HPLC法測定鹽酸氯丙嗪片的含量

陳玉璞

河南省焦作市食品藥品檢驗所，河南焦作 454000

鹽酸氯丙嗪片為吩噻嗪類抗精神病藥物，主要用于治療興奮躁動、幻覺妄想、思維障礙及行為紊亂等陽性癥狀[1]。 鹽酸氯丙嗪片已經(jīng)用于臨床多年。鹽酸氯丙嗪含量測定方法為中國藥典2010年版二部的紫外分光光度法，該方法在檢測過程中會受到輔料的影響，雜質(zhì)對測定也有不同程度的干擾[2]。筆者采用高效液相色譜法測定其中的含量，方法簡便，結(jié)果更接近真實含量，重現(xiàn)性好，可作為鹽酸氯丙嗪片質(zhì)量控制指標(biāo)。

1 儀器與試藥

UVIKONXL型紫外分光光度計（法國），CPA225D型雙量程電子天平，Agilent Technologies 1200型高效液相色譜儀（LC-10ADVP泵；SPD-10AVP紫外檢測器；CS-Light Potrun Analysis數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)）；鹽酸氯丙嗪原料（常州康普藥業(yè)有限公司，含量99.6%）；鹽酸氯丙嗪片（上海信誼九福藥業(yè)有限公司，H31021537）；水為純凈水，乙腈為液相色譜專用，三氟醋酸為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱 CHROM-Matrix C8柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動相：乙腈-0.5%三氟醋酸（用四甲基乙二胺調(diào)節(jié)pH值至5.3） （50︰50）；流速：1.00 mL/min；檢測波長254 nm；靈敏度：0.01AVFS；柱溫：30℃ ；進樣量：20μL。

2.2 系統(tǒng)適用性試驗

利用上述2.1色譜條件，取空白溶劑即流動相20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取用鹽酸氯丙嗪原料制成的對照品溶液（見2.3.1）及供試品溶液（見2.3.2），分別進樣20μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，從色譜圖上看出，在該色譜條件下，鹽酸氯丙嗪的保留時間約為4.1 min，理論塔板數(shù)為9000以上。見圖1。

圖1 HPLC圖譜

2.3 溶液的制備

2.3.1 對照品溶液 避光操作。取鹽酸氯丙嗪原料適量，精密稱取10.28 mg，置25 mL量瓶中，用流動相超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻。精取5 mL，置25 mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液，濃度為82.24μg/mL。精密量取儲備液10 mL，置25 mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液，濃度為32.90μg/mL。

2.3.2 供試品溶液 避光操作。取樣品10片，除去包衣后，精密稱取細粉適量（約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪10 mg），置100 mL量瓶中，用流動相超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為供試品儲備液。取續(xù)濾液5.0 mL，置100 mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.4 線性關(guān)系的考察

精密量取2.3.1項下的對照品儲備液，用流動相準(zhǔn)確稀釋成鹽酸氯丙嗪的濃度為 3.29、9.87、16.45、23.03、32.90、49.35μg/mL。分別準(zhǔn)確進樣20μL，按2.1色譜條件測定其峰面積，以對照品進樣量（μg）為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，進行線性回歸，得鹽酸氯丙嗪的回歸方程：Y=172353X+10114，r=0.9996。結(jié)果表明，鹽酸氯丙嗪在濃度3.29～49.35μg/mL，范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

表1 鹽酸氯丙嗪片中鹽酸氯丙嗪加樣回收率（n=6）

2.5 精密度試驗

按2.3.1項下的操作，配制對照品溶液。按照2.1的色譜條件，重復(fù)進樣6次，記錄峰面積，結(jié)果鹽酸氯丙嗪的峰面積的RSD=0.71%，表明儀器精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗

取2.3.2項下方法制備的供試品溶液，在室溫下放置后，按照 2.1 的色譜條件，分別在 0、4、8、12、16、20、24 h，取該溶液20μL注入液相色譜儀，測定峰面積，結(jié)果鹽酸氯丙嗪峰面積的RSD=0.33%。表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7 重復(fù)性試驗

取批號100702的樣品，按照2.3.2項下的操作，平行制備6份供試品溶液，照2.1的色譜條件，分別進行6次進樣，每次20μL，測定峰面積，結(jié)果鹽酸氯丙嗪含量的RSD=0.81%。表明重現(xiàn)性較好。

2.8 加樣回收率試驗

取批號100702的樣品6份，分別取約0.05 g，精密稱定，分置100 mL量瓶中，分別加入對照品溶液10.0 mL，用流動相超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，按色譜條件2.1測定，結(jié)果見表1。

2.9 樣品中鹽酸氯丙嗪的含量測定

取3批樣品各10片，除去包衣后，精密稱定，按擬訂的方法制備供試溶液與對照品溶液。分別準(zhǔn)確進樣20μL，按上述色譜條件，以峰面積計算，結(jié)果見表2。

表2 樣品中鹽酸氯丙嗪的含量測定結(jié)果

3 討論

取2.3.1項下的對照品溶液，用UVIKONXL型紫外分光光度計，以流動相為空白，在200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描，在254 nm波長處有最大吸收，故選用254 nm作為鹽酸氯丙嗪的試驗檢測波長[3]。

試驗流動相的不同比例，最終選擇流動相為乙腈-0.5%三氟醋酸（用四甲基乙二胺調(diào)節(jié)pH值至5.3）（50︰50），此時出峰時間適宜，峰形滿意程度高。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典（二部）[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005:29-31.

[2] 國家藥典委員會.中國藥典（二部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010:784-785.

[3] 趙素珍,宋衛(wèi)云.高效液相色譜法測定清熱止瀉合劑中葛根素的含量[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2007,4（30）:87-88.