視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達(dá)變化

孟利娟

(三門峽市中心醫(yī)院，河南 三門峽 472000)

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(RB)的浸潤和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患兒死亡的重要原因。而腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移是一個(gè)多階段、多步驟的復(fù)雜過程，腫瘤新生血管形成和細(xì)胞外基質(zhì)降解是這一過程中的重要環(huán)節(jié)［1］。2010年1～8月，我們采用免疫組化法檢測并比較了RB組織和癌旁正常視網(wǎng)膜組織中的基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)和VEGF，并探討二者與RB分化程度以及視神經(jīng)浸潤的相關(guān)性。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 48例RB患者，男27例、女21例，年齡5個(gè)月～8歲。左眼26例，右眼22例。術(shù)前均未進(jìn)行化療或放療。分化型19例，未分化型29例;未浸潤視神經(jīng)者27例，浸潤視神經(jīng)者21例。取其手術(shù)切除腫瘤組織標(biāo)本為觀察組，以瘤旁正常視網(wǎng)膜組織為對照組。

1.2 MMP-9和VEGF檢測方法 采用免疫組化SP法。操作按試劑盒說明書進(jìn)行。用已知MMP-9和VEGF陽性表達(dá)的乳腺癌組織為陽性對照，PBS代替一抗為陰性對照。

VEGF陽性染色表現(xiàn)為細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核內(nèi)呈現(xiàn)出棕黃色顆粒，MMP-9陽性染色表現(xiàn)為細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。。染色程度評分:無顯色、淺黃色、棕黃色和棕褐色分別計(jì)0、1、2、3分。陽性細(xì)胞率評分:每張切片隨機(jī)選取5個(gè)高倍鏡視野，陽性染色細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的百分比≤5%為0分，6% ～25%為1分，26% ～50%為2分，＞51%為3分。將每張切片染色程度與陽性細(xì)胞率得分相乘的積定為最后得分，最后得分超過4分為表達(dá)陽性［2］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件。組間比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析法。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察組 28例(58.3%)MMP-9陽性，36例(75.0%)VEGF 陽性，對照組分別 為 0、5 例(10.4%)，兩組 MMP-9、VEGF 陽性表達(dá)率相比 P均 ＜0.05。

未分化型RB組織中21例(72.4%)MMP-9陽性、26例(89.6%)VEGF陽性，分化型RB組織中7例(36.8%)MMP-9 陽性、10 例(52.6%)VEGF 陽性，兩者 MMP-9、VEGF陽性表達(dá)率相比 P均 ＜0.05。

有視神經(jīng)浸潤RB組織中20例(95.2%)MMP-9陽性、21例(100%)VEGF陽性，無視神經(jīng)浸潤組織中 8例(29.6%)MMP-9陽性、15例(55.5%)VEGF陽性，兩者M(jìn)MP-9、VEGF陽性表達(dá)率相比P均＜0.05。RB組織中VEGF與MMP-9表達(dá)呈明顯正相關(guān)(r=0.512，P ＜0.05)。

3 討論

腫瘤細(xì)胞發(fā)生浸潤轉(zhuǎn)移的第一步是細(xì)胞外基質(zhì)被降解和基底膜的完整性被破壞?；啄さ耐暾允桥袛嗄[瘤浸潤、轉(zhuǎn)移能力的重要指標(biāo)［3，4］。MMP-9可分解明膠和Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原，其中Ⅳ型膠原是基底膜的主要成分。故MMP-9可加速細(xì)胞外基質(zhì)和血管基底膜降解，使腫瘤細(xì)胞易于侵入血管及淋巴管發(fā)生浸潤轉(zhuǎn)移，引起腫瘤預(yù)后不良［5］。本研究結(jié)果顯示，RB組織中MMP-9陽性表達(dá)率明顯高于瘤旁正常視網(wǎng)膜組織。提示MMP-9可能在RB的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。同時(shí)本研究結(jié)果還顯示，RB中MMP-9的陽性表達(dá)與分化程度和視神經(jīng)浸潤程度有關(guān)。進(jìn)一步證實(shí)RB中MMP-9的表達(dá)與腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移有關(guān)。

VEGF是目前已知最強(qiáng)的促血管形成因子之一。本研究結(jié)果顯示RB中VEGF的陽性表達(dá)率明顯高于瘤旁正常視網(wǎng)膜組織，且與RB分化程度和視神經(jīng)浸潤程度有關(guān)。證實(shí)RB組織中VEGF的表達(dá)與其侵襲轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)。另外本研究結(jié)果還顯示，MMP-9和VEGF在RB中的表達(dá)呈明顯正相關(guān)，表明二者在RB發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮的作用是相互關(guān)聯(lián)的。綜上所述，筆者認(rèn)為MMP-9和VEGF在RB中高表達(dá)，并在RB的分化和視神經(jīng)浸潤中起重要作用。

［1］葛堅(jiān).眼科學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:194.

［2］葛蓁，李玉軍，劉波.MMP-9、TIMP-1和VEGF在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義［J］.山東醫(yī)藥，2007，47(19):53-54.

［3］吳繼紅，徐萍，易苗英，等.體外培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞株及其腫瘤血管生成相關(guān)因子表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中華眼科雜志，2005，41(5):419-422.

［4］程育宏，申家泉，唐俠.基質(zhì)金屬蛋白酶-14和細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義［J］.山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2008，46(4):411-412.

［5］龍華，姜發(fā)綱.MMP-2和MMP-9在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義［J］.眼科新進(jìn)展，2006，26(12):908-910.

［6］底煜，陳曉隆.MMP-2和VEGF在視網(wǎng)膜新生血管中的表達(dá)及意義［J］.眼科研究，2009，27(12):1089-1090.

［7］康劍書，何為民.明膠酶MMP-2和MMP-9及其組織抑制劑與眼科疾病［J］.國際眼科雜志，2009，9(11):2154-2155.

［8］李貞，倪衛(wèi)杰.GM6001抑制視網(wǎng)膜新生血管形成 VEGF和MMP-2 的表達(dá)［J］.國際眼科雜志，2008，8(2):268-269.