固相萃取-氣質聯用同時測定茶葉中14種農藥殘留

王靜劍，閻玉林，張瑞鋒，王紹飛，趙文英

青島譜尼測試有限公司，山東 青島 266061

茶葉是我國一項大宗出口的農產品，其復雜的組成成分給農藥殘留檢測帶來很多困難，如何提高前處理的凈化效果是許多農殘分析工作者努力解決的問題。本文根據國內外常用、禁用農藥項目，在參考已有文獻的基礎上[1-5]，嘗試建立了PSA粉末分散固相萃取與Envi-Carb/NH2柱洗脫凈化相結合的前處理凈化方法，對茶葉中敵敵畏、甲拌磷、特丁硫磷、嘧霉胺、甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷、喹硫磷、氟硅唑、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯14種農藥殘留進行方法驗證，以期提供這些農藥的方法定量限及加標回收的評價數據。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Agilent GC-MS(7890A-5975C)配有電子轟擊源（EI）；離心機：Eppendorf 5804R；均 質 器：IKA T25 digital Ultra-Turrax；Envi-Carb/ NH2固相萃取小柱（SUPELCO）；N-丙基乙二胺（PSA）粉：40-60μm （Agela）；旋轉蒸發儀：BUCHI V855；氮吹儀：TTL-DC型（北京同泰聯公司）；標準品（德國DR公司）；所用試劑均為色譜純；實驗用水為三重過濾去離子水。

1.2 色譜質譜條件

色譜柱：HP-5（30m×0.25mm×0.25μm）石英毛細管柱或相當者；升溫程序：70℃保持2min，然后以25℃/min程序升溫至150℃，再以3℃/min升溫至200℃，再以8℃/min升溫至280℃，保持10min；載氣：氦氣，純度≥99.999%，流速為1.2mL/min；進樣口溫度：250℃；進樣量：2.0μl； 進樣方式：無分流進樣，1.0min后打開分流閥和隔墊吹掃閥；電子轟擊源：70 eV；離子源溫度：230℃；GC-MS接口溫度：280℃；

1.3 標準溶液的配制

分別稱取100mg（精確至0.1mg）各農藥標準品于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，得1.000mg/mL混合標準溶液，4℃冰箱保存備用。使用前用甲醇稀釋成適當濃度的混合標準溶液。

1.4 實驗方法

1.4.1 樣品提取

稱取粉碎樣品2.0g至50mL離心管中，加入2mL～3mL水，渦旋潤濕，靜置2h以上。加入20 mL乙腈，用高速組織均質器15000R/min勻漿提取1min，并加入5g氯化鈉，再勻漿提取1min，放入離心機3000r/min離心5min，上清液過無水硫酸鈉（約20g）層濾入150mL雞心瓶；殘渣中再加入20mL乙腈重復均質提取一次，合并提取液至雞心瓶中，40℃減壓旋轉蒸發至近干，待凈化。

1.4.2 樣品凈化

PSA分散固相萃取凈化：在雞心瓶中加入丙酮+正己烷（3+7）3mL，渦旋振蕩1min，再加入0.5 g 活化過的PSA粉末，超聲波清洗1min，靜置30 s，取上清液(注意不能將粉末吸入)至10mL玻璃管中，再用丙酮+正己烷（3+7）2mL洗粉末2次，合并提取液在40 ℃用氮氣吹干，再在雞心瓶中加入乙腈+甲苯（3+1）2mL待過柱凈化；

Envi-Carb/ NH2柱洗脫凈化：在Envi-Carb/ NH2柱加入約2厘米高無水硫酸鈉，下接雞心瓶放在固定架上。加樣前先用4mL乙腈+甲苯（3+1）預洗柱，當液面到達硫酸鈉的頂部時，迅速將樣品濃縮液轉移至凈化柱上，再每次用2mL乙腈+甲苯（3+1）三次洗滌樣液瓶，并將洗滌液移入柱中。再用25mL乙腈+甲苯（3+1）洗滌固相萃取柱，收集所有流出物于雞心瓶中，40℃減壓旋轉蒸發至約0.5mL后氮氣吹干，用正己烷定容至1mL，待GC-MS進樣。

2 結果與討論

2.1 定量限、校準曲線

對茶葉中敵敵畏、甲拌磷、特丁硫磷、嘧霉胺、甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷、喹硫磷、氟硅唑、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯14種農藥的定量限及定量限處的信噪比詳見表1。

依據各農藥的定量限，制備濃度系列為0.01μg/mL～5.0μg/mL的農藥基質混合標準溶液，繪制目標農藥的較準曲線。各農藥的線性回歸方程及相關系數詳見表1。

表1 14種農藥的定量限、回歸方程和相關系數

2.2 方法回收率及精密度試驗

按方法定量限、兩倍方法定量限及三倍方法定量限三個濃度進行添加回收試驗，兩人重復試驗，每人重復6次，各農藥在添加水平的平均回收率及相對標準偏差詳見表2。

表2 14種農藥的平均回收率（%）與相對標準偏差（%）

3 結論

本實驗采用PSA粉末分散固相萃取與Envi-Carb/NH2柱洗脫凈化相結合的前處理凈化方法，使用氣質聯用儀（GC-MS）同時對茶葉中14種農藥進行檢測，方法回收率在84.0%～115.8%之間，相對標準偏差為0.8%～11.6%，14種農藥的定量限在0.005mg/kg～0.10mg/kg之間，方法的精密度、準確度均符合要求，可用于茶葉中多農殘的一齊分析。

[1]游飛明，吳芳，陸萬平，張慶，張蘭.固相萃取-氣相色譜法測定茶葉中多種有機磷農藥[J].分析測試技術與儀器，2011，17(1)：6-10.

[2]芮三亞，胡奇，蔡潞莎，陳云雯.茶葉農藥殘留檢測中咖啡因干擾的去除[J].食品科學，2009，30(12)：194-197.

[3]龐國芳，劉永明，范春林，等.水果和蔬菜中500種農藥及相關化學品殘留量的測定氣相色譜-質譜法[S].GB/T 19648-2006.