超高壓法提取山楂中熊果酸的最佳工藝研究

駱曉沛 張守勤 董雯 麗

摘 要：以熊果酸的提取率為指標，采用單因素與正交實驗相結合的方法對超高壓提取工藝進行了優化，得到最佳提取參數為：料液比1：60 ，乙醇體積分數60%、浸泡時間4小時、壓力200mPa。在該條件下，熊果酸的提取率：6.08%。該工藝簡單合理，為工業生產提供了理論參考。

關鍵詞：山楂；熊果酸；超高壓提取工藝

中圖分類號：R284.2 文獻標識碼：A

引言

山楂為薔薇科植物山楂( Crataegus pinnatifida Bge. )的成熟果實，重要的藥用價值，我國古代醫學家早已重視山楂的軟堅消積作用[1]，目前，已有50多種中藥配方以山楂作原料，如常見的開胃健脾藥有“山楂丸”、“焦三仙”等。據報道山楂中的三萜酸是山楂降脂和抗腫瘤有效部位，其主要有效成分為熊果酸、齊墩果酸等三萜酸[2]。

熊果酸是存在于天然植物中的一種三萜類化合物，具有鎮靜、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗潰瘍、降低血糖，抗癌、抗病毒等作用[3]，熊果酸還具有明顯的抗氧化功能，因而被廣泛地用作醫藥和化妝品原料。本課題充分利用我國山楂資源，以熊果酸的提取率為檢測指標，考察了料液比(A) 、溶劑濃度(B) 、浸泡時間(C) 和壓力(D) 四個影響因素，研究山楂中熊果酸的超高壓提取參數，開辟出能適合工業生產的提取條件。

1 材料與方法

1.1 材料

DL700超高壓等靜壓機(上海大隆機器廠)；紫外可見分光光度計27520型(上海精密科學儀器有限公司)；MA110電子天平(上海良平儀器儀表有限公司)； RE－52旋轉蒸發器(上海安亭電子儀器廠)。

山楂果片，購于吉林大藥房；熊果酸對照品，購于上海友思生物技術公司。其他試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 山楂熊果酸的超高壓提取

將山楂果片干燥后粉碎成40目粉末， 精密稱取山楂果粉末1g，準確加入一定量的溶劑， 混勻，塑封，浸泡，按預先設計的參數超高壓處理[4]，過濾，定容。用分光光度法測量吸光度(A)值。

1.2.2 紫外分光光度法測定熊果酸含量[5]

標準溶液的配制：精密稱取干燥至恒重的熊果酸對照品25mg，置25ml容量瓶中，加無水乙醇，輕搖使充分溶解，定容，搖勻，得1.0mg/ml蘆丁標準液。

標準曲線的繪制：精密吸取熊果酸對照品無水乙醇液(濃度1.0mg/ml) 0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml水溶揮干，分別加5%香草醛—冰醋酸溶液0.4ml，高氯酸1.0ml，60℃水溶15分鐘，冰浴冷卻，加冰醋酸5.0ml 搖勻，在548nm 處測定吸收值。以熊果酸的濃度為橫坐標，吸收度測定值為縱坐標，做圖得到標準曲線。

1.2.3樣品的測定：吸取樣品液0.2 ml至試管中，步驟同上，在548nm波長處測定吸光度（A）值，根據公式計算出山楂果中熊果酸的提取率Y(%)：

Y＝C×V/0.2 /m×100%

式中：C為按照標準曲線得出的熊果酸濃度；V為過濾后定容體積；m為山楂果樣品質量。

2 結果與討論

根據考察，料液比、溶劑濃度（即乙醇濃度）、提取壓力和浸泡時間對熊果酸提取率影響較大，而提取時間即保壓時間則影響不明顯，因此在單因素試驗的基礎之上，選擇四因素三水平進行正交試驗，分別為：壓力100mPa、200mPa、300mPa；乙醇濃度50％、60％、70％；料液比1：20、1：40、1：60；浸泡時間1小時、2小時、4小時。以熊果酸的提取率作為評價指標，試驗結果見表1。

從表1可以看出:在正交試驗所選條件范圍內， 4個因素對黃酮提取效果影響的順序為: B (乙醇濃度) > C (浸泡時間) > A (料液比) > D (提取壓力) 。最佳工藝條件為:溶劑為60%濃度乙醇，壓力為200mPa， 料液比為1：60， 浸泡時間4小時，提取時間為3min。最高提取率為6.08%。優選得到的工藝穩定、方法可行。

3 結論

山楂，是第一批列入衛生部食藥兼用的水果，已被公認為加工保健食品的最佳原料之一。熊果酸具有廣泛的生物學活性，安全低毒，日本等國家已經將其作為天然抗氧化劑應用于食品中。超高壓技術在我國的應用主要有：高壓殺菌、特色產品的加工、水產品的加工、中草藥的提取[6]。常溫超高壓提取技術具有提取時間短、效率高、節能環保等優勢。研究利用超高壓技術提取山楂中熊果酸的工藝，可以為超高壓技術的應用提供可靠的依據。

參考文獻

[1]全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編(上冊)[M].北京:人民衛生出社，1990.115-117.

[2]山楂中總三萜酸提取工藝的優選，王逸萍; 陳愛萍; 徐智勇;中華中醫藥學刊，2007，（25）4：774-775

[3]熊斌，雷志勇， 陳虹。熊果酸藥理學的研究進展。國外醫學藥學分冊2004，31（3）：133-136。

[4]陳瑞戰，張守勤，王長征.常溫超高壓提取人參總皂苷[J].化工學報.2005（5）：5-56.

[5]王文祥，顧振綸。比色法測定山楂總三萜酸的含量。中國野生植物資源，2006，20（5 ）：47-48。

[6]勵建榮，王泓。超高壓技術在食品工業中的應用及前景?，F代食品科技，2006，22（1）：171-173.

作者簡介：

駱曉沛（1968-），女，黑龍江齊齊哈爾人，副教授，碩士研究生。