香加皮有效部位滴丸的質量標準研究*

楊 虹 ，劉 虹 ，王 萌 ，任曉亮 ，朱曉月

（1.天津中醫藥大學科研處，天津 300193；2.天津中醫藥大學中醫藥研究院，教育部方劑學重點實驗室，天津 300193）

香加皮有效部位滴丸的質量標準研究*

楊 虹1，劉 虹2，王 萌2，任曉亮2，朱曉月2

（1.天津中醫藥大學科研處，天津 300193；2.天津中醫藥大學中醫藥研究院，教育部方劑學重點實驗室，天津 300193）

[目的]建立香加皮有效部位滴丸的質量標準。[方法]建立了高效液相色譜（HPLC）法進行杠柳毒苷含量測定和杠柳毒苷的均勻度檢查；對滴丸劑進行了常溫下的初步穩定性考察。[結果]香加皮有效部位滴丸含量測定方法學考察的指標均符合有關規定；滴丸均勻度符合要求。[結論]建立了有效部位及滴丸的質量標準，方法簡便、可靠。滴丸劑質量基本穩定。

香加皮；有效部位；滴丸；質量標準；杠柳毒苷

香加皮（Cortex Periplocae）是蘿藦科植物杠柳（Periploca SepiumBge.）的干燥根皮，其最主要的強心苷成分為杠柳毒苷（periplocin）。本院采用現代工藝對專利技術香加皮提取物[1]進行精制，富集了其中的強心苷成分，使杠柳毒苷含量達到50%以上，制成香加皮抗心衰有效部位[2]，并用大鼠離體心臟灌流法對其抗心衰活性進行了驗證。因中藥滴丸劑吸收迅速、口服生物利用度高，故將香加皮有效部位制成滴丸，可用于治療急、慢性心衰。課題組進行了香加皮有效部位滴丸的質量標準研究，包括杠柳毒苷的含量測定及含量均勻度檢查；另外對有效部位滴丸常溫下的穩定性進行了初步考察。

1 儀器與試藥

Waters515高效液相色譜儀。杠柳毒苷對照品（天津中醫藥大學中醫藥研究院，純度98%以上）；香加皮有效部位（天津中醫藥大學中醫藥研究院，杠柳毒苷含量53%）；聚乙二醇6 000（分析純，天津市北方化玻購銷中心），液體石蠟（分析純，天津市北方天醫化學試劑廠）；乙腈（色譜純，天津市康科德科技有限公司），超純水（Millipore系統），甲醇（色譜純，天津市康科德科技有限公司）。

2 方法與結果

2.1 香加皮有效部位滴丸的制備 取40 g聚乙二醇6 000加熱融化，將260mg香加皮有效部位加入上述基質中，充分攪拌使其分散均勻，倒入滴丸儲液器中（外壁通80～85℃循環水），以每分鐘30滴的速度滴入冷卻柱（柱內裝液體石蠟，外壁裝涼水加碎冰）。使滴丸完全冷卻后，取出擦干，即得。

2.2 含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱為依利特HypersilODS-2柱（250mm×4.6mm，5μm），乙腈－水（27:73）為流動相，流速1.0mL/min，柱溫25℃，檢測波長220 nm。

2.2.2 對照品溶液的制備 精密稱取杠柳毒苷對照品適量，用甲醇配成濃度為每1mL含杠柳毒苷0.18mg的對照品儲備液。

2.2.3 供試品溶液的制備 取樣品10粒，研細，精密稱取40mg，置10mL量瓶中，加適量甲醇，超聲提取10min，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45 μm）濾過，取續濾液，即得。

2.2.4 線性關系的考察 精密吸取杠柳毒苷對照品儲備液 1、1.5、3、2.5、5mL 分別置 25、25、25、10、10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，分別取儲備液及系列濃度稀釋液10μL注入色譜儀，測定峰面積。以進樣量（X）為橫坐標，峰面積（Y）為縱坐標，繪制標準曲線。得回歸方程 Y=1.3×106X-1.8×103，r＝0.999 9，線性范圍 0.071 84～1.796μg。

2.2.5 精密度實驗 精密吸取供試品溶液，重復進樣6次，測得杠柳毒苷峰面積相對均數標準差（RSD）為1.8%，結果見表1。

2.2.6 供試品穩定性實驗 取同一供試品溶液，分別于 0、2、4、6、8 h 進樣，測定杠柳毒苷峰面積變化，8 h內峰面積RSD為1.5%，表明供試品溶液在8 h內穩定。

表1 精密度實驗測定結果Tab.1 The resultsof precision test

2.2.7 重復性實驗 取同一樣品，按2.2.3分別制備6份供試品溶液，測定杠柳毒苷含量，RSD為2.0%，結果見表2。

表2 重復性實驗測定結果Tab.2 The resultsof repeatability test

2.2.8回收率實驗 采用加樣回收法，精密稱取已知含量的有效部位滴丸，分別精密添加一定量的杠柳毒苷對照品，按樣品含量測定項下方法操作，測定，平均回收率100.7%，RSD為1.1%，結果見表3。

表3 滴丸中杠柳毒苷的回收率測定結果Tab.3 The resultsof average recovery of periplocin in drop pills

2.2.9 樣品含量測定 取3批香加皮有效部位滴丸，分別按2.2.3制備供試品溶液。精密吸取對照品溶液10μL，供試品溶液15μL，分別注入液相色譜儀，記錄峰面積，外標法計算含量，測定結果見表4。色譜圖見圖1。

表4 三批香加皮有效部位滴丸測定結果（n=3）Tab.4 The determ ination resultsof3 batchsof effective fraction drop pills in Cortex Periplocae

2.3 溶散時限 取香加皮有效部位6粒，按照崩解時限檢查法（中國藥典2005版一部附錄IK）滴丸劑項下檢查，結果見表5。

表5 香加皮有效部位滴丸溶散時限考察Tab.5 The dissolve latitudeofeffective fraction drop pills in Cortex Periplocae

結果表明：3批滴丸溶散時限均在30 min以內，符合中國藥典2005版一部附錄滴丸劑項下的有關規定。

2.4 含量均勻度 取香加皮有效部位滴丸10粒，照含量均勻度檢查法（中國藥典2005版二部附錄XE）檢查，結果分別見表6。

表6 香加皮有效部位滴丸含量均勻度考察Tab.6 The contentuniform ity of effective fraction drop pills in Cortex Perip locae

結果表明：按照含量均勻度檢查法（中國藥典2005版二部附錄XE）檢查，滴丸的含量均勻度均符合規定。

2.5 常溫下滴丸的穩定性初步考察 將香加皮有效部位滴丸于常溫避光下密封保存，于不同時間取樣，按2.2測定杠柳毒苷的含量，測定結果見表7。按2.3測定溶散時限，按2.4測定均勻度，結果均符合規定。

結果表明，香加皮有效部位滴丸在室溫避光下保存6個月，質量基本穩定。

3 討論

3.1 研究建立了香加皮有效部位滴丸的質量標準。研究建立了該滴丸中杠柳毒苷的含量測定方法，該方法簡便、準確、可靠。對該滴丸進行了溶散時限及含量均勻度檢查，均符合藥典規定。

3.2 《中國藥典》（2005版）一部附錄IK對中藥滴丸劑只要求做重量差異、溶散時限的檢查[3]，考慮本滴丸劑主藥和基質比例相差較大，而且強心苷類成分有一定毒性，參考中國藥典2005版二部附錄XE含量均勻度項下的規定[4]：每個標示量小于2mg的滴丸劑應檢查含量均勻度，故將本滴丸重量差異檢查改為含量均勻度檢查更為合理。

表7 香加皮有效部位滴丸穩定性結果Tab.7 The stability ofeffective fraction drop pills in Cortex Perip locae

3.3 中藥有效部位中有效成分含量較高，將有效部位制備成滴丸劑，既可滿足臨床需要，又可減少服用量，增加患者順應性，實現了中藥“三小、三效、三便”的現代化需求[5-6]。

[1]張伯禮，劉 虹，高秀梅，等.香加皮強心作用有效提取物、制備方法及用途[P].中國：專利號：ZL200410019975.5.

[2]劉 虹，高秀梅，張伯禮，等.香加皮強心作用有效部位的制備方法及含它們的藥物制劑和醫療用途 [P].中國：專利號：200510013382.2.

[3]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京:化學工業出版社，2005：附錄IK.

[4]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(二部)[S].北京:化學工業出版社，2005：附錄XE.

[5]劉 虹，楊 虹，王 萌，等.大孔樹脂純化香加皮提取物的工藝考察[J].天津中醫藥大學學報，2006，25（3）：188-190.

[6]劉 虹，孫 巍，王 萌，等.正交實驗優化香加皮藥材的提取工藝[J].天津中醫藥大學學報，2006，25（1）：38-39.

Study on quality standard ofeffective fraction drop pills in Cortex Periplocae

YANGHong,LIUHong,WANGMeng,etal
(1.Managementoffice ofscientific research of Tianjin University of TraditionalChineseMedicine,Tianjin 300193,China；2.Research institute of Tianjin University of TraditionalChineseMedicine,Tianjin 300193,China)

[Objective]To establish quality standard ofeffective fraction drop pills foranti-heart failure in Cortex Periplocae.[Methods]HPLCmethod was adopted for content determination of periplocin and contentuniformity in drop pills.The primary study wasmade on the stability ofdrop pillsunder the room temperature.[Results]Themethodology of contentdetermination for the drop pillsand the uniformity complied with rules.[Conclusion]The quality standard of the effective fraction drop pills foranti-heart failure in Cortex Periplocaewas setup and themethod was convenientand reproducible.The drop pillswere relatively stable.

Cortex Periplocae;effective fraction;drop pills;quality standard;periplocin

R284.2

A

1672-1519(2011)04-0332-03

國家科技支撐計劃“重大新藥創制”重大專項（2009ZX09103－372）。

楊 虹（1981－），女，研究實習員，研究方向為中藥新藥研發。

劉 虹。

2011-04-25）