甜菜夜蛾人工飼養技術優化

王 偉，李秀環，周 超，慕 衛

(山東農業大學植物保護學院，山東 泰安 271018)

甜菜夜蛾 Spodoptera exigua(Hübner) (Lepidoptera:Noctuidae)屬于鱗翅目、夜蛾科，是一種食性雜，抗藥性強的害蟲。90年代以來，在我國南北方各省區均有較重發生，主要危害十字花科蔬菜，對大蔥、蘆筍、棉花、大豆、花生等也造成嚴重危害 (劉萬才，1998)。甜菜夜蛾高效藥劑及配方篩選、抗藥性風險評估、天敵和病毒擴繁及生物防治研究都需要大量標準化的甜菜夜蛾試蟲，因此簡便、易行、高效和標準化的室內人工飼養方法是進行各項研究的基礎。此前李廣宏(1998)、徐金漢 (1998)、烏曉天 (1992)、慕衛(2002)、Goh(1991)和Wakanura(1988)等都對甜菜夜蛾的室內人工飼養進行過研究，并從幼蟲存活率，化蛹率、羽化率等方面評價了室內人工飼養的優劣性，但飼養方法各不相同。本文就現有的實驗室甜菜夜蛾人工飼養技術，主要從幼蟲飼養方法等方面進行了進一步的優化。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試蟲源:甜菜夜蛾種群2008年9月于泰安市范鎮大蔥田采集幼蟲獲得。

儀器設備:人工氣候箱 (RTOP－800D，杭州錢江儀器設備有限公司)，電子天平 (sartorious，A200S，德國)，平底玻璃管 (高 75 mm，直徑20 mm)，二十四孔養蟲板 (孔深15 mm，孔徑15 mm)，十二孔養蟲板 (孔深 20 mm，孔徑15 mm)

1.2 人工飼料配方及制作方法

復合維生素的配制:煙酸 (VB5)0.305 g、泛酸鈣 (VB3)0.305 g、核黃素 (VB2)0.153 g、維生素 B10.076 g、維生素 B60.076 g、葉酸(VBC)0.076 g、生物素H(VH)0.061 g、氰鈷胺素 (VB12)0.6 mg溶于100 mL蒸餾水。

干料的配制:玉米粉200 g、黃豆粉100 g、酵母粉90 g和麥麩30 g混勻后于140℃滅菌1 h。1000 mL沸水中加入15 g瓊脂溶解，然后加2 g山梨酸和2 g對羥基苯甲酸甲酯使其溶解;加入事先混合好的干料 (玉米粉、黃豆粉、酵母粉、蔗糖50 g和干酪素40 g)，在沸水中攪拌均勻后停止加熱;繼續攪拌至 60～70℃時，加入 15 mL的4 mol/L KOH溶液、40 mL的16.67%乙酸溶液、15 mL的10%甲醛溶液、15 mL復合維生素液和6.2 g抗壞血酸，攪拌均勻，倒入飼料盒中，冷卻后放4℃冰箱中保存。

1.3 不同質地卵卡對甜菜夜蛾落卵和卵孵化的影響

以蠟紙和白紙作為卵卡，將蠟紙條 (16 cm×2 cm)吊掛于鐵絲網養蟲籠內，每籠6條;將白紙折成屋脊 (10 cm×7 cm)狀放于養蟲籠底部，每籠放置4個。觀察記錄成蟲羽化后第2、3、4 d的累積落卵量及孵化率。每處理重復3次，每重復10對同天羽化的成蟲。

1.4 濕度對卵孵化的影響

將同天產的卵放入孵化缸中，置于人工氣候箱，溫度26±l℃，光照為 14 h/10 h(光照/黑暗)，分別控制濕度為40%、60%、80%，共3個處理，每處理設3個重復，每重復卵數500粒左右。觀察卵的孵化情況。

1.5 不同器皿飼養方法對甜菜夜蛾幼蟲的影響

方法1:用平底玻璃管飼養甜菜夜蛾幼蟲。將初孵幼蟲用毛筆挑入加有工飼料的平底管內，每管6頭，棉塞塞緊管口，幼蟲長到3齡后，轉移到裝有人工飼料的平底玻璃管中，每管兩頭，飼養直至化蛹。

方法2:用二十四孔養蟲板和平底玻璃管飼養甜菜夜蛾幼蟲。初孵幼蟲接入裝有人工飼料二十四孔板中，每孔4頭。待幼蟲長到3齡左右，轉移到平底玻璃管中用于保種，每管兩頭，直至化蛹。

方法3:用十二孔養蟲板代替方法一中的平底玻璃管飼養甜菜夜蛾幼蟲，用于保種，每孔2頭。

方法4:用十二孔板飼養。將初孵幼蟲用毛筆挑入加有人工飼料的十二孔板中，每孔接2頭，直至化蛹。

觀察記錄3齡幼蟲成活率，7日齡蟲重，幼蟲歷期，幼蟲感病率，化蛹率和蛹重等生物學特性。每處理重復3次，每重復240頭初孵幼蟲。

1.6 甜菜夜蛾成蟲室內人工飼養

將甜菜夜蛾蛹放入養蟲籠中，待羽化后交配產卵，籠中培養皿內放置沾有復合維生素糖水的脫脂棉供成蟲補充營養，在籠中放入屋脊狀白紙供成蟲產卵，每天取出帶有卵的白紙，放入磨口玻璃缸中待孵化。幼蟲飼養方法采用上述方法3所述，在室內連續飼養甜菜夜蛾7代，從產卵量、3齡幼蟲成活率及蛹重等指標評價甜菜夜蛾人工飼養。各齡期甜菜夜蛾均在26±l℃，光周期為14 h/10 h(光照/黑暗)，環境濕度為RH60% ～75%的養蟲間內飼養。

1.7 數據處理及分析

試驗數據經Duncan新復極差法進行處理，分析各處理的差異顯著性。

2 結果與分析

2.1 不同質地卵卡對落卵量及孵化率的影響

結果顯示 (表1)，使用蠟紙和白紙兩種方法收集的卵的孵化率分別為93.65%和94.02%。兩種質地的卵卡對甜菜夜蛾產卵和孵化沒有顯著差異?？紤]到白紙經濟易得，所以本研究在以后的飼養中使用白紙折疊成屋脊狀供成蟲產卵。

2.2 濕度對卵孵化的影響

相對濕度為40%時卵的孵化率顯著低于60%和80%兩處理;相對濕度80%的卵孵化率最高，可達98.25%(見表2)。

表1 不同質地卵卡對落卵量和卵孵化率的影響Table 1 Comparison of amount of eggs and hatchability with stencil and white paper

2.3 不同幼蟲飼養方法對甜菜夜蛾生命參數的影響

在7日齡幼蟲重和幼蟲歷期兩個生物學指標中四種甜菜夜蛾幼蟲飼養方法差異均不顯著 (見表3)。方法1即使用玻璃管飼養至化蛹，幼蟲成活率較低，感病率較低;方法2即使用二十四孔板和養蟲管飼樣，感病率較低，化蛹率和蛹重均最大。方法3即使用二十四孔板和十二孔板，幼蟲成活率和蛹重均較高。方法4即使用十二孔板飼養至化蛹，幼蟲成活率較高，但感病率最大，化蛹率和蛹重均較小。綜合上述結果可知，以方法2和方法3飼養甜菜夜蛾幼蟲效果較好。

表2 濕度對卵孵化的影響Table 2 Effect of relative humidity on hatchability rate of Spodoptera exigua

表3 不同幼蟲飼養方法對甜菜夜蛾生物學指標的影響Table 3 Effect of different artificial feeding on the life of larvae Spodoptera exigua

表4 室內人工飼料繼代飼養甜菜夜蛾的生物學變化Table 4 Comparison of life parameters of Spodoptera exigua reared on artificial diet for 7 generations

2.4 田間種群室內連續飼養7代的生物學變化

用人工飼料在上述條件下飼養甜菜夜蛾7代，每代生命周期為27～28 d，由上表可以看出，室內人工飼養至第7代，各代在卵孵化率和羽化率方面無顯著差異。第5代在幼蟲成活率、蛹重、化蛹率指標上值最低，第6代產卵量最低，各代幼蟲成活率均在80%以上。對于第5代和第6代中某些生物學指標的降低，后查明由于飼料中一批防腐劑質量差，引起飼料霉變，導致飼養試蟲的某些生物學指標偏低。試驗結果表明室內人工飼養7代種群未出現退化現象，此人工飼料配方和飼養方法能滿足甜菜夜蛾的正常生長發育要求。

3 結論與討論

甜菜夜蛾成蟲在田間多產卵于植物葉片表面，室內飼養多產卵在光滑的表面，比如平滑的紙、玻璃等。李廣宏 (1998)、慕衛 (2002年)等對甜菜夜蛾室內飼養的研究中使用了白紙或蠟紙作為收集卵塊的材料。本研究比較了成蟲在白紙和蠟紙上的日落卵量和卵的孵化率，研究結果表明兩種質地的卵卡對成蟲產卵和卵的孵化均不存在顯著差異。

目前甜菜夜蛾人工飼養研究中，幼蟲的飼養方法各不相同。有文獻報道使用塑料盒群養，長到3齡時分裝飼養 (李騰武等，2001;李廣宏等1998)。發展到使用平底玻璃管單頭飼養至化蛹或多頭飼養至一定齡期后分管飼養的幼蟲飼養方法(慕衛等，2002;宋月芹等，2009)。趙國營等(2010)研究中使用十二孔養蟲板單頭飼養甜菜夜蛾幼蟲。本研究針對幾種幼蟲的飼養方法，從成活率、蛹重等方面進行了比較分析。從研究結果看，單用玻璃養蟲管飼養，因玻璃管空間大，管口棉塞透氣性好，人工飼料較易風干，致使幼蟲成活率降低。單用十二孔板飼養一直飼養到化蛹，由于空間密封性較好，糞便累積易導致高齡幼蟲感病率偏高，但該方法操作簡便，不需要二次轉移幼蟲，減少了工作量，且使用十二孔板占用空間少。如果能夠控制好飼料的濕度和防腐問題，是一種可參考的幼蟲飼養方法。初孵幼蟲挑入二十四孔板生長至3齡后分裝到平底玻璃管或十二孔養蟲板中待其化蛹的方法因挑選生長一致的幼蟲用于保種，且更換新鮮飼料，所以化蛹整齊，化蛹率較高且蛹重較大，同時也可提高成蟲的交配、產卵和卵孵化率。考慮到平底玻璃管易碎、使用時占用空間大，洗刷及滅菌不方便，建議使用塑料養蟲板飼養甜菜夜蛾幼蟲。

在甜菜夜蛾的飼養過程中，環境的溫濕度和清潔度起重要的作用，成蟲產卵期和卵孵化期，應特別注意保濕，可使用加濕器調節養蟲室的濕度至60%～75%。養蟲用具如鑷子、毛筆、平底玻璃管和二十四孔養蟲板等，使用前后需徹底消毒。養蟲室內的消毒措施:室內用紫外燈照射2 h，或用KMnO4和HCHO混合液 (每立方米用高錳酸鉀6.25 g，40%甲醛12.8 mL)熏蒸消毒，或用0.2%的次氯酸鈉噴霧消毒，每周一次。毛筆和鑷子用70%酒精或2%KOH堿液浸泡的方法消毒，平底玻璃管和二十四孔養蟲板用消毒液浸泡過夜，其后平底玻璃管經高壓濕熱滅菌消毒。

References)

Li GH，Chen QJ，Pang Y，1998.Studies of artificial diets for the beet armyworm，Spodoptera exigua.Acat Scientarum Naturalum Universitatis Sunyatseni，37(4):1－5.［李廣宏，陳其津，龐義，1998.甜菜夜蛾人工飼料的研究.中山大學學報，37(4):1－5］

Li TW，Yang CZ，He JX，Yang HF，Wang XL，2001.The artificial diet and the mass rearing method of Spodoptera exigua.Entomological Knowledge，38(5):383－386.［李騰武，楊崇珍，何將緒，楊宏峰，王興林，2010.甜菜夜蛾人工飼料及飼養技術研究.昆蟲知識，38(5):383－38:6］

Liu WC，Jiang YY，Tang JY，Jiang JY，Wang RW，1998.Present situation and management of beet armyworm(Spodoptera exigua)in China.Chinese Agricultural Science Bulletin，14(3):41－42.［劉萬才，姜玉英，湯金儀，姜京宇，王睿文，2008.我國甜菜夜蛾發生現狀.中國農學通報，14(3):41－42］

Luo LZ，Caq YZ，Jiang XF，2000.Analysis of occurrence characteristic and the trend for beet armyworm(Spodoptera exigua).Plant Protestion，26(3):37－39.［羅禮智，曹雅忠，江幸福，2000.甜菜夜蛾發生危害特點及其趨勢分析.植物保護，26(3):37 －39］

Mu W，Wu KM，Zhang YJ，Guo YY，Zhang WJ，2002.Studies on rearing technique of Spodoptera exigua(Hübner)on artificial diet.Cotton Science，14(5):287－290.［慕衛，吳孔明，張永軍，郭宇元，張文吉，2002.甜菜夜蛾的人工飼養技術.棉花學報，14(5):287－290］

Song YQ，Wu JX，Sun HZ，2009.The rearing method of Spodoptera exigua in artificial climate chamber，Shanxi Agricultura Sciences，(3):228－229.［宋月芹，仵均詳，孫會忠，2009.人工氣候箱飼養甜菜夜蛾技術.陜西農業科學，(3):228－229］

Xu JH，Guan X，Huang ZP，1998.Studies on the arificial diets for beet armyworm.Journal of Plant Protection，25(2):133－136.［徐金漢，關雄，黃志鵬，1998.甜菜夜蛾人工飼料研究.植物保護學報，25(2):133－136］

Zhao GY，Gu XS，Liu Q，2009.Study on improvement of artificial diet for Spodoptera exigua.Shandong Agricultural Sciences，5:74 －76.［趙國營，顧希樹，劉強，2009.甜菜夜蛾人工飼料配方的改進研究.山東農業科學，5:74－76］