，試驗期8周。

表1 硫酸銅和檸檬酸銅的理化特性＊Table 1 The characteristic of cupric sulphate and cupric citrate

表2 基礎日糧組成及營養素含量Table 2 The composition and nutrient content of the basal diet

1.每 kg 日糧中提供（mg）：Zn，20；Fe，40；Mn，30；I，0.175；Se，0.075。

2.每 kg日糧中提供：維生素 A 10800IU；維生素D32160 IU；維生素K31.0mg；維生素E 4.6mg；維生素 B10.4mg；維生素 B25mg；維生素B126mg；泛酸鈣 5mg；煙酸 7mg；葉酸 0.1mg。

3.實測值。

表3 試驗處理的設置Table 3 Aarrangement of experimental treatments

1.4 飼養管理

采用密閉式雞舍，二層立體籠養，同一排相連的9個雞籠（30×25cm）作為一個重復單位，每籠1只雞。同一處理各重復均勻分布于雞舍，以消除位置效應。試驗期間雞舍溫度變化范圍為15℃～30℃，相對濕度變化范圍為50%～80%。每天恒定光照為16小時，采用自動照明控制系統，在白天自然光照不足的情況下補充相應光照，光照強度為14LX。飼喂干粉料，自由采食、自由飲水。按常規防疫程序進行防疫和雞舍消毒。

1.5 樣品的采集與制備

試驗開始時，每個重復隨機取兩只雞進行稱重；每日以重復為單位，記錄產蛋數、產蛋量、軟破蛋數、死亡淘汰數，每周以重復為單位，統計一次耗料量、產蛋率，計算平均日采食量，以制定下一周的喂料量。分別在試驗第4周和第8周統計耗料、產蛋率、產蛋量、料蛋比，同時，以重復為單位取雞蛋3枚，用于測定雞蛋品質有關指標，采用自制蛋黃分離器，取3個雞蛋的鮮蛋黃，混勻，-16℃冷藏備用。試驗結束時每個重復隨機取2只雞，稱重后心臟采血，離心制備血漿（肝素鈉抗凝），冷藏備用。

1.6 測定指標與方法

1.6.1 生產性能指標：根據飼養試驗紀錄整理蛋料比、產蛋率、耗料量等。

1.6.2 雞蛋品質指標：采用日本富士坪公司生產的系列雞蛋品質測定儀，測定雞蛋品質（哈夫單位、蛋殼強度、蛋殼厚度、蛋殼重、蛋形指數）。

1.6.3 蛋黃膽固醇：雞蛋膽固醇用蛋黃膽固醇濃度（mg/g）和雞蛋膽固醇含量（mg/枚）兩個指標來表示。蛋黃膽固醇濃度即指每g蛋黃中膽固醇的含量，雞蛋膽固醇含量是指每枚雞蛋中膽固醇的含量。本試驗采用目前國際上較為通用的氣相色譜法，以5α-膽固醇（Sigma公司）為內標。樣品預處理參照Jiang（1991），測定條件以中華人民共和國國家標準（GB 9695.24-90）膽固醇測定法為依據，在提取技術方面加以改進。

測定原理：組織中的脂類經皂化后，膽固醇作為不皂化物被提取出來，并與一定的內標物混合后一起注入氣相色譜柱，求出膽固醇與內標物的峰面積比，根據工作曲線計算膽固醇的重量，以求得組織中膽固醇的含量。

不皂化物的提取：稱取0.50～1.00g脂肪，置于10ml容量瓶中用氯仿定容并搖勻。準確量取該試液1～5ml置于 25ml具塞試管中，準確加入 0.5～1ml內標物溶液，然后將氯仿蒸干。加入1mol/l氫氧化鉀溶液5ml，裝上冷凝管，在85℃～95℃水浴上緩緩皂化1h，取下冷卻至室溫，全部移入50ml分液漏斗中，用水10ml洗具塞試管，洗液并入分液漏斗，加乙醚10ml輕輕振搖，靜置分層后，將水相放入原試管中，加乙醚10ml振搖，待分層后，將乙醚移入分液漏斗內。再用10ml乙醚提取一次，此時分液漏斗中共有溶液30ml。用水2～3ml洗滌乙醚液，分層后，棄去水相，用無水硫酸鈉10g干燥后，將乙醚移入另一具塞試管中，通入N2干后，加入乙醇1ml。

色譜分離條件選擇：對膽固醇峰要求其理論塔板不少于1600。膽固醇與菜油醇二者峰分辨率不小于2.2，膽固醇的保留時間在8～12min之間；膽固醇峰強度為滿量程的0.25～0.5。

色譜柱：HP-5毛細管柱，柱長30m，內徑0.32mm。初始柱溫250℃，保持8min，然后線性升溫至260℃（1℃/min）。FID檢測器，檢測器溫度300℃，衰減為5。載氣為高純N2，流速41.3ml/min，空氣流速 397ml/min，分流比 74∶1。

1.7 數據處理與統計

數據用SAS 6.12程序包的GLM模型對各指標進行雙因素方差分析，采用LSD（最小顯著極差）法對進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 CuSO4和CuCit對產蛋雞生產性能的影響

產蛋率。試驗雞產蛋率在91%到96%之間變化（表4），所有銅添加組的產蛋率和料蛋比均高于對照組，差異顯著 （p＜0.05）。6，15和 60mg/kg的CuSO4處理的產蛋率顯著高于對照組（p＜0.05），其中，6mg/kg銅的產蛋率與對照組差異極顯著 （p＜0.01）；各CuCit處理的產蛋率極顯著高于對照組（P＜0.01），但 CuCit處理組之間差異不顯著 （p＞0.05）。隨銅添加量的增加，產蛋率有下降趨勢，尤其是125mg/kg處理組，總體上比6mg/kg處理下降了1.7個百分點。所有CuCit處理的產蛋率均高于同水平CuSO4處理，但差異不顯著。

料蛋比。所有銅添加組的料蛋比均極顯著低于對照組（p=0.0001）；60mg/kg CuSO4處理組的料蛋比最低，水平間差異不顯著 （p＞0.05）；6mg/kg CuCit處理組的料蛋比最低，水平之間差異不顯著（p＞0.05）；總體上 CuCit與 CuSO4處理之間無顯著差異（p=0.8131），但 CuCit處理組之間變異小，曲線平穩。

體增重。產蛋雞體增重(g)隨日糧銅添加量的增加而變化的曲線呈拋物線。兩種銅源6mg/kg處理組低于15～30mg/kg處理組，但高于其他組；15～30mg/kg處理組達波峰，與其他處理組差異顯著（p＜0.05）；兩種銅源均在15mg/kg處理的體增重最大，與其他處理差異極顯著（p＜0.01）；60mg/kg 高于對照和125mg/kg處理組，但顯著低于6～30mg/kg處理組（p＜0.05）；125mg/kg處理組的體增重與對照組和60mg/kg處理組無差異，與6，15和30mg/kg處理差異極顯著(p＜0.01)，說明125mg/kg處理組已影響到產蛋雞生產性能。CuCit處理組的體增重曲線平滑，所有處理組均好于同水平CuSO4，但差異不顯著（p=0.0870）。