非淀粉多糖酶對(duì)肉雞血液生化指標(biāo)和十二指腸形態(tài)學(xué)的影響

呂秋鳳 林樹(shù)梅 欒新紅 劉 梅 安嬌陽(yáng) 曹雙 曹敏建

非淀粉多糖酶對(duì)肉雞血液生化指標(biāo)和十二指腸形態(tài)學(xué)的影響

呂秋鳳 林樹(shù)梅 欒新紅 劉 梅 安嬌陽(yáng) 曹雙 曹敏建

以玉米、豆粕為基礎(chǔ)日糧，研究在正常能量水平日糧和低能量水平日糧中添加非淀粉多糖酶對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)、免疫功能及十二指腸形態(tài)學(xué)的影響。試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)化設(shè)計(jì)，將400只1 d AA+肉雞隨機(jī)分成4組，即正對(duì)照組、負(fù)對(duì)照組、試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組。試驗(yàn)結(jié)果表明：在正常能量水平的玉米-豆粕型日糧中添加非淀粉多糖酶，可顯著提高血清血糖濃度和胰島素及T3的含量(P＜0.05)，降低了尿素氮濃度和T4水平(P＜0.05)，提高了十二指腸絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度(P＜0.05)，但生長(zhǎng)激素含量差異不顯著(P＞0.05)；在負(fù)對(duì)照組中添加非淀粉多糖酶，試驗(yàn)2組降低了尿素氮濃度(P＜0.05)，且略低于正對(duì)照組水平，而十二指腸絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度達(dá)到正對(duì)照組水平。

非淀粉多糖酶；肉雞；血液生化指標(biāo)；十二指腸形態(tài)學(xué)

非淀粉多糖（non-starch polysaccharide，NSP）是植物組織中除淀粉以外所有碳水化合物的總稱(chēng),是植物性飼料中主要抗?fàn)I養(yǎng)因子之一。非淀粉多糖在腸道內(nèi)能結(jié)合大量水分，增加食糜黏度，阻礙消化酶與底物的接觸，延長(zhǎng)食糜在腸道內(nèi)停留的時(shí)間，影響機(jī)體對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用率。添加適當(dāng)?shù)耐庠疵改軌蛳堑矸鄱嗵堑目範(fàn)I養(yǎng)作用，降低單位生產(chǎn)成本，提高飼料的轉(zhuǎn)化效率，進(jìn)而提高其生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)以玉米-豆粕型日糧為基礎(chǔ)日糧，研究在正常能量水平日糧和低能量水平日糧中添加非淀粉多糖酶對(duì)肉雞血清生化指標(biāo)及十二指腸絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度的影響，為非淀粉多糖酶的生產(chǎn)應(yīng)用和深入研究提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

非淀粉多糖酶（含酸性纖維素酶1000 IU/ml；中性木聚糖酶10000 IU/m l、α-半乳糖苷酶100 IU/ml等）為湖南尤特爾生化有限公司生產(chǎn)的液態(tài)復(fù)合酶。日糧為遼寧禾豐牧業(yè)有限公司生產(chǎn)的肉雞玉米－豆粕型飼料。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)化設(shè)計(jì)，選擇1日齡健康A(chǔ)A+肉雞400只，隨機(jī)分成4個(gè)處理組，每個(gè)處理5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只。分為正對(duì)照組（飼喂正常能量水平的玉米-豆粕型日糧）、負(fù)對(duì)照（正對(duì)照基礎(chǔ)上日糧能量降低0.29 MJ/kg）、試驗(yàn)1組（正對(duì)照基礎(chǔ)日糧+100ml/t非淀粉多糖酶）、試驗(yàn)2組（負(fù)對(duì)照基礎(chǔ)日糧+100ml/t非淀粉多糖酶）。

1.3 試驗(yàn)日糧

參照NRC（1998）并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐配制基礎(chǔ)日糧。日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)雞采用立體籠養(yǎng)，人工持續(xù)光照，育雛時(shí)采用紅外燈供暖，保持正常溫度（第1周33～34℃,第2周27～31℃），其后視具體氣溫情況供暖；雞舍自然通風(fēng)，相對(duì)濕度保持在55%～65%；自由飲水和采食，按正常肉雞免疫程序免疫。試驗(yàn)于沈陽(yáng)農(nóng)大養(yǎng)雞場(chǎng)進(jìn)行，飼養(yǎng)期共42 d。

1.5 測(cè)定指標(biāo)

1.5.1 血液指標(biāo)

于42日齡時(shí)從每處理中隨機(jī)抽取10只雞（每重復(fù)2只），翼靜脈采血8ml，集入10ml離心管傾斜放置，讓血液自然凝固。在血凝0.5 h后以3000 r/min離心15min分離血清，收集離心管上層血清，于-20℃下保存，以測(cè)定各項(xiàng)生化和免疫指標(biāo)。其中T3、T4、胰島素、生長(zhǎng)激素含量采用放免法測(cè)定；血糖、尿素氮濃度采用比色法測(cè)定。T3、T4、胰島素、生長(zhǎng)激素試劑盒購(gòu)于北京北方生物技術(shù)研究所，血糖和尿素氮試劑盒購(gòu)于南京建成生物工程研究所。

1.5.2 十二指腸形態(tài)學(xué)指標(biāo)

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

于42日齡按每個(gè)重復(fù)取1只雞宰殺，截取小腸的十二指腸前段，用生理鹽水沖洗。然后把十二指腸在Bouin's液中固定最少48 h，按照常規(guī)方法進(jìn)行沖洗、脫水、透明、浸臘、包埋、切片、蘇木素-伊紅染色和封片。用光學(xué)顯微鏡（10×40倍下）觀察各組石蠟切片，用江蘇捷達(dá)801系列彩色多媒體形態(tài)學(xué)分析系統(tǒng)進(jìn)行拍照分析。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，各試驗(yàn)處理組中的數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,對(duì)方差分析顯著者做Duncan's法多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 非淀粉多糖酶對(duì)肉雞血液生化指標(biāo)的影響(見(jiàn)表2)

如表2所示，試驗(yàn)1組血糖含量比正對(duì)照組提高了34.3%（P＜0.05），試驗(yàn)2組血糖含量比負(fù)對(duì)照組提高了21.7%（P＜0.05），且超過(guò)正對(duì)照組水平。試驗(yàn)1組尿素氮含量比正對(duì)照組降低了25.0%（P＜0.05）；試驗(yàn)2組尿素氮含量比負(fù)對(duì)照組降低21.0%（P＜0.05），且略低于正對(duì)照組水平；試驗(yàn)1組生長(zhǎng)激素含量比正對(duì)照組提高了4.7%（P＞0.05），試驗(yàn)2組生長(zhǎng)激素含量比負(fù)對(duì)照組提高了3.8%（P＞0.05），且超過(guò)正對(duì)照組水平；試驗(yàn)1組胰島素含量比正對(duì)照組提高了20.4%（P＜0.05），試驗(yàn)2組胰島素含量比負(fù)對(duì)照組提高了10.2%（P＞0.05），且超過(guò)正對(duì)照組水平；試驗(yàn) 1組 T3水平比正對(duì)照組提高了10.03%（P＞0.05），試驗(yàn)2組T3水平比正對(duì)照組提高了14.29%（P＞0.05）；試驗(yàn)1組T4水平比正對(duì)照組降低了15.66%（P＞0.05），試驗(yàn)2組T4水平比負(fù)對(duì)照組降低了13.26%（P＞0.05）。

表2 非淀粉多糖酶對(duì)肉雞血糖、尿素氮濃度及生長(zhǎng)激素、胰島素含量的影響

2.2 非淀粉多糖酶對(duì)肉雞十二指腸絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度的影響（見(jiàn)表3）

如表3所示，試驗(yàn)1組十二指腸絨毛長(zhǎng)度與正對(duì)照組相比增長(zhǎng)了47.13%，差異顯著（P＜0.05），試驗(yàn)2組的十二指腸絨毛長(zhǎng)度與負(fù)對(duì)照組相比增長(zhǎng)了38.57%，差異顯著，且顯著高于正對(duì)照（P＜0.05）；試驗(yàn)1組十二指腸隱窩深度與正對(duì)照組相比增長(zhǎng)了27.62%，差異顯著（P＜0.05），試驗(yàn) 2組十二指腸隱窩深度與負(fù)對(duì)照組相比增長(zhǎng)了37.71%，差異顯著，且顯著高于負(fù)對(duì)照組（P＜0.05）。

表3 非淀粉多糖酶對(duì)肉雞十二指腸絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度的影響(μm)

3 討論

3.1 非淀粉多糖酶對(duì)肉雞血液生化指標(biāo)的影響

血糖是動(dòng)物體內(nèi)的主要能源物質(zhì)，它可以直接氧化供給動(dòng)物機(jī)體代謝活動(dòng)所需能量。艾曉杰等研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加非淀粉多糖酶可以提高雛鵝、生長(zhǎng)鵝血糖水平。高峰等在小麥基礎(chǔ)日糧中添加酶制劑顯著促進(jìn)了斷奶仔豬的生長(zhǎng)，仔豬血清中的血糖濃度有上升趨勢(shì)。杜繼忠等報(bào)告，在肉雞玉米-雜粕型日糧中添加復(fù)合酶制劑有提高肉雞血清中血糖濃度的趨勢(shì)，但差異不顯著。Friesen等認(rèn)為，酶制劑可以提高淀粉的消化利用率，淀粉分解后以葡萄糖的形式吸收進(jìn)入血液，從而提高血糖濃度。本試驗(yàn)中在肉雞日糧中添加非淀粉多糖酶能提高血糖濃度，正對(duì)照加酶組(試驗(yàn)1組)與正對(duì)照組相比提高了34.3%（P＜0.05），負(fù)對(duì)照加酶組(試驗(yàn) 2 組)明顯高于負(fù)對(duì)照組 21.7%（P＜0.05），且超過(guò)正對(duì)照組水平。原因在于非淀粉多糖酶的作用結(jié)果，促進(jìn)了非淀粉多糖的消化，從而使血糖濃度升高。

尿素氮是機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的終產(chǎn)物之一，它可作為衡量機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的指標(biāo)。一般認(rèn)為血液尿素氮水平反映飼料蛋白利用情況，尿素氮水平升高反映蛋白分解加強(qiáng)，水平降低表示蛋白質(zhì)合成沉積增加。本試驗(yàn)結(jié)果表明，正對(duì)照加酶組尿素氮含量比正對(duì)照組降低了25.0%（P＜0.05），負(fù)對(duì)照加酶組尿素氮含量比負(fù)對(duì)照組降低21.0%（P＜0.05），且略低于正對(duì)照組水平。說(shuō)明非淀粉多糖酶可促進(jìn)蛋白質(zhì)沉積。

韓正康報(bào)道，非淀粉多糖有抑制與生長(zhǎng)和代謝有關(guān)的分泌機(jī)能的能力，日糧中添加非淀粉多糖酶，可提高動(dòng)物機(jī)體的消化利用率和禽體外周血液代謝激素水平，同時(shí)促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體的生長(zhǎng)。高峰等報(bào)道，大麥日糧中添加粗酶制劑可影響畜禽外周血液激素水平，提高甲狀腺素（T3和T4）、生長(zhǎng)激素和胰島素水平，降低胰高血糖素水平，從而有利于增強(qiáng)畜禽營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝，T3是家禽機(jī)體內(nèi)主要的代謝激素，與生長(zhǎng)激素密切相關(guān)，T3水平升高，表明機(jī)體代謝水平增高。另?yè)?jù)劉長(zhǎng)忠等報(bào)告，在雛鵝日糧中添加0.2%和0.4%非淀粉多糖酶可以提高血糖濃度，分別提高了19.47%和13.15%（P＜0.05），胰島素的提高幅度分別為20.55%與22.83%（P＜0.05），T3提高幅度分別為 17.60%與 16.00%（P＜0.05）。而對(duì)生長(zhǎng)激素、T4均無(wú)顯著的影響（P＞0.05）。非淀粉多糖酶能在一定程度上影響體內(nèi)的激素分泌，原因可能是酶提高了禽類(lèi)對(duì)日糧養(yǎng)分的消化和吸收，進(jìn)而影響體內(nèi)代謝，使血液中代謝產(chǎn)物含量或成分改變，而這對(duì)體內(nèi)激素的合成和分泌有明顯影響；酶制劑作為微生物發(fā)酵產(chǎn)物，可能在分解食糜時(shí)降解產(chǎn)生了生物活性物質(zhì)，如生物活性肽或寡糖，這些生物活性物質(zhì)可能作用于黏膜細(xì)胞有關(guān)受體或腸壁神經(jīng)叢，也可能進(jìn)入血液循環(huán)中，作用于神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的細(xì)胞受體而發(fā)生生理效應(yīng)，影響家禽的神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)。本試驗(yàn)還表明，在玉米-豆粕型日糧中添加非淀粉多糖酶能不同程度地提高肉雞胰島素、生長(zhǎng)激素、T3的水平，降低了T4水平，與劉長(zhǎng)忠等研究結(jié)果相一致。

3.2 非淀粉多糖酶對(duì)肉仔雞十二指腸絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度的影響

動(dòng)物機(jī)體對(duì)養(yǎng)分的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的主要部位是小腸，小腸的形態(tài)結(jié)構(gòu)，特別是小腸腸絨毛高度、隱窩深度是衡量小腸消化吸收功能強(qiáng)弱的重要指標(biāo)。絨毛的長(zhǎng)短決定其含有的成熟的絨毛細(xì)胞的數(shù)量，從而決定其對(duì)養(yǎng)分的吸收能力。絨毛越長(zhǎng)則含有的成熟絨毛細(xì)胞越多，吸收能力越強(qiáng)。本次試驗(yàn)結(jié)果表明，正對(duì)照加酶組(試驗(yàn)1組)絨毛長(zhǎng)度比正對(duì)照組增加了47.13%（P＜0.05），負(fù)對(duì)照加酶組(試驗(yàn)2組)絨毛長(zhǎng)度比負(fù)對(duì)照組增加了38.57%，且顯著高于正對(duì)照組（P＜0.05）。隱窩，是由絨毛基部的上皮陷入固有層內(nèi)形成的管狀腺體，隱窩深度也是判定小腸吸收能力強(qiáng)弱的重要標(biāo)志，這是因?yàn)榻q毛上皮細(xì)胞的再生主要來(lái)源于隱窩內(nèi)未分化細(xì)胞，未分化細(xì)胞自隱窩向絨毛頂端不斷移動(dòng)，逐漸成熟，從而使絨毛頂端不斷脫落的細(xì)胞得以增生補(bǔ)充。如果隱窩較淺，則對(duì)頂端細(xì)胞的補(bǔ)充過(guò)程減慢，基部的細(xì)胞生成率降低，那么小腸對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收減少。因而隱窩的深淺對(duì)保持腸絨毛的完整形態(tài)和正常機(jī)能有重要作用。非淀粉多糖與小腸上皮黏膜細(xì)胞上的糖蛋白相結(jié)合，形成一層加厚的不動(dòng)水層，限制其吸收速度，同時(shí)能引起動(dòng)物消化系統(tǒng)生理及形態(tài)上的改變，破壞小腸絨毛，造成小腸對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收力下降。本次試驗(yàn)結(jié)果表明，正對(duì)照加酶組隱窩深度比正對(duì)照組增加了27.62%（P＜0.05），負(fù)對(duì)照加酶組隱窩深度比負(fù)對(duì)照組增加了37.71%（P＜0.05），且顯著高于正對(duì)照組。試驗(yàn)證明，非淀粉多糖酶顯著增加了肉仔雞十二指腸隱窩深度和絨毛高度，說(shuō)明非淀粉多糖酶減輕或消除了非淀粉多糖的抗?fàn)I養(yǎng)因子，減輕食糜黏性，小腸絨毛受損減少。

若干篇，刊略，需者可函索）

（編輯：高 雁，snow yan78@163.com）

Q556+.2

A

1001-991X（2011）16-0031-03

呂秋鳳，沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，博士，副教授，110866，沈陽(yáng)市沈河區(qū)東陵路120號(hào)。

林樹(shù)梅、欒新紅、劉梅、安嬌陽(yáng)、曹雙、曹敏建，單位及通訊地址同第一作者。

2011-06-28