腦栓通顆粒活血化瘀作用的實驗研究

孟 莉， 焦富英， 向紹杰， 喬 敏， 秦文艷， 李 淼

(遼寧省中醫藥研究院，遼寧沈陽 110034)

1 材料與方法

1.1 實驗動物

ICR小鼠，♀♂各半，體重18～22 g，由吉林大學基礎醫學院實驗動物中心提供，SPF級，許可證號:SCXK(吉)2007－0003;Wistar大鼠，250 g ～ 300 g，♀♂各半，由軍事醫學科學院實驗動物中心提供，SPF 級，許可證號:SCXK(軍)2007－004。

1.2 藥品與試劑

腦栓通顆粒，由遼寧省中醫藥研究院藥學實驗室提供，黃色至棕黃色顆粒，1 g顆粒含3.2 g生藥，批號:20080924;通心絡膠囊，石家莊以嶺藥業股份有限公司，批號:080735。鹽酸腎上腺素注射液，上海禾豐制藥有限公司，批號:080405;戊巴比妥鈉，中國醫藥集團上?；瘜W試劑廠，批號:F20030816;烏拉坦，中國醫藥集團上?；瘜W試劑公司，批號20020808;水合氯醛，青島市第二制藥廠，批號840408。

1.3 儀器

BI－2000醫學圖像分析系統，成都泰盟儀器有限公司;FASCO－3010A全自動血流變快測儀，重慶大學維多生物工程研究所;YLS－14A小動物血栓生產儀，山東省醫學科學院設備站。DT－100分析天平，北京光學儀器廠。

1.4 方法

1.4.1 小鼠耳廓微循環實驗［4－5］小鼠50只，♀♂各半，按體重隨機分5組:空白對照組、腦栓通顆粒低、中、高劑量組(18.85 g生藥/kg、37.70 g生藥/kg、75.40 g生藥/kg)，通心絡膠囊組(0.81 g/kg)。每天灌胃給藥1次，連續7 d。試驗前禁食不禁水，于末次給藥后45 min，以戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，將小鼠側臥在觀察臺上，耳廓平展于載物臺上，在微循環觀察儀下對固定視野進行觀察，記錄耳廓微動脈的流速、流態、管徑。小鼠尾靜脈注射鹽酸腎上腺素0.25 mg/kg造成實驗性微循環障礙，于2 min、8 min分別觀察耳廓微動脈的流態(線流5分、線粒流4分、粒線流3分、粒流2分、擺流1分、停止0分)、流速和管徑的變化情況。

1.4.2 大鼠血液流變學實驗［6－7］大鼠60只，♀♂各半，按體重隨機分為6組，即空白對照組，模型對照組，腦栓通顆粒低、中、高劑量組(13.05 g生藥/kg、26.10 g 生藥/kg、52.20 g 生藥/kg)，通心絡膠囊組(0.56 g/kg)。每天灌胃給藥1次，連續給藥7 d，空白對照組和模型對照組給予等容積的蒸餾水。末次給藥前1 d，于給藥后1 h皮下注射0.08 mg/kg的腎上腺素兩次，間隔4 h，第一次給予腎上腺素后2 h，除空白對照組外將其余各組大鼠放入冰水中5 min。試驗前禁食不禁水，于末次給藥后1 h，用20%烏拉坦腹腔注射麻醉，腹主動脈取血，肝素鈉抗凝，每只取血5 mL，測定全血高、中、低切血黏度，紅細胞聚集指數，紅細胞電泳時間。

1.4.3 大鼠血栓生成的實驗［4－8］大鼠50只，♀♂各半，按體重隨機分為5組，即空白對照組，腦栓通顆粒低、中、高劑量組(13.05 g生藥/kg、26.10 g生藥/kg、52.20 g生藥/kg)，通心絡膠囊組。每天灌胃給藥1次，連續給藥7 d，空白對照組給予等容積的蒸餾水。試驗前禁食不禁水，于末次給藥后1 h，以10%的水合氯醛腹腔注射麻醉，剝離一側頸總動脈，用血栓生成儀的探頭夾住剝離好的頸總動脈，在1.2 mA電流下刺激5 min，記錄阻塞率，刺激結束后立即取出血栓稱重。

1.5 統計學處理

2 結果

2.1 對小鼠耳廓微循環的影響

各組滴加腎上腺素2 min后，流態、流速、管徑與滴腎上腺素前有顯著差異(P﹤0.001，P﹤0.001，P﹤0.05)，見表1～3。8min后除腦栓通高劑量組外，低、中劑量組流態與滴腎上腺素前比較仍有顯著差異(P﹤0.05，P﹤0.01)。說明腦栓通高劑量組滴腎上腺素8 min后流態已基本恢復。8 min后各給藥組流速、管徑與滴腎上腺素前比較均無顯著差異。說明給藥組滴腎上腺素8 min后流速、管徑基本已基本恢復。提示腦栓通顆粒具有改善小鼠耳廓膜微循環障礙的作用。

2.2 對大鼠血液流變學的影響

腦栓通顆粒低、中、高劑量組與模型對照組比較均能降低高、中、低切狀態下的全血黏度，其中腦栓通中、高劑量組，與模型對照組比較有顯著差異(P﹤0.05，P﹤0.01)。低、中劑量組能增加紅細胞聚集指數，與模型對照組比較有顯著差異(P﹤0.05);腦栓通顆粒低、中、高劑量組均能縮短紅細胞電泳時間，與模型對照組比較有顯著差異(P﹤0.05，P﹤0.01，P﹤0.05)，見表4。提示腦栓通顆粒具有改善血流變的作用。

表1 腦栓通顆粒對小鼠耳廓微循環流態的影響(±s)

表1 腦栓通顆粒對小鼠耳廓微循環流態的影響(±s)

與滴加腎上腺素前比較，*P﹤0.05，**P﹤0.01，***P﹤0.001。

8 min空白對照組 — 10 5.00±0.00 2.10±0.87*** 3.80±0.63組別 劑量/(g生藥/kg) 動物數/只 流態滴腎上腺素前 滴腎上腺素后2 min 滴腎上腺素后***腦栓通顆粒低劑量組 18.85 10 5.00±0.00 2.90±0.57*** 4.40±0.52**腦栓通顆粒中劑量組 37.70 10 5.00±0.00 2.80±0.60*** 4.60±0.30*腦栓通顆粒高劑量組 75.40 10 5.00±0.00 2.60±0.52*** 4.70±0.48通心絡膠囊組 0.81(g/kg) 10 5.00±0.00 2.60±0.84*** 4.30±0.67**

表2 腦栓通顆粒對小鼠耳廓微循環流速的影響(±s)

表2 腦栓通顆粒對小鼠耳廓微循環流速的影響(±s)

與滴加腎上腺素前比較，*P﹤0.05，***P﹤0.001。

8 min空白對照組 — 10 108.40±16.53 45.80±17.56*** 91.65±18.26組別 劑量/(g生藥/kg) 動物數/只 流速/(μm/s)滴腎上腺素前 滴腎上腺素后2 min 滴腎上腺素后*腦栓通顆粒低劑量組 18.85 10 110.00±15.76 55.20±14.49*** 103.00±13.12腦栓通顆粒中劑量組 37.70 10 115.11±8.55 55.29±16.06*** 111.70±7.54腦栓通顆粒高劑量組 75.40 10 117.60±17.18 57.82±15.46*** 114.81±17.27通心絡膠囊組 0.81(g/kg) 10 120.60±14.42 59.30±11.04***111.16±12.35

表3 腦栓通顆粒對腎上腺素致小鼠微循環障礙的管徑的影響(±s)

表3 腦栓通顆粒對腎上腺素致小鼠微循環障礙的管徑的影響(±s)

與滴加腎上腺素前比較，*P﹤0.05，**P﹤0.01。

8 min空白對照組 — 10 4.76±0.76 3.65±0.84** 4.09±0.67組別 劑量/(g生藥/kg) 動物數/只 管徑/μm滴腎上腺素前 滴腎上腺素后2 min 滴腎上腺素后*腦栓通顆粒低劑量組 18.85 10 4.64±0.81 3.50±0.85** 4.48±0.75腦栓通顆粒中劑量組 37.70 10 4.52±0.75 3.44±0.80** 4.27±0.84腦栓通顆粒高劑量組 75.40 10 4.93±0.59 3.72±0.78** 4.81±0.65通心絡膠囊組 0.81(g/kg) 10 4.88±0.77 3.42±0.67**4.56±0.74

表4 腦栓通顆粒對血瘀大鼠血液流變學的影響(±s，n=10)

表4 腦栓通顆粒對血瘀大鼠血液流變學的影響(±s，n=10)

與空白對照組比較，△P＜0.05，△△△P＜0.001;與模型對照組比較，*P﹤0.05，**P﹤0.01。

/min空白對照組 — 5.47±0.76 6.55±0.95 12.63±1.66 10.38±2.02 2組別 劑量/(g生藥/kg)全血黏度/(mpa·s)高切/(200/s) 中切/(100/s) 低切/(30/s ) 紅細胞聚集指數 紅細胞電泳時間0.53±2.85模型對照組 — 7.28±0.47△△△ 8.73±0.57△△△ 15.83±0.83△△△ 12.15±1.05 27.31±1.78△腦栓通顆粒低劑量組 13.05 6.55±0.93* 7.88±1.15 14.85±1.87 10.45±1.98* 24.56±3.49*腦栓通顆粒中劑量組 26.10 6.32±1.22* 7.58±1.49* 14.22±2.34* 10.42±1.71* 22.69±4.32**腦栓通顆粒高劑量組 52.20 6.56±0.60** 7.99±0.68** 14.89±1.05* 11.29±0.83 24.94±2.09*通心絡膠囊組 0.56(g/kg) 7.08±0.65 8.51±0.78 15.64±1.17 11.15±2.4 26.56±2.42

2.3 對大鼠血栓生成的影響

腦栓通顆粒高劑量組與空白對照組比較，平均阻塞率有顯著差異(P﹤0.05);腦栓通中、高劑量組血栓濕重，與空白對照組比較有顯著差異(P﹤0.05)，見表5。提示腦栓通顆粒具有抑制血小板凝集、抗血栓形成的作用。

表5 腦栓通顆粒對大鼠血栓生成的影響(±s)

表5 腦栓通顆粒對大鼠血栓生成的影響(±s)

與空白對照組比較，*P﹤0.05。

組別 劑量/(g生藥/kg)動物數/只平均阻塞率/%血栓濕重/mg空白對照組 —10 78.06±0.18 2.29±0.84腦栓通低劑量組 13.05 10 66.02±0.17 1.52±0.94腦栓通中劑量組 26.10 10 65.82±0.11 1.47±0.82*腦栓通高劑量組 52.20 10 62.98±0.19*1.49±0.60*通心絡膠囊組 0.56(g/kg)10 68.96±0.15 1.96±0.69

3 討論

缺血性中風，是中老年人的常見病，包括腦血栓形成、腦栓塞、短暫性腦缺血發作等，具有發病率高、病死率高、致殘率高及并發癥多的“三高一多”的特點［9－10］，嚴重危害著人類健康。缺血性中風的病因，主要是動脈硬化和高血壓。常因心力衰竭、心肌梗塞、心律失常、產后出血、疲勞和睡眠等，引起血壓降低，血流緩慢，血黏度增加或血液凝固性異常增高而產生血栓。活血化瘀作用有助于預防腦血栓的形成，進而預防和改善腦血管阻塞性疾患，從而使大腦的缺血狀態得到改善，預防缺血性腦中風的發生［11－12］。實驗結果表明，腦栓通顆粒能顯著加快血流速度，擴張血管，從而改善小鼠的微循環障礙;能明顯降低血瘀大鼠高、中、低切狀態下的全血黏度，降低紅細胞聚集指數，縮短紅細胞電泳時間;能抑制大鼠血栓形成。提示腦栓通顆粒具有顯著的活血化瘀作用，為臨床預防治療缺血性中風提供實驗依據。

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