HPLC法測(cè)定復(fù)方瓜子金合劑中靛玉紅的含量

黃偉 郭潔

(1.陜西國(guó)際商貿(mào)學(xué)院 陜西 咸陽 712046; 2.陜西中醫(yī)學(xué)院 陜西 咸陽 712046)

復(fù)方瓜子金合劑是由瓜子金,大青葉,海金沙,白花蛇舌草,野菊花,紫花地丁六味藥制成的中藥復(fù)方制劑,由復(fù)方瓜子金顆粒改劑型而成[1～2]。具有利咽清熱,散結(jié)止痛,祛痰止咳的功效?，F(xiàn)代藥理研究證明大青葉中含靛藍(lán)、靛玉紅等活性成分,具有明顯的抗炎、解熱作用。本試驗(yàn)參照有關(guān)文獻(xiàn)[3],采用高效液相色譜法對(duì)制劑中的大青葉所含的靛玉紅進(jìn)行了定量控制,測(cè)定快捷、準(zhǔn)確、可靠。

1 儀器和試藥

儀器:SSI高效液相色譜儀(美國(guó)SSI公司)。Phenomenex ODS(5μm,250mm×4.6mm ID色譜柱;SSI P4000泵;SSI 500UV/Vis檢測(cè)器;5mL定量環(huán)。HW-2000色譜工作站(千譜軟件有限公司)。塞多利斯BP211D電子天平。

試劑:甲醇為色譜純?cè)噭?美國(guó)TEDIA公司);水為二次蒸餾水;其余試劑為分析純(西安化學(xué)試劑廠)。

試藥:靛玉紅對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所(批號(hào)0717-200003;供含量測(cè)定用)。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備

萃取次數(shù)的考察:精密量取本品30mL,置100mL燒瓶中,加氯仿30mL,加熱回流3次,每次30min,分取第1、2、3次的氯仿層,分別用氯仿飽和的水洗2次,每次20mL,氯仿層再用適量無水硫酸鈉脫水后,蒸干,殘?jiān)蛹状际谷芙?定容至25mL量瓶中,0.45μm微孔濾膜濾過,進(jìn)樣,測(cè)定峰面積,結(jié)果表明回流萃取2次,靛玉紅可提取完全。

2.2 靛玉紅線性關(guān)系

取靛玉紅對(duì)照品溶液(0.0307mg/mL)適量,用甲醇分別配制成濃度為0.00307、0.00614、0.00921、0.0123、0.0154mg/mL對(duì)照品溶液,進(jìn)樣,記錄色譜圖,測(cè)定峰面積,結(jié)果。并以峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行回歸,得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程y=5E+06x+8235.3,r=0.9997。結(jié)果表明,靛玉紅在0.0154～0.0770μg范圍內(nèi),峰面積值與進(jìn)樣量有良好的線性關(guān)系。

2.3 精密度試驗(yàn)

取配制好的供試品溶液(批號(hào)100801),按擬定的色譜條件測(cè)定,重復(fù)進(jìn)樣5次,結(jié)果供試品峰面積平均值為184041,RSD%=0.93。表明本測(cè)定方法精密度良好。

2.4 溶液的穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試液(批號(hào)100801)分別在不同間隔時(shí)間(0、2、4、6、8h)進(jìn)樣,結(jié)果供試品峰面積平均值為183770,RSD%=1.02。表明供試品溶液在8小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定。

表1 中試樣品中靛玉紅含量測(cè)定結(jié)

2.5 回收率試驗(yàn)

取靛玉紅對(duì)照品(濃度為0.0307mg/mL)3mL、3mL、5mL、5mL、7mL、7mL,分別置100mL燒瓶中,揮干,再分別加入已知含量的樣品(批號(hào)100801)15mL,按上述樣品制備方法和色譜條件制備加樣回收供試品溶液,并注入高效液相色譜儀,計(jì)算回收率,試驗(yàn)結(jié)果表明,平均回收率為99.80%,RSD%為2.03%(n=6),符合定量測(cè)定要求。

2.6 樣品測(cè)定

取5批中試樣品,按上述方法測(cè)定其靛玉紅的含量,測(cè)定結(jié)果見表1。

3 結(jié)論

采用高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方瓜子金合劑中靛玉紅的含量,方法可靠、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏、重現(xiàn)性好,回收率等均符合要求,可作為該制劑的質(zhì)量控制方法。

[1]復(fù)方瓜子金顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS3-B-2749-97,國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第14冊(cè),國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.

[2]中華人民共和國(guó)藥典,2010年版一部,國(guó)家藥典委員會(huì),北京:化學(xué)工業(yè)出版社.

[3]苗明三,李振國(guó)主編.《現(xiàn)代實(shí)用中藥質(zhì)量控制技術(shù)》·北京:人民衛(wèi)生出版社,2000.