鹽酸法舒地爾對(duì)蛛網(wǎng)膜下腔出血后血管痙攣療效觀察

楊福義,譚福生,谷志龍

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科,黑龍江佳木斯 154003)

蛛網(wǎng)膜出血后的血管痙攣是致死、致殘的一個(gè)主要原因[1]。SAH患者約有1/3～2/3會(huì)出現(xiàn) CVS,而導(dǎo)致遲發(fā)型缺血性神經(jīng)功能損害。作為一種新型的擴(kuò)血管藥物,法舒地爾能夠擴(kuò)張腦部血[2],增加局部腦血流量。

1 材料與方法

1.1 主要儀器和試劑

4%多聚甲醛、10%水合三氯乙醛,奧林巴斯生物顯微鏡(BHS型,日本),轉(zhuǎn)輪式組織切片機(jī)(301-268型,德國(guó)Leica公司),病理組織漂烘處理儀(PHY-III型,國(guó)產(chǎn)),病理組織包埋機(jī)(BMZ-III型,國(guó)產(chǎn))。

1.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及分組

①SAH組Wistar大鼠通過(guò)腹腔麻醉后,在操作臺(tái)上備皮消毒。大鼠斷尾取血0.3mL,切開皮膚,通過(guò)環(huán)枕膜,將大鼠血緩慢注入枕大池,注意進(jìn)針深度約2.5mm,速度在0.1mL以內(nèi),切口縫合,消毒。尼莫地平組和法舒地爾組做相同的處理。模型建立后1h候尼莫地平組按3mg/kg的劑量腹腔注射尼莫地平,法舒地爾組同樣處置,計(jì)量為3mg/kg以后每12小時(shí)按同樣劑量給藥,給藥總時(shí)間為24h,之后不再給藥。

②將各組大鼠隨機(jī)分成2次處理,第一次為A組,第二次為B組。A組1d后斷髓法處死各組大鼠,在頸部取出含有腦干的基底動(dòng)脈,放置在多聚甲醛中固定1d。經(jīng)過(guò)固定、脫蠟、包埋,每組各標(biāo)本均切 4張,厚度是 7μ m,進(jìn)行 HE染色。B組為3天后處理大鼠,操作方法與A組相同。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

經(jīng)過(guò)HE染色后的大鼠基底動(dòng)脈發(fā)現(xiàn):第1天處死大鼠中正常對(duì)照組、尼莫地平組和法舒地爾組可見內(nèi)皮細(xì)胞排列緊密,動(dòng)脈內(nèi)膜完整;模型組出現(xiàn)平滑肌細(xì)胞肥大,內(nèi)皮細(xì)胞褶皺、變性,可見炎性細(xì)胞浸潤(rùn),并且管腔直徑明顯小于其他組。第3天處死大鼠的對(duì)照組和法舒地爾組基底動(dòng)脈幾乎沒(méi)變化,而模型組和尼莫地平組大鼠基底動(dòng)脈痙攣達(dá)高峰內(nèi)皮細(xì)胞變化明顯,可見大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。經(jīng)過(guò)各組別之間基底動(dòng)脈管徑測(cè)量,得出管徑大小,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,見表1。

表1 對(duì)照組、模型組、尼莫地平組及法舒地爾組大鼠基底動(dòng)脈管徑數(shù)據(jù)分析結(jié)果(± s,n=5)

表1 對(duì)照組、模型組、尼莫地平組及法舒地爾組大鼠基底動(dòng)脈管徑數(shù)據(jù)分析結(jié)果(± s,n=5)

1)A組中,尼莫地平組和法舒地爾組比較,P＞0.05;;2)B組中,尼莫地平組和法舒地爾組比較,P＜0.05。

對(duì)照組 模型組 尼莫地平組 法舒地爾組A 組 1.625±0.034 0.836±0.0846 1.597±0.047 1.608±0.042______B組_________________________1.617±0.041________________________________________________________________________________________0.629±0.0937_0.986±0.084_1.374±0.075

3 討論

SAH后的腦血管痙攣(CVS)是腦底大動(dòng)脈延遲出現(xiàn)的狹窄,受累血管遠(yuǎn)端分布區(qū)經(jīng)常伴有灌注減少[3]。SAH最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一是CVS,能夠引起彌漫性腦水腫和遲發(fā)性缺血性神經(jīng)損傷,導(dǎo)致SAH致死和致殘的重要原因。研究表明,SAH后CVS的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用是血液及紅細(xì)胞崩解產(chǎn)物氧合血紅蛋白(oxyhemoglobin,OxyHb)。OxyH是血紅蛋白的二價(jià)鐵形式,大量實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明OxyHb是血管痙攣的介質(zhì)[4]。離體的腦動(dòng)脈再注射OxyHb后可持續(xù)收縮,腦池內(nèi)注射OxyHb可致CVS[5]。SAH的腦脊液中的OxyHb與CVS的范圍、程度[6]具有相關(guān)性。血管平滑肌收縮而引起CVS,且持續(xù)一定時(shí)間。收縮是細(xì)胞內(nèi)Ca2+的增加所介導(dǎo)的,依賴Ca2+的肌球蛋白輕鏈激酶(myosin light chain kinase,M LCK)被激活。M LCK使肌球蛋白輕鏈(M LC)磷酸化進(jìn)而使肌動(dòng)蛋白與磷酸化的MLC相互作用,肌球蛋白ATP酶激活,隨后引起平滑肌收縮[7]。單體G蛋白R(shí)ho及下游靶點(diǎn)Rho激酶可是腦血管痙攣持續(xù)存在。在Rho激酶在高血壓和腦血管痙攣這種血管平滑肌相關(guān)的疾病中起主要作用。最近實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示:實(shí)驗(yàn)性SAH后M LCP磷酸化增加,并且這種增加和Rho激酶激活呈正相關(guān)[8]。研究結(jié)果顯示Rho/Rho激酶途徑在SAH后的CVS發(fā)病機(jī)制中起主要作用。傳統(tǒng)藥物尼莫地平通過(guò)影響細(xì)胞膜上的受體和或Ca2+通道來(lái)調(diào)控進(jìn)入細(xì)胞的Ca2+,進(jìn)而引起血管舒張。Rho激酶存于細(xì)胞內(nèi),它可以直接作用于肌球蛋白鏈,作用更直接。Rho激酶抑制劑法舒地爾具有雙重抑制磷酸化的作用,變現(xiàn)以下幾個(gè)方面作用:(1)抑制Rho激酶,增加eNOS的表達(dá),增加了NO生成,從而發(fā)揮對(duì)組織損傷的保護(hù)作用(2)阻斷Rho激酶對(duì)MLCP的抑制,進(jìn)而抑制鈣敏化的效應(yīng),介導(dǎo)平滑肌舒張,使血管擴(kuò)張;(3)拮抗Rho激酶可有效抑制炎性細(xì)胞的遷徙及浸潤(rùn),減少炎癥介質(zhì)的生成,減輕炎癥反應(yīng),抑制蛋白水解和細(xì)胞凋亡。本研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,法舒地爾和尼莫地平,對(duì)CVS的預(yù)防均是有效的,但是法舒地爾作用作用途徑直接,且雙重抑制磷酸化的作用是血管舒張更加持久穩(wěn)定,不易反彈。

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