免疫組化在肺小細胞癌支氣管鏡活檢標本鑒別診斷中的應用

牛春波,賈飛勇,辛 華,王雪梅,王麗萍*

(1.吉林大學中日聯誼醫院,吉林長春130033;2.吉林大學第一醫院 兒內科)

本研究旨在分析肺小細胞癌(SCLC)與鱗狀細胞癌(SCC)相關蛋白表達特點,探討免疫組化方法在兩者鑒別診斷中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 選擇吉林大學中日聯誼2009年1月-2010年8月支氣管鏡活檢標本,均為10%中性福爾馬林液固定,常規石蠟包埋,HE染色制片。顯微鏡觀察支氣管鏡活檢標本的病理形態,首先篩選診斷小細胞癌和鱗狀細胞癌共60例,觀察兩種類型肺癌的病理形態特點;并選擇病理形態不能確切分型而疑似兩種類型的標本29例,其中男17例,女12例,年齡42-65歲,并進一步檢測實驗組癌組織CD56、PAX-5、TTF1、CgA、Syn、CK5/6及 P63蛋白表達。

1.2 方法

1.2.1 形態學分型判斷 觀察HE染色切片病理形態特征,做出初步形態學分型鑒別。

1.2.2 蛋白表達檢測及結果判定 應用免疫組化SP法檢測29例支氣管鏡活檢標本各相關蛋白表達 ,CD56、PAX-5、TTF1、CgA、Syn、CK5/6 及 P63 均為即用型抗體,購自福州邁新生物技術開發有限公司,按試劑盒說明書步驟進行染色。用PBS代替一抗作陰性對照,用已知陽性組織作為陽性對照。CD56和CK5/6為細胞膜陽性,PAX-5、TTF1及P63為細胞核陽性,CgA和Syn為細胞漿陽性。

1.3 統計學分析 采用SPSS10.0軟件進行進行統計分析,組間比較用 χ2檢驗。

2 結果

2.1 肺小細胞癌的病理形態特征 小細胞癌細胞體積小,約是靜止淋巴細胞的2-3倍,組織處理好時觀察細胞略偏大。細胞呈圓形或橢圓形,胞質少,染色質呈細顆粒狀,核仁不明顯或缺乏核仁,核分裂易見。細胞排列呈梁狀、緞帶狀、巢狀等,可見菊形團形成。低分化鱗癌細胞核略大,短梭形或橢圓形,核染色質較粗糙,核仁明顯,胞漿豐富,細胞界限清楚,常可見間橋,癌細胞巢周圍可有基底細胞樣排列。部分病例兩種類型肺癌存在形態上的重疊。

2.2 肺小細胞癌與非角化鱗狀細胞癌的免疫表型

見表1,2。

表1 實驗組肺癌的相關蛋白表達(n=29)

表2 肺小細胞癌與非角化鱗狀細胞癌的免疫表型對比(n=29)

3 討論

本研究檢測肺小細胞癌支氣管鏡活檢標本CD56陽性率較高(20/21例),其在小細胞癌的表達遠遠高于其它神經內分泌標記,是肺細胞癌最穩定表達的蛋白標記[1-5]。PAX-5是一種B細胞特異性激活蛋白(BSAP),是一種新的B細胞標記,用于B細胞淋巴瘤的病理診斷。最近有報道PAX-5在神經內分泌腫瘤中有不同程度的表達[6],小細胞癌和Merkel細胞癌陽性表達,而在類癌表達陰性,被用于分化差的神經內分泌癌的鑒別診斷,并可作為CD56和其它神經內分泌標記陰性時的補充診斷標記。本研究檢測肺小細胞癌支氣管鏡活檢標本,PAX-5陽性率也很高(13/21例),且一例CD56陰性小細胞癌標本PAX-5陽性,可作為其與低分化鱗狀細胞癌鑒別診斷的標記。甲狀腺轉錄因子(TTF-1)是在正常甲狀腺和肺上皮細胞表達的一種轉錄調節因子,在肺和甲狀腺的組織發生和細胞分化過程中起重要的調節作用。文獻報道在TTF-1在肺小細胞癌表達陽性率達80%-100%,而在鱗狀細胞癌陽性率小于10%。本研究結果顯示肺小細胞癌支氣管鏡活檢標本,TTF-1陽性率也很高(20/21例),而低分化鱗狀細胞癌只有少數病例表達(1/8),表明TTF-1結合其他蛋白標記指標,可作為其與低分化鱗狀細胞癌鑒別診斷的標記。P63和CK5/6是肺鱗狀細胞癌的診斷標記物[7]。P63同P53一樣屬于腫瘤抑制基因家族成員,廣泛表達于多種器官來源的具有鱗狀上皮分化潛能的基底細胞和儲備細胞,很少表達于肺小細胞癌和肺腺癌。CK5/6是上皮細胞標志物,其在近60%的鱗狀細胞癌陽性表達,在小細胞癌很少表達。本研究結果顯示肺小細胞癌支氣管鏡活檢標本,P63和CK5/6的陽性率很低(2/21及1/21例),而低分化鱗狀細胞癌標本大多陽性表達(均7/8例),表明兩者可作為小細胞癌與低分化鱗狀細胞癌鑒別診斷的標記。

聯合檢測多種蛋白表達能夠準確鑒別肺小細胞癌和低分化鱗狀細胞癌,免疫組化方法在兩種類型肺癌的病理鑒別診斷中具有重要的應用價值。

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