TopoⅡα在青年乳腺癌中的表達(dá)及對新輔助化療療效的影響

張志生

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移率較高，而且許多患者在確診時已發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。含蒽環(huán)類藥物或(和)紫杉類藥物的化療方案，已成為當(dāng)今乳腺癌化療的基礎(chǔ)。拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα(TopoⅡα)是蒽環(huán)類藥物的主要作用靶點［1］。腫瘤細(xì)胞內(nèi)TopoⅡα的過表達(dá)與化學(xué)藥物的選擇相關(guān)性密切［2］，我們已有研究證實，TopoⅡα過表達(dá)率與乳腺癌年齡及有否淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移有關(guān)［3］。我們采用敏感性很高的免疫組化SABC法檢測36例無轉(zhuǎn)移青年乳腺癌和23例合并肺、骨轉(zhuǎn)移青年乳腺癌穿刺活檢標(biāo)本中TopoⅡα陽性率，分析它們之間相關(guān)性，同時觀察TEC方案新輔助化療后TopoⅡα表達(dá)率降低情況及化療效果。為臨床選擇化學(xué)治療藥物，提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2003年1月至2009年3月我院腫瘤科青年乳腺癌穿刺活檢標(biāo)本59例，年齡27～40歲，平均年齡35.5歲，中位年齡34歲;其中無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移36例，合并肺、骨轉(zhuǎn)移23例;左乳癌33例，右乳癌26例。

1.2 標(biāo)本處理及染色 將新鮮腫瘤標(biāo)本固定后，石蠟包埋后連續(xù)切片。一部分切片HE染色進行病理診斷，另一部分裱于涂膠載片，用SABC免疫組織化學(xué)試劑盒進行免疫組織化學(xué)染色。

1.3 TopoⅡα陽性結(jié)果判定 TopoⅡα陽性物質(zhì)呈棕褐色，分布于胞核中。一張切片中選10個高倍視野，陽性細(xì)胞＞10%即為陽性病例，否則為陰性病例。

1.4 新輔助化療 對2組TopoⅡα陽性表達(dá)患者均采用TEC方案，多帕菲(齊魯制藥)75 mg/m2，第1天;表柔比星(海正制藥)70 mg/m2，第1天;環(huán)磷酰胺500 mg/m2，第1天;3周為1個療程。應(yīng)用多帕菲前給予地塞米松口服，化療前常規(guī)給予阿扎司瓊10 mg靜脈注射，預(yù)防胃腸道反應(yīng)?；?個周期后達(dá)PR或CR繼續(xù)化療至4個周期后手術(shù)，評價未達(dá)PR者終止新輔助化療行手術(shù)。

1.5 療效觀察 根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟(UICC)指定的乳腺癌化療后療效評價標(biāo)準(zhǔn)，測量新輔助化療后乳房腫塊的大小進行分析。根據(jù)腫瘤對化療的反應(yīng)情況分為:完全緩解(CR):臨床檢查無腫瘤殘留;部分緩解(PR):化療后腫瘤體積縮小;疾病穩(wěn)定無變化(SD):化療后腫瘤體積無明顯變化;進展(PD):化療后腫瘤體積增大。CR+PR+SD為總有效率。

1.6 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用Spearman進行等級相關(guān)分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

無轉(zhuǎn)移青年乳腺癌中TopoⅡα陽性率為86.11%(31/36);合并肺、骨轉(zhuǎn)移青年乳腺癌中TopoⅡα陽性率為91.30%(21/23)。經(jīng)新輔助化療后，無轉(zhuǎn)移組TopoⅡα表達(dá)率降低22.58%(7/31)，合并轉(zhuǎn)移組 TopoⅡα表達(dá)率降低19.05%(4/21)，新輔助化療的有效率分別為80.64%(25/31)和57.14%(12/21)。TopoⅡα在青年乳腺癌中的表達(dá)及其與有否肺、骨轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05)。見表1。

表1 TopoⅡα的表達(dá)、化療后表達(dá)率的降低、化療有效率比較 例(%)

3 討論

TopoⅡ又稱旋轉(zhuǎn)酶(gyrase)，編碼蛋白可以分為α、β兩個亞型。本研究檢測乳癌中TopoⅡα，其分子量為170 KD，具有磷酸二酯酶活性，能夠與DNA形成穩(wěn)定的共價復(fù)合物，在細(xì)胞增殖期含量增高。對DNA解鏈、斷裂和DNA復(fù)制后斷端連接和復(fù)位起關(guān)鍵作用，是真核細(xì)胞生存不可缺少的核酶［4］。因此針對TopoⅡ為靶點的抗癌藥物，臨床應(yīng)用也越來越多，這些藥物針對性強(選擇性好)，能集中殺傷癌細(xì)胞，將此類藥物稱之為抑TopoⅡ抑制劑。這類藥物分為嵌入型抑制劑和非嵌入型抑制劑兩大類。前者通過其分子中類似嘌呤堿或嘧啶堿的多環(huán)結(jié)構(gòu)，嵌入到TopoⅡ與DNA結(jié)合的雙鏈之間，從而干擾TopoⅡ?qū)NA斷端重接的功能，導(dǎo)致DNA斷裂不能修復(fù)而致細(xì)胞死亡［5］。此類藥物以蒽環(huán)類藥物為代表。非嵌入型即藥物直接與TopoⅡ或DNA雙鍵結(jié)合從而影響酶的功能，以鬼臼乙叉甙、替尼泊甙等為代表。本實驗表明在無轉(zhuǎn)移青年乳腺癌中TopoⅡα 陽性率高達(dá) 86.11%(31/36)［6］。合并肺、骨轉(zhuǎn)移青年乳腺癌中TopoⅡα陽性率又明顯增高，為91.30%(21/23)，其表達(dá)率與有否肺、骨轉(zhuǎn)移相關(guān)性明顯，有肺、骨轉(zhuǎn)移組TopoⅡα陽性率明顯高于無轉(zhuǎn)移組(P＜0.01)。本研究表明青年乳腺癌中TopoⅡα高表達(dá)可能和臨床預(yù)后差有關(guān)，符合其他學(xué)者報告［7］。

隨著腫瘤發(fā)病率的增高，化療在腫瘤的綜合治療中的作用越來越受到重視，一些惡性腫瘤通過化療可獲得完全緩解。蒽環(huán)類和紫杉類藥物是治療乳腺癌最重要的藥物，這已成為大多臨床醫(yī)生的共識，其聯(lián)合應(yīng)用化療有效率53%，對于控制和預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)有很好的療效［8，9］。TAC和CAF方案被NCCN指南推薦用于乳腺癌的輔助化療，尤其是TAC方案其療效得到了廣泛的肯定［10，11］。新輔助化療可使大部分乳腺癌患者腫瘤縮小，降低淋巴結(jié)陽性率，并可用作化療藥物敏感性篩選，增加保乳手術(shù)率，有效率可達(dá)80%以上［12］。亦有文獻報道，含有蒽環(huán)類方案的新輔助化療可以降低乳腺癌術(shù)后拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα的表達(dá)率，化療后拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα的表達(dá)率降低的患者較表達(dá)率不變或增高的患者，能獲得更好的化療效果［13］。本研究證實，青年乳腺癌新輔助化療后拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα的表達(dá)率的降低(22.58%)，化療有效率亦明顯低于總有效率(94.87%)。而完全緩解和部分緩解的病例大部分是化療后拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα的表達(dá)率降低的患者，拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα的表達(dá)率降低不明顯的病例化療有效率很低，這與前面的文獻報道基本一致。

綜上所述，青年乳腺癌中TopoⅡα有較高的表達(dá)率，化療后拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα的表達(dá)率降低的患者較少，化療有效率偏低，尤其是合并轉(zhuǎn)移的患者，有效率更低。雖有實驗表明，含有紫杉類藥物的化療方案在乳腺癌新輔助化療中可以獲得較高的緩解率，但對于TopoⅡα(+)青年乳腺癌患者，化療有效率仍明顯低于總有效率。TopoⅡα(+)青年乳腺癌患者，如新輔助化療后撲異構(gòu)酶Ⅱα的表達(dá)率不變或增高，提示預(yù)后不良。建議臨床醫(yī)師在選擇化療方案時綜合考慮，嘗試其他化療藥物，以取得更好療效。

1 位嘉，劉芳芳，付麗，等.TopoⅡα在乳腺癌中的研究現(xiàn)狀.中華病理學(xué)雜志，2008，37:132.

2 桂賢，劉會敏.腫瘤多藥耐藥發(fā)生機制的研究進展.上海醫(yī)學(xué)，2005，28:161.

3 王金科，張輝，趙秋振，等.MGMT和表達(dá)及臨床意義.陜西醫(yī)學(xué)，2006，35:817-819.

4 Nagaraja V.Regulation of DNA topolopy in mycobacteria.Current Science，2004，86:135.

5 崔興，張會平，侯仰韶，等.DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ與抗腫瘤藥物靶點的研究進展.青島醫(yī)藥衛(wèi)生，2004，36:434.

6 耿旭紅，鞏曉紅，張利敏，等.乳腺癌術(shù)后靶向治療及新輔助化療的臨床研究進展.河北醫(yī)藥，2010，32:986-988.

7 Gotlieb WH，Goldberg I，Weise B，et al.Topoisomerase Ⅱ immunostairuing as a progonostic marker for survival in ovarian cancer.Cynecol Oncol，2001，82:99.

8 尹子毅，王丕琳，張鐵，等.表柔比星聯(lián)用紫杉醇或多西他賽在Ⅲ期乳腺癌新輔助化療中的療效.中國癌癥雜志，2008，18:459-462.

9 金永，任洪軍，陸佩知，等.FAC和FTC方案治療晚期乳腺癌的臨床觀察.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2009，17:1100-1101.

10 儲大同.TAC化療方案大大提高早期乳腺癌患者的生存率:一項多中心、隨機對照Ⅲ期臨床試驗.中華醫(yī)學(xué)雜志，2002，82:12-14.

11 朱珍，張鳳春.晚期乳腺癌的化療進展.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2009，17:1179-1182.

12 董立國，蒲永東，何建苗.晚期乳腺癌新輔助化療的臨床觀察.中國普通外科雜志，2007，16:35-37.

13 董苑，朱易凡，李松奇.乳腺癌新輔助化療對拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα表達(dá)的影響.中華普通外科學(xué)，2009，3:397-400.