副豬嗜血桿菌病的診治

馬偉 夏輝 （山東省臨朐縣畜牧局 262600）

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副豬嗜血桿菌病的診治

馬偉 夏輝 （山東省臨朐縣畜牧局 262600）

副豬嗜血桿菌(Haemophlius parasusi，HPS)病，又稱格拉澤氏病(Glasser’disease)。該病主要發生于斷奶前后和保育舍階段的豬只，通常見于5~8周齡，發病率可達40%，嚴重時死亡率可達50%。通?？蓮慕】地i的鼻腔分泌液中分離出病菌，還可以從患肺炎豬的肺臟中分離出來。副豬嗜血桿菌近年來，隨著藍耳病、圓環病毒病等免疫抑制疾病的流行，使豬群的免疫力大幅下降，由副豬嗜血桿菌引起的豬多發性漿膜炎、關節炎、呼吸困難、高熱等為特征的傳染性疾病頻繁出現，給養豬業帶來極大的經濟損失。

1 病原學

副豬嗜血桿菌隸屬于巴氏桿菌科嗜血桿菌屬，是一種多形態、非溶血性、不運動的革蘭氏陰性細小桿菌。從病灶中新分離的菌株多成球桿狀或雙球狀，有時可成短鏈。在陳舊培養物中成多形態，有長桿狀和絲狀。

該菌生長時嚴格需要NAD，不需要血紅素和其他卟啉類物質(X因子)。在加有NAD的鮮血培養基上，37℃培養24~48h，生長為邊緣整齊、小而透明的不溶血菌落，在巧克力培養基上培養24h~48h生長很差，菌落為光滑型，灰白色透明，直徑大約0.5mm。將HPS水平劃線于鮮血瓊脂平板上，再挑取金黃色葡萄球菌垂直于水平線劃線，37℃培養24h~48h，呈現出典型的“衛星生長”現象，并且不出現溶血。該菌脲酶和氧化酶試驗陰性，接觸酶試驗陽性，可發酵葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、D2核糖和麥芽糖等。

HPS血清型眾多，目前至少可分為15個血清型，不同血清型的毒株，毒力和致病力都存在差異，其中血清型1、5、10、12、13、14毒力最強，感染豬多趨于死亡或瀕死狀態；血清型2、4、15為中等毒力，可導致較嚴重的多發性漿膜炎和關節炎，出現敗血癥；血清型3、6、7、8、9、11毒株感染癥狀較緩和或無臨床表現。

2 流行病學

副豬嗜血桿菌通常定居于健康豬的上呼吸道，常?？蓮钠浔乔?、鼻分泌物、氣管和扁桃體中分離到，而不見任何臨床癥狀。HPS只感染豬，且有很強的宿主特異性，可以影響2周齡到4月齡豬，主要在斷奶前后和保育舍階段發病，通常見于5~8周齡，感染高峰通常見于保育期的4~6周齡，有些可早在保育舍內最初2周時就開始出現，并一直持續到肥育期早期，發病率可達40%，嚴重時死亡率可達50%。

本病的主要傳播途徑是通過空氣、豬與豬之間的接觸或通過污染排泄物。病豬和帶菌豬是本病的主要傳染源。未免疫的豬場或特別健康的豬群(如SPF豬)最容易受到侵襲。該病常與豬繁殖與呼吸綜合征病毒、圓環病毒、豬流感病毒和豬呼吸道冠狀病毒引起的病毒病及支原體病并發。研究表明在豬群中存在PRRS 感染時，HPS的分離率會增加，由HPS導致的死亡率也大幅增加，HPS的防制取決于豬群中PRRSV 的穩定化程度，其它一些呼吸道性疾病如支原體肺炎、豬流感、豬偽狂犬病和圓環病毒Ⅱ型感染及豬呼吸道冠狀病毒感染時，HPS的存在可加劇病情的臨床表現。

3 臨床癥狀和病理變化

3.1 臨床癥狀 副豬嗜血桿菌病的臨床癥狀可分為兩種，即急性感染和慢性感染，但一般豬場是以慢性感染為主。2~8周齡仔豬感染發病后呈現典型癥狀，育肥豬感染多呈慢性經過，哺乳母豬也可感染發病。急性的病豬體溫高達40~41℃，精神沉郁，食欲減退，氣喘咳嗽，呼吸困難，鼻孔有薪液性及漿液性分泌物，關節腫脹，跋行，步態僵硬，同時出現身體顫抖，共濟失調，3d左右死亡。（1）急性感染：急性病例往往首先發生于膘情良好的豬，表現為發熱(40.5~42.0℃)、病初貧血、呼吸困難、耳稍發紫、眼瞼皮下水腫，不喜運動，精神沉郁、食欲下降或不食，體表皮膚發紅或蒼白，行走緩慢或不愿站立，腕關節、跗關節腫大，共濟失調，臨死前側臥或四肢呈劃水樣。有時也會無明顯癥狀而突然死亡，急性死亡者，通常由于膿毒血癥引起。急性感染病例存活后可留下后遺癥，即母豬流產，公豬慢性跋行，仔豬和育肥豬可遺留呼吸道癥狀和神經癥狀。慢性病豬消瘦虛弱，被毛粗亂，皮膚發白，咳嗽，呈腹式呼吸，生長不良，關節腫大，嚴重時皮膚發紅，少數病豬耳根發涼隨即死亡。（2）慢生感染：慢性病例多見于保育豬，主要表現為食欲下降、咳嗽、呼吸困難、被毛粗亂，四肢無力或跋行，生長不良，甚至衰竭而死亡。耐過的豬只常發展成慢性型。慢性病例最特殊的病理變化是纖維性化膿性支氣管肺炎，兼有纖維性胸膜炎。病灶往往出現在肺臟背部，呈圓形，有明顯的界限。通常在肺的橫隔膜葉較易出現病灶。早期組織學病變包括壞死、出血，嗜中性白細胞浸潤，巨嗜細胞和血小板激活，血管內血栓形成；后期則主要以巨嗜細胞浸潤為特征。（3）剖檢：副豬嗜血桿菌病病豬尸體剖檢可見胸腔內有大量的淡紅色液體及纖維素性滲出物凝塊，肺表面覆蓋有大量的纖維索性滲出物并與胸壁粘連，多數為間質性肺炎，部分有對稱性肉樣變化，肺水腫；腹膜炎，常表現為化膿性或纖維性腹膜炎，腹腔積液或內臟器官粘連；心包炎，心包積液，心包內常有干酪樣甚至豆腐渣樣滲出物，使外膜與心臟粘連在一起，形成“絨毛心”，心肌有出血點；全身淋巴結腫大，呈暗紅色，切面呈大理石樣花紋；脾臟腫大，有出血性梗死；關節腫大，關節腔有漿液性滲出性炎癥。胸腔內有多量的淡紅色液體及纖維性滲出物凝塊，心包膜與心臟粘連，病變明顯。肺表面覆蓋有大量纖維素性滲出物并與胸腔粘連，且有大量小化膿灶，外包有結締組織；肺臟出血，全身淋巴結腫大，暗紅色，切面呈大理石花紋；腎、十二指腸均有出血點，回盲口附近有輪層扣狀潰瘍；脾出血性梗死。副豬嗜血桿菌經常引起急性敗血癥，并且其內毒素可導致彌漫性血管內凝血，導致多個器官內形成微血栓。SPF豬實驗性感染后的血液學變化和微觀病變表現為在攻擊后24h開始出現白細胞減少和血糖降低。所有接種豬都表現血小板減少、凝血酶原時間延長、纖維蛋白原—纖維蛋白降解產物增加。從攻擊后16h開始，血漿中檢測出內毒素，并且在臨死前內毒素的濃度急驟上升。在腎臟、肝臟和肺臟中發現微血栓，研究人員推測彌漫性血管內凝血和內毒素性體克加重了敗血癥仔豬的臨床癥狀并加速其死亡。

3.2 病理組織學變化 感染副豬嗜血桿菌的仔豬主要病理組織學變化為:氣管的豁膜上皮脫落，勃膜下水腫，薪膜下有出血，有炎癥反應(嗜中性炎性細胞)。支氣管內、肺泡內充滿大量的炎性細胞(以嗜中性粒細胞為主，巨細胞主要在肺泡內)，支氣管上皮缺損；心肌細胞斷裂、少量變性(顆粒變性和水泡變性)壞死，肌纖維間有炎性細胞，心外膜內外有漿液性滲出(大量的中性細胞浸潤及巨噬細胞)；脾炎(脾內嗜中性細胞很多)，脾小梁周圍水腫，脾小體的生發中心變小甚至看不到生發中心；肝臟有壞死灶，肝細胞腫大；大腦出現腦膜炎，軟腦膜下水腫、充血(血管內白細胞多)、出血、有炎癥(單核細胞和中性細胞)。有壞死灶，壞死灶內有很多空泡，壞死灶周圍神經元細胞嚴重腫脹，有衛星現象(非化膿性腦炎，角質細胞增生)，有嗜神經元現象；小腸呈現輕微腸炎，薪膜絨毛間和固有層有嗜酸性細胞，固有層有嗜中性細胞，充血，絨毛內杯狀細胞增多、擴張(說明薪液分泌亢進)。大腸呈明顯炎癥，即出血性纖維素性腸炎，薪膜上皮脫落，表面纖維素性滲出物，薪膜下出血、水腫、有嗜中性炎性細胞、纖維蛋白性滲出物增多，勃膜上同豁膜下。小腦和腎臟變化不明顯。

4 診斷

通過病史調查、流行病學、臨床癥狀及剖檢變化等可做出初步診斷。

4.1 細菌分離鑒定 由于此菌對生長環境的要求極為苛刻，而且病料超過24h之后就很難分離到該菌，因此，要在培養基中加入血清和NAD等營養物質。該菌的分離一般將撲殺豬的肺、心血、肝、腎、淋巴結分別劃線接種于含有血清和NAD的TSA培養基上，在37℃培養48h后挑取單個菌落進行純培養。將可疑菌的單菌落與金黃色葡萄球菌垂直劃線于無NAD的血平板上，在37℃培養24~48h，如果看到“衛星生長現象”，且無溶血現象，即可確定為該菌。另外，副豬嗜血桿菌不易培養的特性經常影響這種細菌從臨床樣品的分離。使用平板稀釋技術和在培養基中加入抗生素可以提高從污染病料中的細菌分離率。

4.2 血清學檢測 目前，補體凝集試驗、間接ELISA、瓊脂擴散試驗等已成為HPS診斷的血清型方法，但由于在一個豬群中，出現HPS的幾種菌株或幾種血清型毒株同時感染的現象比較普遍，甚至在個別病例，不同標本內可發現不同菌株或血清型感染，各血清型HPS之間存在交叉反應，因此診斷意義不大。

4.3 分子生物學檢測 主要是用PCR的方法檢驗基因序列，該方法不僅可以檢測到100CFU/ml的細菌，從而從初代分離培養物中對HPS進行鑒定和感染確診，而且可以直接對病料進行HPS PCR檢測，其敏感性遠遠高于常規的細菌分離法，可在臨床診斷和防治中更具實用性。

5 防治

飼養管理不當、生物安全措施不得力、通風不良、氣候突變、密集養殖、運輸應激等因素是造成發生本病的主要誘因。因此，應改善飼養管理條件，定期通風換氣。另外，在應用疫苗免疫的基礎上，應加強對豬群中所有豬的抗生素治療。同時，對HPS繼發感染性疾病，要加強對原發病的控制和治療，加大養豬場生物安全管理，減少或消除其它呼吸道病原物。

5.1 加強環境消毒、減少各種應激 搞好衛生，嚴格消毒徹底清掃豬舍，糞便進行無害化處理；用2%~4%氫氧化鈉溶液噴灑豬圈地面和墻壁，2h后地面、墻壁用清水沖洗干凈，隨后按1:300的比例，用勁碘百毒殺或菌毒滅噴霧消毒，1次/d，連用4~5d，以后圈舍每周進行1次徹底清掃和消毒。

5.2 提高管理水平，改善飼養環境 將大欄舍改成兩個小欄舍，并合理安排飼養密度。每個小欄飼養肉豬不得超過12頭。豬只剛進欄時，要派專人看管，防止打架、相互嘶咬，同時使豬只形成良好的衛生習慣。加強飼養管理，全群豬用電解質加維生素C粉飲水5~7d。

5.3 疫苗免疫 可用滅活苗免疫母豬，初免豬產前40d一免，產前20d二免。在經免豬產前30d免疫1次即可。受本病嚴重威脅的豬場，小豬也要進行免疫，從10日齡到60日齡的豬都要注射，每次1ml，最好一免后過25d再重復注射1次。

5.4 治療隔離病豬，用抗菌素治療 豬場一旦得到正確診斷或出現明顯臨床癥狀時，必須應用大劑量的抗菌素進行治療，并且應當對整個豬群或同群豬進行藥物預防。常采用肌肉注射氨芐青霉素、阿莫西林、慶大霉素等，并配合地塞米松進行治療，也可用艾迪諾(長效恩諾沙星)注射液深部肌肉注射，每次0.2ml/kg，1次/d，連用2~3d；硫酸卡那霉素注射液肌內注射，每次20mg/kg，每晚肌注1次，連用5~7d。

（2011–11–23）

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