肉仔雞飼糧中蛋氨酸和半胱氨酸與賴氨酸適宜比例的研究

呂明斌孫作為燕 磊王正國郭盈盈張 亮朱玉濤王允超

(1.山東六和集團有限公司，青島 266061;2.青島康地恩生物科技有限公司，青島 266101)

蛋氨酸(Met)和半胱氨酸(Cys)同為含硫氨基酸(SAA)，在動物體內Met可單向轉化為Cys。Met還參與體內的一些生化過程，不僅是體內甲基供體，同時也是真核生物蛋白質合成過程中與mRNA結合的第1個氨基酸，其本身也是蛋白質多肽鏈的一個重要組成部分。研究發現，在飼糧中添加適量的Met可提高肉仔雞的生產性能［1］，但超量添加會使之出現下降的趨勢［2］。Cys的營養效應可能與飼糧Met水平有關，當飼糧Met水平滿足動物需要時，過量的Cys對動物生長發育起阻抑作用;在Met極度缺乏的條件下，機體優先利用Cys合成各種含硫生物活性物質，以利于更多的Met用于蛋白質合成和甲基代謝。梁福廣［3］和唐茂妍等［4］對生長豬的研究結果也表明，飼糧中SAA過高或過低都會影響到氨基酸的利用率，進而影響日增重。SAA和賴氨酸(Lys)是玉米－豆粕型飼糧的第一、二限制性氨基酸，因此，它們之間的比例尤為重要。關于肉仔雞飼糧中SAA/Lys比例的研究較少，本試驗通過改變飼糧Met水平來研究不同SAA/Lys比例對肉仔雞生長性能和血漿游離氨基酸濃度的影響，進而探討飼糧中SAA與Lys的適宜添加比例。

1 材料與方法

1.1 試驗動物和飼養管理

選取1日齡羅斯308商品肉仔雞3 600只，隨機分為4個飼糧處理，每個處理3個重復，每個重復300只雞，公母各占1/2。試驗雞采用地面墊料大欄平養，自由采食和飲水。采用整舍育雛，暖風爐控溫，最初進雛時舍溫為34℃，以后每周降低2℃，直到26℃為止。光照制度:第1天為22 h，第2天和第3天為19 h，第4～6天為16 h，第7～12天為14 h，第13～22天為12 h，第23～30天為15 h，第31天至出欄為16 h。按正常免疫程序進行免疫。雞舍內溫度、濕度、光照和衛生學指標符合肉仔雞飼養的衛生要求(GB 14925—1994)。

表1 1～18日齡肉仔雞試驗飼糧組成及營養水平(風干基礎)Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets of broilers aged from 1 to 18 days(air-dry basis) %

1.2 試驗飼糧和試驗設計

試驗分為4個飼糧處理，肉仔雞飼糧可消化Lys和可消化Cys水平一定，通過改變飼糧DLMet水平，形成4個不同的SAA/Lys比例飼糧處理，飼糧處理1～4中(Met+Cys)/Lys比例分別為0.64、0.68、0.72和 0.76，各日齡階段(Met+Cys)/Lys比例不變。飼糧均按3個階段設計，前期料510(1～18日齡)、中期料511(19～28日齡)和后期料513(29日齡至出欄)。除了SAA外，其他氨基酸/Lys比例均符合理想蛋白質模式。試驗飼糧參照育種公司推薦標準及NRC(1994)標準配制。試驗飼糧組成及營養水平見表1、表2和表3。

表2 19～28日齡肉仔雞試驗飼糧組成及營養水平(風干基礎)Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets of broilers aged from 19 to 28 days(air-dry basis)%

表3 29～35日齡肉仔雞試驗飼糧組成及營養水平(風干基礎)Table 3 Composition and nutrient levels of experimental diets of broilers aged from 29 to 35 days(air-dry basis)%

續表3

1.3 測定指標與方法

1.3.1 生長性能指標

分別在試驗18、28和35 d時，以欄為單位對試雞進行空腹稱重，同時統計每欄剩料量，以計算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)和育肥指數(EPEF)等指標。育肥指數=平均日增重×成活率/(料重比×10)。

1.3.2 血液指標

試驗30 d時每個重復隨機取10只雞，取樣前均空腹12 h，自由飲水，次日08:00取樣。翅靜脈竇采血，3 000 r/min離心 10 min，分離血漿，－20℃冷凍保存，待測血漿尿素氮、尿酸、氨及游離氨基酸濃度。

血漿尿酸(UA，C012)、尿素氮(UN，C013-1)和氨(A086)濃度用紫外分光光度計測定，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。血漿游離氨基酸濃度用氨基酸自動分析儀(L－8800，日本Hitachi公司)測定。

1.3.3 經濟效益

根據飼料成本，計算35 d肉仔雞增重成本及每只雞的經濟效益。

1.4 數據處理

試驗數據采用SAS 9.1統計軟件中的ANOVA方法進行單因素方差分析，若處理間差異顯著，則用Duncan氏多重比較進行檢驗。結果用最小二乘法的均值及平均標準誤表示，P＜0.05為差異顯著。利用SAS軟件中線性回歸或非線性回歸(二次模型)對試驗數據進行回歸分析。

2 結果

2.1 生長性能和經濟效益

由表4可知，飼糧中不同(Met+Cys)/Lys比例對各日齡階段肉仔雞生長性能均無顯著影響(P＞0.05)。隨著飼糧中(Met+Cys)/Lys比例的升高，19～28 d和29～35 d肉仔雞料重比有線性降低趨勢(P＜0.10);且1～35 d肉仔雞料重比也有線性降低趨勢(P=0.05)，其中(Met+Cys)/Lys比例為0.76時，1～35 d肉仔雞料重比最低。隨(Met+Cys)/Lys比例從 0.64 升高到 0.76，19～28 d肉仔雞平均日增重有線性增加趨勢(P＜0.10)。

表4 飼糧中不同(Met+Cys)/Lys比例對肉仔雞生長性能的影響Table 4 Effects of dietary methionine plus cystine to lysine ratio on growth performance of broilers

從表5可知，(Met+Cys)/Lys比例為0.76時，每千克肉仔雞增重飼料成本最低，每只雞收益分別比比例為 0.64、0.68 和0.72 的組增加 0.52、0.24 和0.34 元。

表5 飼糧中不同(Met+Cys)/Lys比例對肉仔雞經濟效益的影響Table 5 Effects of dietary methionine plus cystine to lysine ratio on the economic benefits of broilers

2.2 血液指標

由表6可知，飼糧(Met+Cys)/Lys比例為0.76的組肉仔雞血漿尿素氮濃度顯著低于其他3組(P ＜0.05);(Met+Cys)/Lys比例為0.64的組肉仔雞血漿尿酸濃度顯著高于比例為0.72和0.76的組(P ＜0.05)，分別比比例為 0.72 和 0.76的組升高17.95%和 14.26%。當飼糧(Met+Cys)/Lys比例降低到0.68時，肉仔雞血氨濃度顯著升高(P ＜0.05)，當比例降低到0.64時，卻又顯著降低了，且顯著低于其他各組(P＜0.05)。

表6 飼糧中不同(Met+Cys)/Lys比例對30日齡肉仔雞血漿尿酸、尿素氮和氨濃度的影響Table 6 Effects of dietary methionine plus cystine to lysine ratio on the concentrations of uric acid，urea nitrogen and NH3in plasma of broilers aged 30 days

由表7可知，隨飼糧(Met+Cys)/Lys比例的降低，肉仔雞血漿Met和Cys濃度線性降低(P＜0.05)，各組之間血漿 Met濃度差異顯著(P＜0.05)，而 Cys濃度無顯著差異(P ＞0.05)。隨著飼糧(Met+Cys)/Lys比例降低，肉仔雞血漿異亮氨酸濃度線性升高(P＜0.05)，絲氨酸濃度有線性升高的趨勢(P＜0.10);當飼糧(Met+Cys)/Lys比例降低到0.64時，肉仔雞血漿異亮氨酸濃度顯著增加(P＜0.05)，其他各組間無顯著差異(P＞0.05)，降低到 0.64 和 0.68 時，血漿絲氨酸濃度較比例為0.76的組顯著增加(P＜0.05)。當飼糧(Met+Cys)/Lys比例降低到0.68時，肉仔雞血漿谷氨酸濃度顯著升高(P＜0.05)，其他3組之間無顯著差異(P＞0.05)。降低飼糧(Met+Cys)/Lys比例，肉仔雞血漿甘氨酸濃度呈線性升高(P＜0.05)，酪氨酸濃度呈二次曲線降低趨勢(P=0.05)，但是不同(Met+Cys)/Lys比例飼糧之間血漿甘氨酸和酪氨酸濃度差異不顯著(P＞0.05)。降低(Met+Cys)/Lys比例對肉仔雞血漿其他氨基酸濃度和總氨基酸濃度均無顯著影響(P＞0.05)。

3 討論

3.1 飼糧中不同(Met+Cys)/Lys比例對肉仔雞生長性能和經濟效益的影響

飼糧中Met缺乏可影響雞的體蛋白質合成［5］，導致肉仔雞的體重和體增重顯著降低，料重比顯著增加［6］。本試驗中不同飼糧(Met+Cys)/Lys比例對各日齡階段肉仔雞生長性能均無顯著影響，但是降低飼糧(Met+Cys)/Lys比例，1～35 d肉仔雞料重比有線性升高的趨勢，19～28 d料重比有線性升高的趨勢、平均日增重有線性降低的趨勢。這與 Kalinowski等［1，7］的研究一致，其結果表明在飼糧Cys滿足的情況下，飼糧中不同水平的Met對快慢羽雄性肉仔雞體重和體增重均無影響;降低飼糧Met水平，料重比線性升高，3～6周齡日增重線性降低。也有研究發現，降低飼糧SAA/Lys比例，肉仔雞生長性能線性降低［8］，這可能是與飼糧中Met和Cys比例同時降低有關。因為在Met缺乏的條件下，Met與Cys之間具有顯著的交互作用，Cys可能通過降低與Met分解代謝相關的酶活性，提高與Met合成代謝相關酶的活性，達到節約Met的效應。當動物采食Met缺乏的飼糧時，Cys轉變為Met的再甲基化途徑功能增強，轉硫途徑功能降低，從而提高了Met作為活性甲基供體的利用率，體內Met的儲留及其循環利用率提高［9］。從肉仔雞生長性能和經濟效益分析，在本試驗條件下肉仔雞Met和Cys與Lys的最適比例為0.76，此時肉仔雞飼料轉化率最佳，盡管增加了飼糧中合成Met的添加比例，但是每千克肉仔雞的增重飼料成本卻降低了，每只雞收益分別比(Met+Cys)/Lys比例為 0.64、0.68 和 0.72 的組提高了 0.52、0.24 和 0.34 元。

表7 飼糧中不同(Met+Cys)/Lys比例對30日齡肉仔雞血漿游離氨基酸濃度的影響Table 7 Effects of dietary methionine plus cystine to lysine ratio on the concentrations of free amino acids in plasma of broilers aged 30 days μg/mL

3.2 飼糧中不同(Met+Cys)/Lys比例對肉仔雞血液指標的影響

血漿游離氨基酸濃度在一定程度上能夠反映動物體內氨基酸的代謝狀況，可用來確定氨基酸需要量。氨基酸缺乏或過量均能造成氨基酸失衡，從而影響自身或其他氨基酸的利用［10］。Met是家禽飼料中第一限制性氨基酸，本試驗通過降低飼糧Met水平使(Met+Cys)/Lys比例降低，結果表明肉仔雞血漿Met和Cys濃度顯著地線性降低，各組之間血漿Met濃度差異顯著，而血漿Cys之間無顯著差異，表明降低飼糧Met水平能夠直接影響血漿中Met的濃度。降低飼糧中(Met+Cys)/Lys比例，肉仔雞血漿絲氨酸、甘氨酸和異亮氨酸濃度線性升高。研究發現，絲氨酸是半必需氨基酸，在體內可以由甘氨酸轉化生成，并參與Met的轉硫途徑，Met可以通過增加轉硫途徑導致蘇氨酸、絲氨酸、甘氨酸的缺乏［2］。本試驗中降低飼糧Met水平導致肉仔雞血漿絲氨酸和甘氨酸濃度增加，可能與Met的轉硫途徑受到抑制有關。異亮氨酸屬于支鏈氨基酸，在體內不能合成，必須由飼料供給。本試驗中(Met+Cys)/Lys比例降低到0.64時，肉仔雞血漿異亮氨酸濃度顯著增加，提示異亮氨酸在體內的利用率降低。

在正常情況下，氨在肝臟內轉變成尿素，當體內氨基酸不平衡或含量過高時，氨不能從循環中及時清除，引起血氨增加。在本試驗中，飼糧(Met+Cys)/Lys比例降低到0.64時，肉仔雞血氨濃度顯著降低，可能與飼糧Met嚴重缺乏而導致的體內氨基酸代謝障礙有關。飼糧(Met+Cys)/Lys比例降低到0.68時，肉仔雞血氨濃度顯著增加，同時血漿谷氨酸濃度也顯著增加，這可能與谷氨酸和尿素氮的形成密切相關。飼糧(Met+Cys)/Lys比例為0.72和0.76的組之間肉仔雞血氨濃度無顯著差異，但(Met+Cys)/Lys比例為0.72的組比比例為0.76的組略有降低，不知是否與測定誤差有關，尚需進一步研究。

尿酸和尿素氮是動物機體內氨基酸代謝的終產物，其在血液中的變化可反映體內氨基酸分解代謝的狀況，可以作為飼糧蛋白質或氨基酸在動物體內利用情況的一個重要指標，當氨基酸平衡狀況良好時，血漿尿酸和尿素氮濃度下降。另外，血漿中尿素氮和尿酸濃度還與動物生產性能呈負相關，濃度越低則表明蛋白質沉積越多，越有利于動物生長。在本試驗中，飼糧(Met+Cys)/Lys比例為0.76時，肉仔雞血漿尿素氮和尿酸濃度均顯著降低，說明此時體內氨基酸平衡狀況較好。

4 結論

本試驗條件下，肉仔雞(Met+Cys)/Lys比例的最適值為0.76，此時肉仔雞血漿游離氨基酸平衡較好，可獲得較高的生長性能，經濟效益最高。

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［7］KALINOWSKI A，MORAN E T，Jr.，WYATT C.Methionine and cystine requirements of slow-and fastfeathering male broilers from zero to three weeks of age［J］.Poultry Science，2003，82:1423 －1427.

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