液基細胞中p53異常表達在宮頸鱗癌診斷中的應用價值

王 宇,劉君星,王 琳,周麗艷

(1.佳木斯大學附屬第一醫院檢驗科,黑龍江 佳木斯154003;2.佳木斯大學基礎醫學院,黑龍江 佳木斯154007)

宮頸癌的死亡率在全球婦女惡性腫瘤死亡率中居第二位,全球每年50萬人宮頸癌新發病例,我國每年約有新發病例13.15萬,占世界新發病例的28.8%[1,2]。p53基因作為重要的抑癌基因被發現其異常表達可導致多種腫瘤的發生,有研究發現其與宮頸鱗癌也存在相關性[3]。液基細胞學檢查因取材方便和無創可作為篩查宮頸病變的重要手段。液基細胞標本p53在宮頸癌及癌前病變中的應用價值還不確定,本研究對112例宮頸癌及正常的液基細胞標本進行p53免疫細胞學化學檢測,從而分析p53異常表達對宮頸鱗癌診斷的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2009—09～2010—07于佳木斯大學附屬第一醫院就診的41例宮頸鱗癌患者,年齡20～62(40.8±7.8)歲,35例健康體檢者,年齡20～60(41.7±6.2)歲,所有患者均經臨床和病理診斷。

1.2 方法

采用免疫細胞化學法和免疫組織化學法檢測p53在SCC組和NILM組范圍的LCT標本和石蠟組織標本上的表達,并對比LCT、LCT聯合p53在宮頸鱗癌的診斷符合率。

1.3 判斷標準

p53陽性細胞判斷標準[4]:細胞核棕黃色為染色陽性,隨機選取10個高倍視野,結合著色范圍及強度進行分級。著色范圍以陽性細胞百分率判斷:10%為0分,11%～25%為1分,26%～50%為2分,51%～75%為3分,＞75%為4分。著色強度根據陽性細胞著色深淺判定:無著色為0分,淺棕黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分,深棕褐色為4分。

1.4 統計學方法

所有數據采用軟件SPSS14.0進行分析,組間采用方差分析。采用spearman等級相關分析檢驗 LCT、LCT中p53免疫細胞染色的關系,P＜0.05為有統計學意義。

2 結果

2.1 LCT中p53異常表達

p53在NILM和SCC各組中的陽性率分別為5.71%(2/35)、58.54%(24/41)。統計學分析,證明p53異常表達在宮頸鱗癌組合宮頸正常組之間存在明顯差異(P＜0.05),結果如表1。

表1 p53表達陽性率及平均著色強度

2.2 宮頸鱗癌中單純LCT與LCT中p53聯合檢測的意義

單純LCT和LCT中p53聯合檢測對宮頸鱗癌有很高的特異性和較好的敏感性,聯合兩項檢測能提高敏感度和準確性。見表2。

表2 宮頸鱗癌中單純LCT與LCT中p53聯合檢測的意義

3 討論

宮頸鱗癌是婦科常見的惡性腫瘤,其發病率僅次于乳腺癌。應用LCT篩查可以明顯地降低宮頸癌發病率和死亡率,與傳統的篩查方法比較能提高宮頸異常細胞的陽性率,但是由于LCT僅依靠主觀的形態學手段,與病理學檢查結果之間仍存在一定程度的不符合率。近年來,隨著醫學分子生物學的發展,腫瘤標志物是腫瘤細胞在癌變過程中由于癌基因的表達而生成的抗原和其它生物活性物質[4],p53基因異常表達與宮頸鱗癌的研究成為熱點。國內Wang[5]等研究表明p53基因的陽性表達與宮頸癌密切相關。p53基因在宮頸鱗癌中有高水平表達,而在正常組織(細胞)中陽性表達極低。本研究應用鼠抗人單克隆抗體Do-7對NILM組和SCC組進行p53蛋白的免疫細胞化學檢測,結果顯示,LCT涂片中,在正常宮頸鱗狀上皮細胞少有p53的陽性表達,SCC組的陽性表達為58.54%(24/41),與文獻報道一致。LCT中p53檢測在宮頸鱗癌組中的檢出率顯著高于正常宮頸組(P＜0.05),說明p53異常表達與宮頸癌的發生關系比密切。p53蛋白可作為子宮頸癌診斷和預后判斷的一項參考指標[6]。單純LCT和LCT中p53聯合檢測,把敏感度提高到65.85%,準確性提高到78.95%。因此推測LCT標本中p53檢測與病理組織相一致,p53作為客觀生物學標記物,可為臨床醫生評估病情,估計病變進展,預測患者的預后提供有價值的輔助指標。綜上所述,p53基因異常表達在宮頸鱗癌的發生中占有重要地位。本實驗通過對LCT標本中p53免疫細胞化學篩查,提高了單純應用細胞學診斷的陽性率,增加了宮頸癌及癌前病變篩查的敏感度和特異性,該方法可減輕患者在病理學診斷中的痛苦,減低對病患部位的損傷,降低采樣成本,簡化采樣程序,這必然被醫生和患者樂于接受。LCT聯合p53因方法簡便、患者痛苦小且較高的敏感性和特異性等優點,可用于宮頸癌的輔助診斷。

[1]Eduardo L.Franco,Duarte-F ranco,Alex Ferenczy.Cervical cancer:epidemiology,prevention and the role of human papillomrirus infection[J].CMAJ,2001,164(7):1017-1025

[2]廖秦平.宮頸癌病因學研究新進展[J].中國婦產科臨床雜志,2003,4(4):243-245

[3]Wu Y,Chen Y,Li L,et al.Associations of high-risk HPV types and viral load with cancer in China[J].J Clin Virol,2006,35(3):264-269

[4]王傳新,王國禮.現代檢驗醫學技術與質量控制[M].暨南:山東科學技術出版社,2004,282

[5]王修珍,顧永平,鄧海珍.表皮生長因子受體和p53在宮頸鱗癌中的表達[J].中國航天醫藥雜志,2003,5(4):14

[6]王四玲.p53蛋白在子宮頸癌組織中表達的臨床意思[J].腫瘤研究與臨床,2003,15(1):38-39